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于美娟
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- 所属机构:中山大学附属第一医院
- 所在地区:广东省 广州市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
- 张成
- 作品数：636被引量：1,502H指数：18
- 供职机构：中国科学院
- 研究主题：DUCHENNE型肌营养不良症 肌营养不良 DMD 家系 假肥大型肌营养不良症
- 廖卫平
- 作品数：276被引量：991H指数：15
- 供职机构：广州医科大学
- 研究主题：癫痫 SCN1A 钠通道 拉莫三嗪 脑电图
- 冯善伟
- 作品数：87被引量：355H指数：9
- 供职机构：中国残疾人联合会
- 研究主题：MDX鼠 假肥大型肌营养不良症 DUCHENNE型肌营养不良症 神经元样细胞 骨髓间充质干细胞
- 王淑辉
- 作品数：90被引量：374H指数：9
- 供职机构：首都医科大学附属北京友谊医院
- 研究主题：重症肌无力 MDX鼠 骨髓间充质干细胞 重症肌无力患者 脑炎
- 张雅妮
- 作品数：19被引量：29H指数：3
- 供职机构：中山大学附属第一医院
- 研究主题：MDX鼠 骨髓间充质干细胞 DYSTROPHIN DUCHENNE型肌营养不良症 假肥大型肌营养不良症
- SCN1A基因多态性位点rs2126152与全面性癫痫伴热性惊厥附加症的相关性研究被引量：4
- 2012年
- 目的:筛查全面性癫痫伴热性惊厥附加症(GEFS+)患者的SCN1A基因,并探讨GEFS+与SCN1A基因的关系。方法:收集60例GEFS+患者及104例正常对照组血样,应用PCR扩增SCN1A基因的26个编码外显子及与mRNA剪接有关的内含子,进行测序筛查。结果:未发现SCN1A基因突变,但发现1个单核苷酸多态性(SNP)位点:EXON14-37A>C(rs2126152),有2种基因型A/C杂合子和C/C纯合子,两组间基因型比较差异无统计学意义(χ2=0.21,P>0.05),等位基因频率的分布差异也无统计学意义(χ2=0.18,P>0.05)。结论:SCN1A基因单核苷酸多态位点EXON14-37A>C与GEFS+无相关性。
- 秦兵刘超于美娟石奕武廖卫平
- 关键词：全面性癫痫伴热性惊厥附加症突变单核苷酸多态性
- mdx鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养及向肌细胞的诱导分化被引量：1
- 2009年
- 背景:自体干细胞移植治疗可以克服异体干细胞移植治疗的局限性,但目前对于进行性肌营养不良模型mdx鼠骨髓间充质干细胞生物学特性及肌分化潜能研究未见报道。目的:拟建立体外分离培养mdx鼠骨髓间充质干细胞的方法,并观察其成肌分化能力。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-01/07在中山大学附属第一医院神经病学实验室完成。材料:4～6周龄纯系雄性mdx鼠10只,购自美国Jackson实验室,饲养于中山大学北校区动物实验中心。碱性成纤维细胞生长因子和兔抗鼠MHC抗体为Chemicon公司产品。方法:全骨髓法体外分离mdx鼠骨髓间充质干细胞,差速贴壁法纯化扩增,胰酶+EDTA消化传代。取传至第3代的细胞,按1×104/孔接种于24孔板,置于含两性霉素B、碱性成纤维细胞生长因子、胎牛血清的DMEM培养基中向肌细胞方向诱导分化,2周后更换为不含两性霉素B、但添加马血清的DMEM培养基继续培养2周。主要观察指标:鼠骨髓间充质干细胞形态、表面标志、生长曲线及成肌诱导分化。结果:原代培养24h后,鼠骨髓间充质干细胞约80%贴壁生长,第3代细胞多呈梭形,形态比较均一。鼠骨髓间充质干细胞表达CD29和CD44等间质类细胞的表面分子,不表达CD11B和CD45等淋巴造血细胞的表面分子。接种后第一两天细胞处于潜伏期,第3天细胞增殖旺盛,进入对数生长期,至第4天细胞数增长一倍,第5天进入平台期。两性霉素B诱导后细胞有少量死亡,停用后更换马血清促进细胞成肌,7～10d可见有肌管样细胞形成,免疫荧光染色可见肌管样细胞呈MHC阳性,DAPI复染后可见肌细胞内有多个细胞核。结论:在两性霉素B与马血清依次诱导条件下,体外可成功分离培养基因缺陷mdx鼠骨髓间充质干细胞,并证明其具有成肌分化潜能。
- 王淑辉尚延昌张成于美娟张雅妮熊符申本昌卢锡林
- 关键词：骨髓间充质干细胞肌细胞MDX鼠分化
- 蛋白转导在基因治疗中的应用被引量：5
- 2006年
- 蛋白转导是近几年生命科学领域发现的一种独特现象,具有蛋白转导功能的蛋白通过几个短的碱性小肽组成的蛋白转导域(proteintransductiondomain,PTD)的介导,能将与其共价连接的DNA、多肽或蛋白质以及其他大分子物质通过非经典途径穿过细胞膜甚至血脑屏障,并在细胞间自由传递。PTD这种能携带融合蛋白自由进入细胞的独特功能为人类一些疾病的基因治疗提供了一种新的运载工具,在基因治疗中有着美妙的应用前景。
- 熊符张成于美娟
- 关键词：蛋白转导蛋白转导域基因治疗
- 小鼠骨髓间充质干细胞分离培养方法的建立被引量：2
- 2009年
- 目的建立培养小鼠骨髓间充质干细胞(none mesenchymal stem cells,BMSCs)的分离培养方法。方法采用全骨髓体外分离并采用差速贴壁法纯化扩增C57BL/6小鼠BMSCs,形态学观察细胞生长情况,流式细胞仪检测其表面抗原情况并观察其多项分化潜能。结果使用该方法纯化扩增的BMSCs形态均一,生长良好,表达CD29、CD44和Sca-1,不表达CD11b、CD45和CD34,并具有成骨成脂潜能。结论通过全骨髓贴壁法可以成功的分离培养出小鼠BMSCs。
- 于美娟张雅妮冯善伟熊符张成
- 关键词：骨髓间充质干细胞小鼠细胞培养
- 具有SCN1A基因错义突变(R1596C)的遗传性GEFS+家系1例报道被引量：4
- 2009年
- 目的总结一个全面性癫痫伴热性惊厥附加症(generalized epilepsy with febrile seizures plus,GEFS+)家系的钠通道α1基因(voltage-gated sodium channelα1-subunit,SCN1A)及其临床特性。方法总结该家系患者的临床特征,应用变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术筛查SCN1A全部26个外显子,对发现有异常洗脱峰者再进行直接测序。结果该家系中三位患者均具有典型GEFS+的临床特点,她们在SCN1A基因第25号外显子发现有相同的杂合突变(c.4876C>T),并导致编码的氨基酸改变(R1596C)。结论GEFS+是呈常染色体显性方式遗传的一种癫痫综合征,可由SCN1A基因错义突变导致。
- 于美娟陈俐高玫梅廖卫平
- 关键词：全面性癫痫伴热性惊厥附加症色谱法钠通道
- 颅脑CT对儿童癫痫的诊断价值
- 2002年
- 目的 探讨颅脑CT对儿童癫痫的诊断价值。方法 回顾性分析近 2年来我院门、急诊及住院的 31 6例儿童癫痫患者的颅脑CT检查资料。结果 31 6例中 84例 (2 6 .6 % )颅脑CT异常。其中隐源性癫痫1 74例中有 8例 (4.6 % )异常 ,急性症状性癫痫 1 0 4例中有 64例 (61 .5 % )异常 ,两者差异极显著 (P <0 .0 0 1 ) ,少见症状性癫痫 1 2中 1 1例 (91 7% )异常 ,复杂性高热惊厥 2 6例中仅 1例异常。部分性发作患者虽比全身强直 阵挛性发作异常率略高 ,但无显著性意义 (P >0 .0 5)。结论 对儿童癫痫患者 ,尤其疑为症状性癫痫者应行CT或MRI检查 。
- 刘学伍迟兆富吴伟孙建英于美娟陈善红郭洪志
- 关键词：颅脑CT儿童癫痫
- 癫痫伴热性惊厥附加症患者GABRG2基因内含子突变的体外剪接分析被引量：1
- 2011年
- 目的筛查癫痫伴热性惊厥附加症（EFS＋）患者的GABRG2基因，并对内含子突变进行体外剪接分析。方法收集EFS＋患者血样，应用PCR方法扩增GABRG2基因的9个编码外显子及与mRNA剪接有关的内含子，测序杂合峰的位点，并与110例正常人进行比对。将GABRG2基因第7、8和9外显子及两端部分内含子的PCR产物克隆到pTARGET真核表达载体，构建pTARGET-Exon-7-8-9迷你基因及其Exon8＋45C〉T突变体。野生型与Exon8＋45C〉T突变体分别转染到HEK293细胞，提取RNA进行RT-PCR检测。结果未发现GABRG2基因编码区突变，但在内含子发现1个突变：Exon8＋45C〉T。野生型与Exon8＋45C〉T突变体剪接后的RT-PCR产物大小都为522bp。结论GABRG2基因突变可能不是EFS＋患者主要的致病原因，Exon8＋45C〉T突变不影响GABRG2基因的剪接。
- 刘超秦兵于美娟石奕武廖卫平
- 关键词：癫痫DNA突变分析剪接
- SCN1A基因T1067A多态性与全面性癫痫伴热性惊厥附加症易感性的研究
- 2010年
- 目的:探讨SCN1A基因T1067A多态性与全面性癫痫伴热性惊厥附加症(GEFS+)的相关性。方法:采用PCR、变性高效液相色谱法检测105例GEFS+患者及127名正常人SCN1A基因的第16编码外显子T1067A多态性、基因型频率、等位基因频率,比较癫痫患者及正常人的差异。结果:105例GEFS+患者,AA、AG和GG型分别为82例(78.1%)、20例(19.0%)、3例(2.9%);127名正常人中AA、AG和GG型分别为102例(80.3%)、23例(18.1%)、2例(1.6%),两组间基因型比较差异无统计学意义(P>0.05)。患者中A、G等位基因频率分别为87.6%(184/210)、12.4%(26/210),而正常人中A、G等位基因频率分别为89.4%(227/254)、10.6%(27/254),两组中A、G等位基因频率的分布差异也无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究未发现SCN1A基因T1067A多态性与GEFS+存在相关性。
- 高玫梅石奕武于美娟邓维意秦兵廖卫平
- 关键词：单核苷酸多态性全面性癫痫伴热性惊厥附加症
- 绿色荧光蛋白和成肌调节因子在骨髓基质干细胞中的共表达被引量：3
- 2006年
- 目的:研究重组腺病毒(Ad)对骨髓基质干细胞(MSCs)的转染,以及绿色荧光蛋白(GFP)和成肌调节因子MyoD和Myogenin在MSCs中的表达.方法:用差速贴壁法体外培养大鼠MSCs,并用流式细胞仪(FCM)检测其表面标志;对构建有绿色荧光蛋白的重组腺病毒(AdGFP)进行扩增和鉴定,并转染MSCs;用RTPCR检测MyoD和Myogenin在转染后MSCs中的表达;将MSCs与C2C12成肌细胞共培养,诱导前者的分化,并用免疫荧光检测MyoD的表达.结果:FCM检测证实,在MSCs的表面标志中CD11b和CD45阴性,而CD29和CD44阳性;随着AdGFP感染复数(MOI)的增加,转染效率也相应提高,但在MOI大于100后,MSCs开始出现病变;RTPCR结果提示MyoD和Myogenin在转染后的MSCs中有表达;免疫荧光检测证实诱导后的MSCs可以表达MyoD蛋白.结论:MSCs可以被AdGFP有效转染而表达GFP;同时内源性成肌调节因子的激活,可以促进MSCs的成肌分化.
- 李美山张成陈松林于美娟张雅妮王淑辉熊符
- 关键词：基质干细胞C2C12MYODMYOGENIN绿色荧光蛋白成肌调节因子
- 全面性癫痫伴热性惊厥附加症GABRG2基因突变的筛查
- 2012年
- 目的:筛查全面性癫痫伴热性惊厥附加症(GEFS+)患者的GABRG2基因,并探讨GEFS+与GABRG2基因的关系。方法:收集49例患者及110例正常对照组血样,应用变性高效液相色谱技术对GABRG2基因的10个编码外显子及与mRNA剪接有关的内含子进行筛查,对发现异常洗脱峰者进行测序。结果:未发现GABRG2基因突变,但发现1个单核苷酸多态性(SNP)位点:Exon2-89T>A(rs2284782)。这个SNP位点在两组中基因型和等位基因频率的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GABRG2基因突变可能不是GEFS+患者主要的致病原因,SNP(rs2284782)在患者与正常对照者中分布无明显差异。
- 秦兵刘超朱其详于美娟石奕武廖卫平
- 关键词：癫痫突变单核苷酸多态性
