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乙型脑炎病毒部分NS1{1}假病毒的构建
2024年
目的构建耐核酸酶的含乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)部分非结构蛋白1(Non-structural protein 1,NS1){1}的假病毒,为JEV的实验室核酸检测提供质控品,提高检测质量。方法将JEV部分NS1{1}、蚊18S RNA{1}和人GAPDH{1}片段次序连接克隆到该质粒上,构建重组载体pET-MS2-JEV;转化大肠杆菌后表达纯化假病毒,并对其进行耐受性和稳定性评估。结果构建了重组载体pET-MS2-JEV,表达获得的假病毒具有耐核酸酶、耐物理化学因子的特性,可在4℃和-20℃条件下稳定保存。结论本研究获得了稳定性好的含JEV部分NS1{1}的假病毒,可作为JEV实验室核酸检测的质控品。
龙彩韵王瑞晨姚晓慧武婕慧付士红李樊殷启凯崔倩倩许松涛聂凯王环宇
关键词:乙型脑炎病毒MS2噬菌体假病毒
猫泛白细胞减少症的诊疗分析与猫细小病毒VP2基因和{1}1基因原核表达及鉴定
张含露
一种登革病毒NS1{1}片段裸眼检测平台及制备方法
本发明涉及一种登革病毒NS1{1}片段裸眼检测平台及制备方法,所述裸眼检测平台包括杂交液与AuNRs溶液;所述杂交液是通过采用DNA探针H1和H2对DENV‑NS1序列进行杂交链式反应得到杂交反应液;向杂交反应液加入捕获探...
邬强王媛媛陈倩赵宣姜成龙乔斌
一种登革病毒NS1{1}片段裸眼检测平台在制备登革病毒感染筛查的试剂盒中的应用
本发明涉及一种登革病毒NS1{1}片段裸眼检测平台在制备登革病毒感染筛查的试剂盒中的应用,所述检测平台包括杂交液与AuNRs溶液;所述杂交液是通过采用DNA探针H1和H2对DENV‑NS1序列进行杂交链式反应得到杂交反应液...
邬强 乔斌王媛媛陈倩 赵宣 姜成龙
犬细小病毒CPV-NS1{1}的生物信息学分析
2023年
试验利用生物信息学方法对犬CPV-NS1{1}的开放阅读框、理化性质、亲水性/疏水性、蛋白质二级结构、磷酸化和糖基化位点等进行分析。结果表明,犬CPV-NS1{1}编码668个氨基酸,等电点5.77,不稳定指数41.44,为不稳定蛋白;亲疏水平均值-0.540,属于亲水蛋白;二级结构依次为无规则卷曲含286个、延伸链204个、含有α螺旋178个,犬CPV-NS1{1}60个潜在的磷酸化位点,4个N-糖基化位点。
陈生贤贾明亮张金海杜海波漆亮
关键词:生物信息学
乙型脑炎病毒非结构蛋白NS1{1}的重组表达及其与黄病毒属病毒抗原抗体反应研究
2023年
目的阐明重组表达乙脑病毒非结构蛋白1(Non-structural protein 1,NS1)与包括乙脑病毒在内的多种蚊传黄病毒的抗原抗体反应,以及对乙脑病毒感染患者急性期血清标本的抗原抗体反应。方法本研究使用大肠杆菌原核表达载体(prokaryotic expression vector,pET)系统,重组表达乙脑病毒NS1基因。使用Western Blot实验方法检测重组表达蛋白质与多种,包括乙脑病毒在内的蚊传黄病毒抗体的反应,以及乙脑病毒感染患者急性期血清的抗原抗体反应。结果乙脑病毒(P3株)NS1基因表达产物以包涵体形式存在,经过变性和复性的表达产物在聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE,简称变性胶)显示为单一条带,分子量约为45000。进一步的抗原抗体分析结果表明,表达产物与乙脑病毒(蚊虫分离株,脑炎患者分离株)多克隆或者单克隆抗体以及乙脑病毒感染病人急性期血清标本可以获得完全一致的抗原/抗体杂交反应。重组表达产物与蚊传黄病毒,如登革病毒和黄热病毒多克隆抗体之间抗原/抗体杂交反应为阴性,但与西尼罗病毒和墨累谷脑炎病毒多克隆抗体呈现抗原/抗体阳性杂交反应。结论本文成功获得乙脑病毒NS1蛋白的重组表达并分析了重组蛋白对多种蚊传黄病毒及乙脑病毒感染患者标本之间的抗原/抗体反应,研究结果对于阐明乙脑病毒NS1蛋白与蚊传黄病毒之间抗原抗体反应提供了重要的基础数据。本研究所获得重组表达蛋白为进一步研究乙脑病毒NS1蛋白质功能等提供了重要的物质基础。
张逸嘉姚晓慧曹蕾王瑞晨付士红聂凯李樊殷启凯何英王环宇许松涛马超锋梁国栋
关键词:乙型脑炎病毒NS1基因
一株表达H9N2亚型禽流感病毒全长NS1{1}MDCK细胞系及其构建方法和应用
本发明属于生物技术领域,涉及表达H9N2亚型禽流感病毒全长NS1{1}MDCK细胞系及其构建方法和应用,通过对H9N2AIV NS1{1}进行扩增,并用同源重组的方法整合到phage‑bsd载体上构建了phage‑bsd‑N...
陈素娟印云聪彭大新秦涛刘源刘秀梵
犬猫细小病毒VP2、NS1{1}遗传进化分析及犬瘟热-细小病毒二联多表位抗原研究
犬细小病毒(CPV)及猫细小病毒(FPV)是目前严重危害犬猫的传染病病原,具有发病率及病死率高的特点。CPV及FPV已在全球范围内广泛传播,由于病毒基因突变及基因重组速率较快,目前已发现有6种基因型毒株流行(CPV-2/...
李少晗
关键词:猫细小病毒遗传进化多表位抗原
一种登革病毒NS1{1}片段裸眼检测平台及制备方法
本发明涉及一种登革病毒NS1{1}片段裸眼检测平台及制备方法,所述裸眼检测平台包括杂交液与AuNRs溶液;所述杂交液是通过采用DNA探针H1和H2对DENV‑NS1序列进行杂交链式反应得到杂交反应液;向杂交反应液加入捕获探...
邬强王媛媛陈倩赵宣姜成龙乔斌
14株北京地区犬细小病毒分离毒株的VP2、NS1{1}序列分析被引量:7
2021年
从北京地区疑似细小病毒感染的犬粪拭子中成功分离鉴定出14株犬细小病毒(CPV)毒株,并对其完整的VP2和NS1{1}进行了序列分析。结果表明,鉴定到的14株CPV毒株中,7株为New CPV-2a型,7株为CPV-2c型。此外,NS119、33、293、588、624和656位氨基酸以及VP2的13、574位氨基酸为新鉴定的氨基酸突变位点。基于VP2、NS1{1}的系统进化分析表明,大部分的New CPV-2a型和CPV-2c型毒株与广西南宁和吉林长春地区的分离毒株亲缘关系密切,说明本次分离毒株与广西或吉林地区分离毒株具有相同的起源。本研究为更好地开展犬细小病毒流行病学调查提供了有益借鉴,也为深入研究犬细小病毒变异和传播的分子机制奠定了基础。
李少晗由欣月范君文徐一郝雲峰崔尚金秦彤
关键词:犬细小病毒VP2基因NS1基因进化分析

相关作者

杨涛
作品数:241被引量:757H指数:14
供职机构:东北农业大学
研究主题:蓝舌病病毒 单克隆抗体 蓝舌病 VP2蛋白 原核表达
陈焕春
作品数:1,015被引量:4,211H指数:31
供职机构:华中农业大学
研究主题:伪狂犬病病毒 伪狂犬病毒 克隆 疫苗 单克隆抗体
李建丽
作品数:75被引量:129H指数:6
供职机构:河南农业大学
研究主题:禽流感 NS1基因 H9N2亚型 间接ELISA 疫苗制备
何启盖
作品数:434被引量:1,931H指数:23
供职机构:华中农业大学
研究主题:伪狂犬病病毒 猪伪狂犬病 伪狂犬病 疫苗 胸膜肺炎放线杆菌
刘明
作品数:199被引量:624H指数:13
供职机构:吉林农业大学
研究主题:禽流感病毒 H5N1亚型 昆虫细胞 H5N1亚型禽流感病毒 血凝素基因