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刘建伟
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- 所属机构:中国人民解放军总医院
- 所在地区:北京市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
- 叶玲
- 作品数：70被引量：209H指数：7
- 供职机构：中国人民解放军总医院
- 研究主题：基因多态性 醛糖还原酶 基因突变 绿色荧光蛋白 老年男性冠心病
- 刘静
- 作品数：132被引量：450H指数：11
- 供职机构：中国人民解放军总医院
- 研究主题：医疗保险 醛糖还原酶 护理 基因多态性 绿色荧光蛋白
- 李小鹰
- 作品数：784被引量：4,818H指数：30
- 供职机构：中国人民解放军总医院
- 研究主题：老年人 心力衰竭 老年 高血压 阿司匹林
- 陶国枢
- 作品数：185被引量：836H指数：17
- 供职机构：中国人民解放军总医院
- 研究主题：老年人 高血压 骨质疏松 骨密度 维生素D受体
- 张红红
- 作品数：94被引量：876H指数：12
- 供职机构：中国人民解放军总医院
- 研究主题：维生素D受体 维生素D受体基因 阿尔茨海默病 维生素D受体基因多态性 骨质疏松
- 老年性痴呆部分相关基因多态性的研究被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨散发性Alzheimer’sdisease (AD )患者apoE基因型分布特点、早老素1E318G错义突变、α 巨球蛋白基因 (A2M)Val10 0 0 /Ile10 0 0、线粒体DNA基因 4 336G和MTHFR基因C6 77T突变的情况。 方法 收集 12 7例散发性AD患者和 138例健康老年人基因组DNA ,采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析方法检测基因型。计算各等位基因频率或突变频率。 结果 AD组和正常对照组的apoE基因频率存在差异 ,AD组携带 2个、1个和不含apoE4的比例为2 4 %、18 1%和 79 5 % ;对照组分别为 0 7%、10 1%和 89 2 %。两组均未出现线粒体DNA4 336G突变和ps 1E318G错义突变。散发性AD组和对照组A2MVal10 0 0 /Ile10 0 0 ,G/G基因型分别为0 0 2和 0 0 1;MTHFR基因的C6 77T突变中T突变位点的频率分别为 4 6 3%、4 3 8% ,病例组突变频率略高于对照组 ,经统计分析各组间差异无显著性。 结论 apoE4等位基因可能是散发性AD发生的危险因素。结果未发现A2MVal10 0 0 /Ile10 0 0、MTHFRC6 77T突变、mtDNA4 336G突变和PS 1E318G错义突变与散发AD相关。
- 王磊叶玲吴多斌刘建伟牛俊英王鲁宁
- 关键词：老年性痴呆AD基因多态性APOE基因型阿尔茨海默病
- 优化的多重扩增阻滞突变系统-PCR对载脂蛋白E基因的简易分型
- 2011年
- 目的通过改进和优化多重扩增阻滞突变系统-PCR(multi-ARMS-PCR)条件,建立载脂蛋白E(ApoE)基因的简易分型方法。方法基于multi-ARMS-PCR的原理和特点,针对文献报道方法中存在的缺陷和错误,重新设计或改进引物。以外周血白细胞基因组DNA为模板,应用4个等位基因特异性寡核酸上游引物、1个通用下游引物和一对内参引物,分A,B两个管同步进行多重PCR反应。PCR扩增产物经过琼脂糖凝胶电泳分离-EB染色,根据电泳带型的差异,实现对ApoE 6种基因型的判定。结果新引物显著提高了扩增效率和反应特异性,排除了非特异条带的干扰,减少了ApoE基因分型的错判。结论采用优化后的multi-ARMS-PCR方法对ApoE基因型进行鉴定,具有操作简便、时间短、效率高、成本低的优点,值得推广。
- 刘静刘建伟叶玲
- 关键词：载脂蛋白E基因分型
- SAD、VD与MTHFR基因C677T多态性的相关性分析被引量：2
- 2006年
- 目的为了阐明痴呆与亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T突变的关系,我们进行了MTHFR基因C677T多态性的研究。方法收集散发性痴呆(SAD)患者135例、血管性痴呆(VD)29例及健康老年人(≥65岁)138例外周静脉血样本,采用PCR-RFLP方法检测基因型,计算各等位基因频率或突变频率。结果老年健康人群、SAD病人、VD病人MTHFR基因的C677T多态位点中T位点的频率分别为43．8%、46．3%、51．7%,病例组T频率略高于对照组,经统计分析各组间无显著性差异。结论单独携带MTHFR基因的C677T多态性T位点不会增加患痴呆的风险,提示MTHFR基因的C677T多态性对痴呆可能有弱的致病作用或无致病作用。
- 吴多斌王鲁宁叶玲刘建伟王磊
- 关键词：亚甲基四氢叶酸还原酶
- 我国维吾尔族妇女维生素D受体基因多态性与骨密度关系的研究被引量：4
- 2002年
- 目的 研究我国维吾尔族妇女维生素D受体(VDR)基因多态性分布和骨密度、骨质疏松的关系。方法 采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对30例维吾尔族妇女进行VDR基因分型。并进行双能X线骨密度(BMD)仪的检测。结果 VDR基因检出bb、Bb、BB,基因型分别为60%、33.3％、6.7%。bb、Bb、BB基因型的BMD分别降低为61％(11/18)、50％(5/10)、50％(1/2)。结论 就调查例数而言:中国维吾尔族妇女VDR基因多态性的分布频率以bb基因型最多,其次为Bb型,BB型仅占6.7％。BMD检测显示BMD降低以bb型较显著、Bb型次之。
- 阿丽娅冷兴文陈瑞英李红陶国枢张红红刘建伟高宇红
- 关键词：维生素D受体基因型骨密度基因多态性维吾尔族妇女
- 醛糖还原酶抑制剂细胞筛选模型的建立被引量：1
- 2009年
- 目的:将糖尿病慢性并发症相关基因醛糖还原酶(aldose reductase,AR)基因与腺相关病毒(adeno associated virus,AAV)表达载体pSNAV2.0重组,使其在HEK293细胞中表达,以基因工程表达的AR为靶向,建立醛糖还原酶抑制剂(aldose reductase inhibitor,ARI)细胞筛选模型。方法:首先采用酶切、连接等方法构建含有人AR基因序列的AAV表达载体pSNAV-hAR,将重组质粒转染HEK293细胞,通过活性测定、Western blot和免疫荧光检测目的基因转染及表达的情况。结果:PCR、酶切、DNA测序均证实表达质粒pSNAV-hAR构建正确。转染HEK293细胞后,一系列分析结果显示,腺相关病毒表达载体介导的AR真核细胞表达产物是具有功能活性的目的蛋白。应用经典醛糖还原酶抑制剂Sobinil和Zopolrestat对此模型进行了验证。结论:AR高表达细胞模型的建立,为进一步筛选ARI、探讨多元醇通路学说在糖尿病慢性并发症发病机制中的作用奠定了基础。
- 刘静刘建伟杜明梅杨立娜叶玲
- 关键词：醛糖还原酶腺相关病毒细胞模型
- 老年性痴呆发病与ps-1基因E318G错义突变的相关性被引量：1
- 2003年
- 目的:探讨ps-1E318G错义突变与老年性痴呆发病之间的关系,为痴呆的临床诊断提供分子生物学指标。方法:收集散发老年性痴呆患者135例、血管性痴呆(vasculardisease,VD)29例和健康老年人(≥65岁)138例血标本。痴呆诊断按照ICD-10标准入组。蛋白酶K消化和酚/氯仿法提取基因组DNA,采用PCR-RFLP方法检测E318G突变。结果:本研究所观察的北京市区老年健康人群、散发性痴呆患者、VD患者中未发现ps-1的E318G错义突变。结论:ps-1的9号外显子E318G突变位点与老年性痴呆无关,或者该突变位点在北京市人群极低而未被发现。推测痴呆发病与E318G错义突变无关。
- 吴多斌王磊叶玲刘建伟王鲁宁
- 关键词：老年性痴呆错义突变
- 雄激素受体基因第一外显子区CAG缺失的构建及其在HEK293细胞中的表达
- 2007年
- 目的:构建雄激素受体基因第一外显子区CAG重复序列缺失的突变重组体,观察CAG重复序列的有/无对雄激素受体转录及表达的调控作用。方法:实验于2006-05/2007-05在解放军总医院老年医学研究所完成。按照重叠延伸反应的原理扩增CAG重复序列两端的基因片段,再将两片段混合,在加入一个引物的情况下进行8个PCR循环以有效完成重叠延伸,然后再加入另一引物进行22个循环,完成目的片段指数扩增,将目的片段克隆至真核表达载体PAR-IRES2-EGFP,转染HEK293细胞,采用Western blot法检测HEK293细胞雄激素受体蛋白。结果:构建的CAG重复序列缺失的突变重组体经酶切鉴定和DNA测序证实构建正确,转染真核细胞可检测到雄激素受体基因的表达。结论:重叠延伸PCR是进行体外基因拼接、体外缺失突变的简单、快速的基因重组技术;雄激素受体基因第一外显子区CAG重复序列缺失的突变重组体的成功构建可为今后的相关研究提供实验基础。
- 杨立娜叶玲刘静刘建伟阴大伟杜明梅
- 关键词：重叠延伸PCR雄激素受体质粒构建
- 载脂蛋白E基因多态性与老年外周动脉硬化闭塞病的相关性
- 2010年
- 目的探讨北京万寿路社区老年人群载脂蛋白E(apoE)基因多态性与老年外周动脉硬化闭塞病(peripheralarterial occlusive disease,PAOD)的相关性。方法用多重四引物扩增受阻突变体系PCR技术,检测了153例老年PAOD患者(PAOD组)及246例健康老年人(NC组)的apoE基因多态性。结果 apoE等位基因呈多态性。apoE6种基因型频率(ε4/4,ε4/3,ε4/2,ε3/3,ε3/2,ε2/2)及3种等位基因频率(ε4,ε3,ε2)的分布在老年PAOD组与NC组间无显著差异(P>0.05)。结论 apoE基因多态性不是老年PAOD的独立危险因素。
- 刘建伟刘静李小鹰叶玲
- 关键词：载脂蛋白E类动脉闭塞性疾病外周血管疾病聚合酶链反应
- 北京社区人群脂联素和过氧化物酶增殖物活化受体γ2基因多态性及其交互作用与2型糖尿病的关系被引量：16
- 2006年
- 目的:分析中国北京社区人群脂联素基因+45T/G和过氧化物酶增殖物活化受体γ2基因Pro12Ala多态性及其交互作用与2型糖尿病的关系。方法:自2001年解放军总医院老年医学研究所“对万寿路等社区的流行病学调查”人群中选出无亲缘关系2型糖尿病患者(糖尿病组)195例,非糖尿病对照(非糖尿病组)139例。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析两组受试者脂联素+45T/G与过氧化物酶增殖物活化受体γ2Pro12Ala多态性各基因型分布频率,用Logistic回归分析了解基因间的交互作用。结果:334例全部进入结果分析。①脂联素+45T/G多态性各基因型分布频率为:糖尿病组,TT52.8%,TG35.4%,GG11.8%;非糖尿病组,TT56.1%,TG41.0%,GG2.9%,糖尿病组GG型明显多于非糖尿病组(P<0.01)。②过氧化物酶增殖物活化受体γ2Pro12Ala多态性各基因型分布频率为:糖尿病组PP90.8%,PA9.2%;非糖尿病组PP89.9%,PA9.4%,AA0.7%,两组间各基因型频率分布差异无显著性(P>0.05)。③两位点交互作用组间比较,具有脂联素+45TG+GG型和过氧化物酶增殖物活化受体γ2PA+AA型者患2型糖尿病的风险较高(P<0.05)。结论:脂联素+45T/G多态性与2型糖尿病存在相关性,其纯和突变型GG型罹患率较高;未发现过氧化物酶增殖物活化受体γ2Pro12Ala多态性与2型糖尿病有关;上述两位点存在交互作用,携带脂联素+45G等位基因和过氧化物酶增殖物活化受体γ2Ala12等位基因者易患2型糖尿病。
- 翟冰叶玲刘建伟刘静
- 关键词：非胰岛素依赖型过氧化物酶体类多态性单核苷酸交互分析脂联素
- 健康老年男性雄激素受体基因CAG重复序列多态性研究
- 2006年
- 目的研究健康老年男性雄激素受体(AR)基因CAG重复序列多态性。方法使用DNA测序方法对102例健康老年男性AR基因外显子1 NH_2-端转录调节区内CAG重复序列长度进行测定。结果男性AR基因CAG重复数最短为8,最长为35。CAG重复数平均值为22．83±3．97。CAG重复数分布频率最多的为21(17．6%),22 (14．7%),23(15．7%)和24(6．9%),共占54．9%。结论健康老年男性AR基因CAG重复序列呈现多态性,多数集中在21-24。为进一步研究AR基因变异与疾病的关系提供依据。
- 楚新梅李小鹰梁春红叶玲刘建伟
- 关键词：受体雄激素外显子限制性片段长度
