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肖颂华
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- 所属机构:中山大学孙逸仙纪念医院
- 所在地区:广东省 中山市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:广东省自然科学基金
相关作者
- 刘军
- 作品数：424被引量：2,194H指数：25
- 供职机构：广东省第二中医院
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- 邢诒刚
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- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院
- 研究主题：C17.2神经干细胞 神经干细胞 帕金森病 NURR1基因 放射性脑病
- 陶恩祥
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- 研究主题：阿尔茨海默病 帕金森病 帕金森病患者 疗效观察 临床异质性
- 鼻咽癌放疗后放射性脑病患者医院内肺部感染临床分析被引量：4
- 2009年
- 目的探讨鼻咽癌放疗后放射性脑病(RIB)医院内肺部感染的发生特点和原因以及寻找有效的治疗措施。方法对2004年10月-2007年6月RIB医院内肺部感染的病原菌培养结果、药敏试验结果进行回顾性调查并进一步分析。结果RIB并医院内肺部感染的发生率为68.85%,肺部感染发生主要与球麻痹、有创性操作、激素等药物的使用等有关;肺部感染病原菌以G-菌为主,占76.66%。结论RIB并医院内肺部感染与多种因素有关,根据药敏试验使用抗菌药物、加强对医院感染危险因素的控制是重要的防治措施。
- 徐玲肖颂华刘军邢诒刚刘运林
- 关键词：放射性脑病肺部感染
- 人血管内皮生长因子165基因腺病毒载体的构建及其在C17.2神经干细胞的表达被引量：3
- 2005年
- 【目的】构建含有人血管内皮生长因子165(VEGF_(165))基因的重组腺病毒载体并观察其在 C17.2神经干细胞的表达,为下一步脑缺血的转基因细胞移植治疗提供基础。【方法】将 VEGF_(165)基因克隆至腺病毒穿梭质粒 pAdTrackCMV,获得重组质粒 pAdTrack VEGF_(165)。经酶切线性化后,与腺病毒骨架质粒 pAdEasy 共同转染大肠杆菌 BJ5183同源重组获得重组腺病毒质粒,将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得有感染能力但复制缺陷的重组腺病毒 pAdCMV VEGF_(165),转化体外培养的 C17.2神经干细胞。通过 RT-PCR、原位杂交、免疫组化、Western blot 法检测其在 C17.2神经干细胞中的表达。【结果】重组腺病毒 AdCMV VEGF_(165)在293细胞中包装成功,病毒滴度达2×10^(11)efu/mL。病毒上清液经 ELISA 检测VEGF_(165)表达的量为(1135±138)ng/L。重组腺病毒转染神经干细胞后有稳定表达。【结论】成功构建 pAd VEGF_(165)重组腺病毒,获得了稳定表达 VEGF_(165)的神经干细胞克隆,为下一步脑缺血的转基因细胞移植治疗提供了基础。
- 沈庆煜黎祥喷陶恩祥肖颂华王莉梅邢诒刚
- 关键词：血管内皮生长因子腺病毒科神经干细胞
- AADC和NURR1基因联合c17．2神经干细胞移植治疗帕金森病的实验研究被引量：3
- 2005年
- 目的研究芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)基因和NURR1基因联合c17．2神经干细胞脑内移植后对帕金森病模型大鼠的治疗效果。方法人类神经元性AADC基因和NURR1基因真核表达载体分别转染至c17．2神经干细胞内。将帕金森病(PD)模型大鼠随机分为4组,分别予以脑内毁损侧纹状区移植含空质粒的c17．2神经干细胞(A组),pCDNA3-AADC转染后的c17．2神经干细胞(B组),pCDNA3-NURR1转染后的c17．2神经干细胞(C组)以及含有pCDNA3-AADC和pCDNA3-NURR1转染后的c17．2 神经干细胞(D组)。观察其病理性旋转行为的改善,采用酪氨酸羟化酶(TH)的免疫组化方法研究脑内多巴胺含量的变化,并用荧光示踪方法观察c17．2细胞在PD模型脑内的移行。结果各组动物脑内移植后动物旋转行为较前均有改善(P<0．05),尤以D组改善最为明显,其行为学最大改善达73．7％,且同A、B、C组间差异具有显著性(P<0．05)。免疫组化可见各组移植TH阳性细胞明显增多,TH染色的神经元树突或轴突密集,体内TH阳性区域明显较PD模型组扩大,其中尤以D组病理学改善最为明显。荧光示踪观察c17．2神经干细胞有突触形成,并与临近的细胞建立突触联系。结论 AADC基因联合NURR1基因共转染c17．2神经干细胞脑内移植后改善了动物的旋转行为,增加了脑内多巴胺的表达,且植入的神经干细胞可同宿主神经元形成突触联接,为研究多基因联合神经干细胞移植治疗帕金森病提供了新方法。
- 刘军李庆军周道友肖颂华杨淞然杨炼红邢诒刚
- 关键词：NURR1基因C17.2神经干细胞帕金森病基因治疗
- 外源性碱性成纤维细胞生长因子对放射诱导神经干细胞凋亡的抑制效应被引量：4
- 2009年
- 背景：已证实放射性神经干细胞损伤是放射性脑损伤的可能途径之一，而碱性成纤维细胞生长因子对放射性损伤具有保护作用，但其机制尚不清楚。目的：观察外源性碱性成纤维细胞生长因子对放射诱导C17．2神经干细胞凋亡的抑制作用。设计、时间及地点：随机分组设计，对比观察，于2006-11／2008—06在中山大学附属第二医院林百欣实验中心完成。材料：C17．2神经干细胞系为小鼠小脑祖细胞永生化后构建的神经干细胞系。方法：以直线加速器进行总量为8Gy外照射C17．2神经干细胞建立离体放射性损伤模型，以1×10^7L^-1的细胞浓度接种C17．2神经干细胞悬液至96孔板，每孔加细胞悬液200uL，按0，25，50，100μg／L（0μg／L作对照）分别加入碱性成纤维细胞生长因子干预。主要观察指标：四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性并拟合生存曲线，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：随碱性成纤维细胞生长因子浓度升高，C17．2神经干细胞增殖比明显增加（P〈0．01），呈现明显剂量效应关系。碱性成纤维细胞生长因子浓度为100ug／L时活性最强，未显示细胞毒性。流式细胞仪检测结果显示：对照组细胞凋亡率高于25，50ug／L碱性成纤维细胞生长因子组（P〈0．01），25，50，100μg／L碱性成纤维细胞生长因子组组间相比，差异具有显著性意义（P〈0．05～0．01）。结论：外源性碱性成纤维细胞生长因子对放射诱导的C17．2神经干细胞凋亡具有明显抑制作用。
- 周海红刘运林刘军肖颂华邢诒刚赵斌
- 关键词：放射性脑损伤碱性成纤维细胞生长因子神经干细胞凋亡
- pCDNA3-AADC真核表达载体的构建及其在原代培养骨骼肌细胞中的表达被引量：5
- 2002年
- 目的 将人类神经元性芳香族氨基酸脱羧酶（AADC）基因构建于含CMV启动子的真核表达载体pCD-NA3上,并检测其在原代培养骨骼肌细胞中的表达。方法 采用分子克隆技术将经测序证实的人神经元性AADC基因片段同真核表达载体pCDNA3连接,酶切鉴定并筛选出正向连接重组体,并采用脂质体转染法将其导入原代培养的骨骼肌细胞,免疫印记检测该基因的表达。结果 酶切证实基因片断正向连接于pCDNA3上,并在原代骨骼肌细胞中获得表达。结论 含人类神经元AADC基因的真核表达重组体可在原代培养的骨骼肌细胞中有效的表达。
- 刘军肖颂华陶恩祥邢诒刚梁秀龄
- 关键词：原代培养骨骼肌细胞免疫印记帕金森病
- 6-羟多巴胺诱致大鼠早期黑质多巴胺能神经元凋亡的实验研究被引量：16
- 2003年
- 目的 探讨在 6 羟多巴胺 (6 OHDA)作用下SD大鼠黑质神经元极早期的凋亡发生率以及相应的时程变化。 方法 使用 6 OHDA立体定向注射于SD大鼠纹状体区 ,分别在 6、12、2 4、4 8、72、96h、1周及 2周时采用原位末端标记法检测黑质细胞的凋亡 ,并使用流式细胞仪检测其凋亡率 ,同时运用免疫组化的方法观察相应时间纹状体区多巴胺能神经纤维的含量的变化。 结果 在6 OHDA作用后 6h即可检测到黑质细胞的凋亡 ,在 4 8h达到高峰 ,凋亡率为 (6 4± 0 2 ) % ,在 2周时为 (1 0± 0 1) %。同时 ,随着黑质细胞的凋亡 ,纹状体区多巴胺能神经纤维的含量逐渐减少 ,2周时减少约 70 %。 结论 进一步证明了黑质细胞凋亡是早期帕金森病模型大鼠黑质细胞死亡的主要方式之一 ,是纹状体区酪氨酸羟化酶 (TH)减少的主要原因。
- 刘军肖颂华周道友刘中霖陶恩祥邢诒刚
- 关键词：6-羟多巴胺黑质多巴胺神经元凋亡
- 立普妥对脑梗塞患者颈动脉内膜-中层厚度的影响
- 吕瑞妍肖颂华刘军杨炼红陶恩祥
- 关键词：立普妥颈动脉内膜-中层厚度脑梗塞
- 新型脑保护剂依达拉奉治疗放射性脑病的临床研究被引量：12
- 2006年
- 目的探讨新型脑保护剂依达拉奉治疗放射性脑病的疗效。方法将42例鼻咽癌放疗后放射性脑病患者随机分为试验组(传统常规治疗方法合用依达拉奉)和对照组(传统常规治疗方法)。观察两组治疗前后的临床评分、凝血功能指标、头颅磁共振以及世界卫生组织生存质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)评分的变化。结果试验组临床治疗的显效率(50．0%)和总有效率(88．9%)明显高于对照组(14．3%和42．9%)；头颅MRI显示治疗后实验组病灶体积较对照组明显缩小；WHOQOL-BREF评分显示在生理、心理、社会环境、总的生活评分方面试验组均较对照组有明显的改善：且两组在凝血功能方面无明显差异。结论依达拉奉对放射性脑病的治疗具有明显的效果。
- 刘军刘运林黄仕雄刘中霖肖颂华李艺贺峰周海红邢诒刚
- 关键词：放射性脑病依达拉奉
- 人血管内皮生长因子165基因转染对C17.2神经干细胞体外增殖分化的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:构建含有人血管内皮生长因子165基因的重组腺病毒载体,并观察其对C17.2神经干细胞体外增殖和分化的影响。方法:将血管内皮生长因子165基因克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,经酶切线性化后,与腺病毒骨架质粒pAdEasy共同转染大肠杆菌BJ5183同源重组获得重组腺病毒质粒,将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得有感染能力但复制缺陷的重组腺病毒pAdCMV血管内皮生长因子165,转染体外培养的C17.2神经干细胞。以单纯携带绿色荧光蛋白腺病毒转染为对照1组。通过酶联免疫吸附测定检测其在C17.2神经干细胞中不同时间段的表达。C17.2神经干细胞培养24h后,将pAdCMVGFP和pAdCMV血管内皮生长因子165转染C17.2神经干细胞(pAdCMV绿色荧光蛋白和pAdCMV血管内皮生长因子165转染组),24,48,72h后每孔加入四氮唑盐10μL,检测pAdCMV转染对C17.2神经干细胞增殖的影响。将未进行pAdCMV绿色荧光蛋白,pAdCMV血管内皮生长因子165转染C17.2神经干细胞设为对照2组。收集C17.2神经干细胞(C17.2神经干细胞组)和已经转染pAdCMVVEGF165的C17.2神经干细胞(pAdCMV血管内皮生长因子165的C17.2神经干细胞组),对两组细胞进行培养,将上述细胞爬片进行多聚甲醛固定,行巢蛋白和神经元特异性烯醇化酶免疫组化法检测。结果:①重组腺病?
- 沈庆煜王艺东李梅黎祥喷吕瑞妍肖颂华王莉梅邢诒刚
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- 利福平对鱼藤酮诱导的PC12细胞的保护作用及机制研究
- 井秀娜毕伟曾志芬梁嫣然伍霞陈颖肖颂华刘军杨炼红刘淑琼陶恩祥
