搜索到1203篇“ NRK-52E细胞“的相关文章
- 灵芝孢子油及添加维生素E灵芝孢子油对NRK-52E细胞氧化损伤的作用比较
- 2024年
- 灵芝孢子油是从灵芝孢子粉中提取的油状脂质物,其中的不饱和脂肪酸和三萜类灵芝酸是其主要活性成分。是由于其中的不饱和脂肪酸易氧化挥发,研究人员通过添加维生素E以求解决难题,但目前对添加维生素E的灵芝孢子油抗氧化应激活性的系统研究未见报道。因此选用灵芝孢子油(GLSO)及添加5%维生素E的灵芝孢子油(GLSO+VE)2种样品,作用于H2O2处理的大鼠肾小管上皮NRK-52E细胞,以评价、比较对氧化应激损伤的保护作用。结果表明,GLSO和GLSO+VE均能显著性增加NRK-52E细胞存活率,提高抗氧化酶的活性,降低氧化产物水平。比较可知添加维生素E可显著降低灵芝孢子油的细胞毒作用,并在一定程度上增加其抗氧化活性。此次试验初步证实了灵芝孢子油中添加维生素E对抗细胞氧化损伤的增强作用,为添加维生素E以增加灵芝孢子油稳定性的研究提供更多理论依据和支撑数据。
- 张玉坤周俊甫潘新华杨宝学
- 关键词：灵芝孢子油维生素ENRK-52E细胞
- 清肾颗粒对大鼠NRK-52E细胞转分化模型miR-23b和PINK1/Parkin通路的影响
- 2024年
- 目的 探讨TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型中miR-23b对PINK1/Parkin通路的靶向调节机制,并阐明清肾颗粒含药血清对NRK-52E细胞转分化的干预机理。方法 采用超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱法对清肾颗粒进行全指纹图谱分析。构建TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型,转染siRNA后分为模拟物空载对照组、miR-23b-5p模拟物组、抑制剂空载对照组、miR-23b-5p抑制剂组,观察miR-23b-5p对PINK1表达量的影响。再将NRK-52E细胞分组为正常组、TGF-β1组、清肾颗粒组、miR-23b-mimic-NC组、miR-23b-mimic组、miR-23b-mimic+清肾颗粒组,Western blot法检测NRK-52E细胞中Pink1、Parkin、LC3Ⅱ、Beclin-1、P62、α-SMA蛋白表达,RT-qPCR法检测NRK-52E细胞中miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、α-SMA mRNA的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-23b-5p与PINK1的靶向关系。结果 UPLC指纹图谱法鉴定出清肾颗粒中11个活性成分。miR-23b-5p过表达后,PINK1 mRNA表达量也显著增加(P<0.05);而miR-23b-5p表达沉默后,PINK1 mRNA表达量也显著减少(P<0.05)。双荧光素酶报告显示,Rno-miR-23b-5p能显著下调Rno-PINK1-WT荧光素酶活性(P<0.05),但未能下调突变Rno-PINK1-mut荧光素酶活性(P>0.05)。清肾颗粒含药血清干预实验发现,TGF-β1组的miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、LC3Ⅱ表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值均明显低于正常组,P62和α-SMA表达明显高于正常组(P<0.05)。清肾颗粒组和miR-23b-mimic组的miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、LC3Ⅱ表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值均明显高于TGF-β1组,P62和α-SMA表达明显低于TGF-β1组(P<0.05)。miR-23b-mimic+清肾颗粒组的表现更优于miR-23b-mimic组(P<0.05)。结论 清肾颗粒能够上调NRK-52E细胞内miR-23b-5p表达,并通过增强PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬活性,抑制NRK-52E细胞转分化进程。
- 金华张叶青呼琴张磊张磊韩燕全韩燕全
- 关键词：NRK-52E细胞清肾颗粒
- 基于高尿酸诱导的NRK-52E细胞模型探讨ZAG与ERK1/2和p38信号通路的交互作用
- 2024年
- 为探索高尿酸环境诱导下的大鼠肾细胞(NRK-52E)中锌α2糖蛋白(ZAG)与细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和p38形成反馈通路调控肾细胞上皮间质转化(EMT)的机制,将NRK-52E分为正常培养组(N组)和高尿酸培养组(H组)(20 mg/dL的尿酸刺激48 h),每组中的细胞都分别进行ZAG的过表达转染和敲低,观察细胞中ZAG的表达水平与ERK1/2和p38信号通路的交互作用。结果发现:相较于N组,高尿酸环境下的NRK-52E中EMT相关分子的mRNA及蛋白质的表达均上调(P<0.05);在高尿酸环境培养下,上调ZAG会减少NRK-52E在该通路中丝裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)、ERK1/2、p38、活化转录因子2(ATF2)及蛋白激酶B(PKB或Akt)mRNA的表达量(P<0.01),而ZAG的下调则会增加(P<0.05)。在蛋白层面上,相较于未转染组,ZAG上调组的MAPKK、p38和Akt的表达量减少(P<0.05、P<0.01、P<0.001);ZAG下调组的ERK1/2、p38和Akt的表达量增加(P<0.001、P<0.05、P<0.01)。结果表明:ZAG的转染上调会减少NRK-52E中与EMT相关的标志物波形蛋白(vimentin)和层黏连蛋白(laminin)mRNA的表达量;调控ZAG在NRK-52E中的表达量可以在ERK1/2和p38信号通路中起到积极作用,进而抑制肾细胞EMT。该研究为临床治疗高尿酸血症肾病(HN)提供了试验依据。
- 陈柄源杨洁樊凯璇陈秉朴
- 关键词：肾纤维化尿酸性肾病高尿酸
- 清肾颗粒含药血清通过miR-23b-5p靶向Nrf2通路减轻NRK-52E细胞转分化
- 2023年
- 目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)诱导NRK-52E(大鼠肾小管上皮细胞)细胞转分化模型中miR-23b-5p是否能对Nrf2通路靶向调节,并阐明清肾颗粒含药血清减轻NRK-52E细胞转分化的机制。方法构建TGF-β1诱导的NRK-52E细胞转分化模型,分别使用miR-23b-5p mimic、inhibitor以及阴性对照(NC)siRNA转染细胞;采用清肾颗粒含药血清进行干预,分为正常组、TGF-β1组、清肾颗粒组、miR-23b-mimic-NC组、miR-23b-mimic组、miR-23b-mimic+清肾颗粒组。采用CCK8法测定NRK-52E细胞活性;双荧光素酶报告基因实验检测miR-23b-5p与Nrf2间的靶向关系;Westernblot法检测细胞中Nrf2、Keap1、α-SMA蛋白表达;RT-qPCR法检测细胞中miR-23b、Keap1、Nrf2、α-SMAmRNA表达;流式细胞术检测ROS。结果根据CCK8结果筛选得出清肾颗粒含药血清的最佳浓度和时间分别为20%和24h,TGF-β1刺激的最佳浓度和时间分别为10ng/mL和24h。转染miR-23b-5p mimic和inhibitor发现,当miR-23b-5p过表达后,Nrf2 mRNA表达量也增加;而miR-23b-5p表达沉默后,Nrf2 mRNA表达量也减少。双荧光素酶报告显示,Rno-miR-23b-5p能显著下调Rno-Nrf2-wt荧光素酶活性(P<0.05),但未能下调突变Rno-Nrf2-mu荧光素酶活性(P>0.05)。清肾颗粒含药血清的干预实验发现,与正常组比较,TGF-β1组的miR-23b-5p、Nrf2表达降低,Keap1、α-SMA和ROS表达升高(P<0.05)。与TGF-β1组比较,清肾颗粒组的miR-23b-5p、Nrf2表达升高,Keap1、α-SMA和ROS表达降低(P<0.05);miR-23b-mimic组miR-23b-5p、Nrf2表达升高,Keap1、α-SMA和ROS降低(P<0.05)。与miR-23b-mimic-NC组比较,miR-23b-mimic组miR-23b-5p、Nrf2表达升高,Keap1、α-SMA和ROS降低(P<0.05)。与miR-23b-mimic组比较,miR-23b-mimic+清肾颗粒组的miR-23b-5p、Nrf2表达升高,Keap1、α-SMA和ROS降低(P<0.05)。结论清肾颗粒含药血清能通过miR-23b-5p靶向Nrf2通路机制减轻NRK-52E细胞转分化。
- 刘敏金华呼琴陈诺张叶青王亿平
- 关键词：NRK-52E细胞清肾颗粒
- 清肾颗粒对CKD湿热证患者及NRK--52E细胞转分化模型的miR--23b和Nrf2通路的影响
- 目的:通过检测慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)湿热证患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-23b-5p mRNA、Nrf2、HO-1分子,以及血清中氧化应激分子(ROS、AOPP、P...
- 陈诺
- 关键词：清肾颗粒NRK-52E清肾颗粒
- 山药中熊果苷通过ERβ抑制LPS诱导NRK-52e细胞凋亡被引量：1
- 2022年
- 目的探究山药中熊果苷(arbutin,Ar)对LPS诱导NRK-52e细胞凋亡的干预作用及潜在机制。方法建立LPS诱导的NRK-52e细胞损伤模型,将细胞分为正常组、LPS组(1 mg·L^(-1))、低剂量Ar(LPS,1 mg·L^(-1)+Ar,5μmol·L^(-1))和高剂量Ar(LPS,1 mg·L^(-1)+Ar,10μmol·L^(-1))及其对应的抑制剂THC组(1μmol·L^(-1)),检测细胞活力;流式细胞术检测ROS、细胞凋亡水平、Ca2+浓度及线粒体膜电位;In cell western技术检测细胞凋亡关键蛋白表达水平;结果Ar可有效调节LPS诱导的NRK-52e细胞ROS水平、Ca^(2+)浓度、凋亡关键蛋白和ERβ水平,抑制线粒体膜电位下降,但是该作用被雌激素受体β抑制剂THC所阻断,且Ar与ERβ具有较好的结合活性。结论Ar可能通过ERβ抑制LPS诱导NRK-52e细胞凋亡。
- 张贝贝曾梦楠贾菊芳郭彭莉刘萌张钦钦冯卫生郑晓珂
- 关键词：山药NRK-52E细胞细胞凋亡
- 宽缨酮减轻顺铂诱导的NRK-52E细胞损伤的作用研究
- 2022年
- 目的探讨宽缨酮(EN)对顺铂诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E细胞损伤的作用,为宽缨酮防治顺铂所致急性肾损伤提供实验依据。方法体外培养NRK-52E细胞,随机分为对照组(Control)、顺铂组(Cisplatin)、宽缨酮干预组(EN+Cisplatin)。Annexin V-APC/7-ADD双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率;采用ATP检测试剂盒检测细胞ATP含量;采用MitoSOX荧光探针结合流式细胞术检测线粒体活性氧(ROS)改变;实时定量PCR检测细胞促炎因子(TNF-α、IL-6),PGC-1αmRNA的表达水平以及线粒体DNA(mtDNA)拷贝数的变化情况;Western blot检测细胞中促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3和线粒体膜蛋白Tom20的表达水平。结果与对照组相比,顺铂组Cleaved Caspase-3的蛋白表达及细胞凋亡率均升高(P<0.05);TNF-α、IL-6的mRNA表达升高(P<0.05);ATP含量及mtDNA拷贝数降低,线粒体ROS含量增高,PGC-1α的mRNA表达及Tom20的蛋白表达均降低(P<0.05);与顺铂组相比,宽缨酮干预组细胞Cleaved Caspase-3的蛋白表达及细胞凋亡率均降低(P<0.05);TNF-α、IL-6的mRNA表达降低(P<0.05);ATP含量及mtDNA拷贝数增多,线粒体ROS含量降低,PGC-1α的mRNA表达及Tom20的蛋白表达均升高(P<0.05)。结论宽缨酮减轻顺铂诱导的NRK-52E细胞损伤,其机制可能与改善线粒体损伤、抑制细胞凋亡及炎症反应有关。
- 尤达李雯陈奕洋戴俊晴王俊杰李勇刘泽
- 关键词：顺铂NRK-52E细胞线粒体
- 鲜地黄中两个酰胺类化合物通过SIRT3/Bcl-2/Caspase-3信号通路减轻LPS诱导的NRK-52e细胞损伤被引量：2
- 2022年
- 目的:探究鲜地黄中两个酰胺类化合物rehmagluamide(Reh)和rehmanalkaloid C(Reh C)对LPS诱导NRK-52e细胞损伤的干预作用及潜在机制。方法:建立LPS诱导的NRK-52e细胞损伤模型,加入SIRT3选择性抑制剂3-TYP,ELISA法检测细胞上清液中炎症因子TNF-α与IL-6水平;流式细胞术检测细胞凋亡、活性氧(ROS)与线粒体膜电位(JC-1)水平;细胞免疫荧光检测细胞中SIRT3蛋白及线粒体凋亡关键蛋白Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bax、Bcl-2表达。结果:与模型组比较,Reh和Reh C可不同程度降低LPS作用下NRK-52e细胞凋亡及TNF-α、IL-6、ROS水平和Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达,升高线粒体膜电位、SIRT3蛋白表达及Bcl-2/Bax水平,但在加入3-TYP后Reh和Reh C的改善作用显著降低。结论:Reh和Reh C可能通过SIRT3/Bcl-2/Caspase-3信号通路减轻LPS诱导的NRK-52e细胞损伤。
- 刘萌曾梦楠曾梦楠刘晏灵冯卫生郑晓珂
- 关键词：鲜地黄酰胺类化合物NRK-52E
- 骨髓源性间充质干细胞通过抑制Galectin-3/Akt/mTOR信号通路改善TGF-β1诱导的NRK-52E细胞纤维化被引量：1
- 2022年
- 目的:探索无血清骨髓源性间充质干细胞(MSCs)条件培养基,在拮抗TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)纤维化的过程中,是否经galectin-3基因调控自噬而发挥抗纤维化作用.方法:无菌条件下从年轻SD大鼠股骨和胫骨骨髓中提取骨髓MSCs进行原代培养,收集P3代细胞的无血清培养基离心过滤,制备MSCs条件培养上清(SF-MSCs-CM)备用.用含10%FBS的低糖DMEM培养正常的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),并将其分为5组:正常组,TGF-β1组,TGF-β1+SF-MSCs-CM干预组,TGF-β1+SF-DMEM(无血清低糖DMEM)干预组以及SF-MSCs-CM组.用人重组TGF-β1(15ng/mL)处理NRK-52E细胞72h,建立纤维化模型,建模后的干预分别用SF-MSCs-CM和SF-DMEM处理24h,SF-MSCs-CM组仅加SF-MSCs-CM处理24 h.利用慢病毒载体转染NRK-52E细胞,建立galectin-3敲低(Gal-3 KD)和galectin-3过表达(Gal-3 OE)工具细胞,分组及处理同前.采用免疫印迹法和免疫细胞化学法检测纤维化及自噬相关指标.结果:TGF-β1明显上调NRK-52E中α-SMA、FN、galectin-3的表达,以及P-PI3K/PI3K、P-Akt/Akt、P-mTOR/mTOR、LC3B-Ⅱ/Ⅰ的比值,显著下调P62的表达.SF-MSCs-CM显著增加LC3B-Ⅱ/Ⅰ的表达,而降低上述其他指标的表达.无论是Gal-3 KD NRK-52E还是Gal-3 OE NRK-52E,SF-MSCs-CM干预组也表现出类似的趋势,而SF-MSCs-CM对Gal-3 KD NRK-52E的抗纤和增强自噬较Gal-3 OE NRK-52E更为明显.结论:SF-MSCs-CM可能通过抑制galectin-3/Akt/mTOR信号通路增强自噬,从而改善TGF-β1诱导的纤维化.galectin-3可能是一个具有潜在价值的抗纤靶点.
- 赵瑜刘霞李佳凌吕洋坪周正丽高小青陈波
- 关键词：肾小管间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞
- 茵陈对阿霉素诱导的NRK-52e细胞凋亡的保护作用研究被引量：1
- 2022年
- 目的 探究茵陈水提物冻干粉(freeze-dried powder of Artemisia Capillaris Thunb. water extract, WAC)对阿霉素(adriamycin, ADR)诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52e)损伤的保护作用。方法 ADR(1μg·mL^(-1))体外诱导NRK-52e损伤,通过加入不同质量浓度的WAC(1、2、4 mg·mL^(-1))作用后,分别采用形态学观察、细胞增殖毒性检测法(CCK-8法)检测WAC对细胞的保护作用,通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TUNEL)染色法以及蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞凋亡的表达水平。结果 与空白组比较,给予ADR干预后,NRK-52e细胞数目明显减少,间隙明显增大,形态皱缩变形,同时漂浮在培养液中的损伤细胞明显增加,细胞活性明显降低(P<0.01),TUNEL法检测凋亡率明显增加(P<0.01),能诱导相关凋亡蛋白Bcl-2/Bax表达明显降低(P<0.01)、Cleaved Caspase-3/Caspase-3显著提高(P<0.01),并且伴随一定的剂量依赖性。与模型组相比,在加入不同质量浓度的WAC(1、2、4 mg·mL^(-1))后,能减弱ADR(质量浓度为1μg·mL^(-1))诱导的细胞形态改变,细胞活性显著提高(P<0.05,P<0.01),TUNEL法检测凋亡率明显降低(P<0.01),检测凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达明显升高(P<0.01)、Cleaved Caspase-3/Caspase-3表达明显降低(P<0.01),均呈现一定的剂量依赖性。结论 WAC能抑制ADR诱导的肾小管细胞凋亡而发挥保护作用,作用机制可能与线粒体途径有关。
- 黄国顺雍晨王晓芳陈玮姚敏束洋李一卓周恩超
- 关键词：茵陈阿霉素肾小管上皮细胞细胞凋亡
