胡春华
作品数: 63被引量:134H指数:9
  • 所属机构:广东省农业科学院
  • 所在地区:广东省 广州市
  • 研究方向:农业科学
  • 发文基金:国家自然科学基金

相关作者

易干军
作品数:362被引量:2,104H指数:24
供职机构:广东省农业科学院
研究主题:香蕉 柑橘 荔枝 香蕉枯萎病 菠萝
杨乔松
作品数:47被引量:88H指数:6
供职机构:广东省农业科学院
研究主题:香蕉 香蕉枯萎病 枯萎病 基因 香蕉果实
盛鸥
作品数:68被引量:179H指数:9
供职机构:广东省农业科学院
研究主题:香蕉 果肉 香蕉枯萎病 枯萎病 美食
魏岳荣
作品数:162被引量:735H指数:16
供职机构:广东省农业科学院
研究主题:香蕉 番木瓜 胚性细胞悬浮系 植株再生 选育
李春雨
作品数:125被引量:407H指数:13
供职机构:广东省农业科学院
研究主题:香蕉 香蕉枯萎病 香蕉枯萎病菌 韭菜 生物有机肥
几丁质酶基因转化巴西香蕉的研究
为建立高效的香蕉遗传转化体系并将几丁质酶基因转到香蕉主栽品种巴西蕉中,以获得抗香蕉枯萎病的新种质,本研究以巴西蕉球茎横切薄片为转化受体,摸索了卡那霉素和G-418的最佳筛选浓度,优化了共培和筛选等条件,建立了以农杆菌介导...
胡春华易干军魏岳荣黄秉智黄永红
关键词:香蕉转基因
文献传递
利用SSH技术鉴定香蕉体细胞胚发生相关基因被引量:1
2011年
本研究以野生蕉胚性悬浮系为材料,将胚性细胞增殖培养基上的香蕉胚性悬浮系作为对照,体胚诱导培养基上的培养材料为处理,利用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术,构建野生蕉胚性悬浮系激素诱导的胚胎发育差异表达cDNA文库,随机挑选阳性克隆并进行生物信息学分析。结果显示,聚类得到62条非冗余EST。经Blast比对后发现其中18条没有对应功能的相似序列,46条在GenBank中有同源序列,其中12条为功能未知的基因。在文库中功能已知的ESTs中,这些基因涉及基础代谢(primary metabolism)、蛋白结合(protein binding)、转录(transport)细胞分化(cell differentiation)等功能。文库中发现了一些可能与体细胞胚胎发育相关的基因如TPD1基因、热激蛋白基因、谷胱甘肽-S-转移酶基因、锌指蛋白基因以及细胞壁富含羟脯氨酸糖蛋白基因等。试验结果为获得香蕉体细胞胚胎发育相关基因全长并验证这些基因的功能提供依据。
胡春华魏岳荣易干军
关键词:香蕉抑制性消减杂交体细胞胚
半矮化香蕉基因编辑载体及其构建方法和应用
本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9的香蕉GA20ox2基因编辑载体及其构建方法和应用,针对香蕉基因的序列,设计基因编辑靶位点及其引物,以及在构建香蕉GA20ox2基因编辑载体时结合特定的扩增程序,构建得到合理的s...
杨乔松邵秀红易干军胡春华
文献传递
香蕉细胞工程育种关键技水研究与应用
魏岳荣胡春华盛鸥易干军李春雨黄霞邝瑞彬杨乔松黄学林黄秉智杨护董涛黄永红
所属科学技术领域:该成果所属科学技术领域为农业种质资源创新技术研究及新品种选育。主要技术内容:建立多个香蕉品种资源的胚性细胞悬浮系;通过体细胞融合途径进行种质创新;建立香蕉高效遗传转化技术体系并进行转基因技术种质创新;利...
关键词:
关键词:香蕉化学诱变育种
香蕉果实酵母双杂交文库的构建及后熟转录因子MaMADS2互作蛋白筛选被引量:2
2023年
[目的]本文旨在鉴定香蕉果实后熟关键调控因子MaMADS2的互作蛋白,深入解析MaMADS2影响香蕉果实后熟过程的分子机制。[方法]以MaMADS2为诱饵利用酵母双杂交文库获得候选互作蛋白,通过克隆候选互作基因编码区进行点对点酵母双杂交试验来验证互作情况;利用转录组学分析互作蛋白相关基因在后熟过程中的表达情况;利用双分子荧光互补试验鉴定重要互作蛋白与MaMADS2的互作;最后用蛋白免疫印迹分析MaMADS2蛋白在香蕉后熟过程中的表达。[结果]成功构建了果实在乙烯利催熟下的cDNA文库,初级和次级文库的库容分别为2.9×10^(6)和3.2×10^(6)CFU·mL^(-1),平均插入片段大小在1200 bp以上,可满足后续酵母双杂交筛选的要求。最终共鉴定出7个互作蛋白,其中有2个MADS-box转录因子,3个E3泛素连接酶,2个具有转录抑制作用的蛋白。转录组数据表明,乙烯利可抑制2个MADS-box基因的表达,而1-甲基环丙烯(1-MCP)对其表达起诱导作用。双分子荧光互补试验表明,MaMADS2与MADS-box转录因子Ma04_p30020.1存在互作关系。蛋白免疫印迹分析显示,MaMADS2在后熟过程中蛋白水平逐渐降低,这与其可以和E3泛素连接酶互作是一致的。[结论]通过构建高质量的果实cDNA文库与酵母双杂交筛库技术,鉴定出多个与MaMADS2互作的蛋白,并明确了MaMADS2与另一MADS-box转录因子Ma04_p30020.1之间存在明显的互作关系。
王川盛鸥窦同心李斌胡春华杨乔松邓贵明董涛李春雨易干军毕方铖
关键词:香蕉果实成熟
农杆菌介导GUS基因转化贡蕉的研究
本文以贡蕉‘Pisang Mas'(AA)胚性悬浮细胞系为转化受体,通过农杆菌介导gusA基因的转化,优化和完善农杆菌介导的香蕉遗传转化体系,为更多外源目的基因转入香蕉奠定基础。
胡春华魏岳荣易干军黄永红
关键词:农杆菌介导GUS基因遗传转化体系
文献传递
香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系的建立被引量:30
2017年
【目的】建立香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系,为在香蕉上利用CRISPR/CAS9技术开展香蕉基因功能研究和香蕉育种工作开辟新的路径。【方法】根据香蕉A基因组八氢番茄红素脱氢酶(phytoene dehydrogenase,PDS)基因组序列,利用在线工具ZiFiT Targeter Version 4.2确定合适的CRISPR/Cas9靶标序列,选择其中一个位点作为靶标位点,设计包含靶标基因MaPDS序列的sgRNA。利用一套改良的CRISPR/Cas9多靶点载体系统,以pYLg RNA-Lac Z-U6a质粒为模版,Overlapping PCR法构建U6a-sgRNA表达盒,再利用Golden Gate Cloning法将U6a-sgRNA表达盒克隆到pYLCRISPR/Cas9载体中,构建以MaPDS为靶标基因的pYLCRISPR/Cas9-sgRNA载体。构建的质粒含Cas9p和sgRNA表达盒,其中Cas9p由P_(Ubi)启动子驱动,sgRNA由水稻来源的RNA启动子U6a驱动。将构建好的载体转入农杆菌EHA105,转化香蕉主栽品种巴西蕉胚性细胞悬浮系,获得抗性再生植株。设计PCR引物扩增包含靶标序列的MaPDS序列片段,检测和分析再生植株MaPDS被编辑的情况。【结果】试验选择MaPDS作为CRISPR/Cas9靶标基因,设计一个靶标位点,利用Overlapping PCR法获得了U6a-sgRNA表达盒,利用Golden Gate Cloning法将其克隆到pYLCRISPR/Cas9的Bsa I位点,成功构建了针对MaPDS的pYLCRISPR/Cas9-sgRNA载体。经过农杆菌浸染、抗性筛选、抗性胚诱导、萌发及生根,最终获得抗性独立转化株系129个。其中,71个株系出现白化表型,产生白化表型的几率达55%。失绿突变体的出现意味着MaPDS蛋白功能丧失。随机取转化株系中的白化表型株系33个和正常表型株系14个,提取其叶片基因组DNA,扩增含有MaPDS的靶位点片段,序列分析结果表明,白化表型株系的MaPDS靶位点序列发生了基因编辑。主要是在靶位点附近增加1个碱基T或A,或是在靶位点附近或下游发生碱基颠换或转换,出现非靶标位点突变。这些突变形式均能导致MaPDS蛋白翻译错误,从而使MaPDS蛋
胡春华邓贵明孙晓玄左存武李春雨邝瑞彬杨乔松易干军
关键词:香蕉
“Gros Michel”香蕉胚性细胞悬浮系及遗传转化体系的建立被引量:1
2019年
本研究以"Gros Michel"香蕉未成熟雄花序为外植体,建立了其胚性细胞悬浮系及遗传转化体系。结果表明,90 d后可诱导产生浅黄色松散的胚性愈伤组织,经悬浮培养120 d后获得含有均质细胞团的胚性细胞悬浮系(ECS);将3个月龄的ECS置于胚诱导培养基30 d后有大量白色半透明状球形的体细胞胚发生,继代培养60 d后发育为成熟不透明的体细胞胚;将成熟的体胚在萌发培养基上培养10 d后有幼芽产生,转移至生根培养基30 d后得到幼苗。同时开展了含绿色荧光蛋白(GFP)的pCAMBIA0380载体的遗传转化研究,经过3次液体培养基筛选转移至半固体筛选培养基90 d后,在胚萌发培养基和生根培养基中不再添加抗生素。经对转化植株的根尖镜检及PCR鉴定,均为阳性植株。研究结果将为进一步开展"Gros Michel"优质抗病基因功能研究提供材料和技术支撑。
邵秀红邵秀红窦同心吴少平窦同心邓贵明盛鸥毕方铖胡春华
关键词:香蕉胚性细胞悬浮系遗传转化体系
一种香蕉A、B基因组的分型方法
本发明公开了一种香蕉A、B基因组的分型方法,该方法包括以下步骤:利用PCR‑RFLP标记区分尖叶蕉、长梗蕉基因组,利用IRAP标记确定长梗蕉基因组的个数,结合流式细胞仪测定的倍性结果,确定香蕉种质资源基因型。使用本发明提...
盛鸥邓贵明杨乔松毕方铖李春雨胡春华董涛易干军
文献传递
香蕉ACO反义基因转化夫人指蕉的研究
2016年
该研究利用RT-PCR法,从成熟夫人指蕉(Musaspp.AAgroup)果实中分离得到ACO基因编码区全序列,经测序分析,该基因编码区共957bp,编码318个氨基酸,与已报道的香蕉ACO基因的同源性为77%~99%。在此基础上,将ACO基因反向插入到植物表达载体131321得到重组质粒p1321-aACO。
胡春华
关键词:基因转化香蕉基因编码区RT-PCR法