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不同底质和光周期对青蛤潜沙和摄食行为的影响: 2024年; 在(25±3)℃下,将2龄青蛤(Cyclina sinensis)放在30 cm×30 cm×30 cm的人工调控水温、光照和声音的养殖暗箱中,每箱放8个。开关箱盖上的LED光源模拟有光(12 h)和无光(12 h)条件,箱底铺10 cm厚全泥(含沙量0%组),沙泥比1∶3(25%沙组)、沙泥比1∶1(50%沙组)、沙泥比3∶1(75%沙组)和全沙(100%沙组),每天早晚各投喂小球藻1次,连续投喂3天,用摄像头拍摄记录青蛤在不同底质和光照时长下的潜沙行为和摄食活动,测定其消化酶和代谢酶的活性,研究光照对青蛤摄食和消化代谢的影响。结果发现青蛤的潜沙行为大致分为五个步骤:伸出水管,伸出斧足,竖壳,钻泥,潜沙;黑暗条件下潜沙时间较短。青蛤白天的摄食活动时长明显低于黑暗条件下,摄食活动时间主要集中在19:00—22:00;α-淀粉酶和丙酮酸激酶在自然光照组(12h黑暗∶12 h光照)中酶活达到最高,胃蛋白酶、己糖激酶和乳酸脱氢酶在24 h黑暗条件下酶活最高。实验结果表明,青蛤更喜在黑暗条件下的进行潜沙、摄食及体内消化代谢等活动。; 魏敏宋杰刘玉李德盛秦俊杰刘潘江徐晓怀姚顺管彬单昕马欣然孙雨绮郑伟; 关键词：青蛤摄食酶活昼夜节律

一枝黄花提取物下调cyclinA1/CDK2通路抑制肝癌细胞增殖、迁移与侵袭被引量：3: 2023年; 目的研究一枝黄花总皂苷与总黄酮(SDSF)对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法体外培养HepG2细胞,给予不同浓度(0、10、20、40μg·mL^(-1))SDSF处理24 h后,采用MTT法、克隆形成实验检测细胞的增殖活力;流式细胞术检测细胞周期;划痕实验、transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力;q RT-PCR法、Western blotting法检测细胞周期蛋白(cyclin)A1、周期蛋白依赖性激酶(CDK)2、γ-H2AX、p-p53、基质金属蛋白酶(MMP)-2与MMP-9的水平变化。结果与0μg·mL-1 SDSF组相比,SDSF呈剂量依赖性趋势地抑制HepG2细胞增殖活力,将HepG2细胞周期阻滞于S期,以及显著抑制HepG2细胞的迁移与侵袭能力(P<0.01)。SDSF还可显著降低细胞内cyclinA1、CDK2、MMP-2、MMP-9蛋白表达,增加γ-H2AX、p-p53蛋白表达(P<0.05)。结论 SDSF能显著抑制HepG2细胞的增殖与侵袭转移,其机制可能与下调cyclinA1、CDK2、MMP-2、MMP-9水平,上调γ-H2AX、p-p53水平有关。; 姜银杰罗霜张彦哲焦阳笪明珍周婕; 关键词：一枝黄花肝癌细胞增殖迁移

Identification of suitable reference genes for quantitative gene expression analysis in clam Cyclina sinensis under salinity stress and Vibrio infection: 2023年; The appropriate reference gene is a prerequisite for accurate normalization of gene expression level,and research on suitable reference genes in clam Cyclina sinensis is scarce.To improve the situation,we selected five commonly used housekeeping genes,including β-actin,Elongation factor 1-α(EF1-α),Glyceraldehyde-3-pho sphate dehydrogenase(GAPDH),40S ribosomal protein S18(RPS18),and Tubulin a(TUB-α),then evaluated their expression stability in different adult tissues and under different experimental treatments(salinity stress and Vibrio parahaemolyticus infection).Their expression stability was analyzed by three frequently used programs,geNorm,NormFinder,and BestKeeper.This analysis indicated that multiple genes should be used for normalization,and we concluded that the reference gene combination GAPDH-RPS18-β-actin,should be used for qRT-PCR analysis in different tissues of C.sinensis under normal physiological conditions.For the clams under salinity stress and Vibrio infection,EF1-α-GAPDHRPS18 was recommended as the gene combination for qRT-PCR normalization.TUB-αwas generally poorly ranked by all programs,and should not be used in future studies.This study should provide fundamental support for accurate quantitative gene expression analysis of this species.; Fengjuan JIANGQingyao WANGJingjing DUFu LÜQing NIEWeihong ZHAO

桑沟湾底播养殖青蛤与魁蚶的食物来源: 2023年; 为了解底播养殖经济贝类青蛤(Cyclina sinensis)和魁蚶(Anadara broughtonii)的食物来源,本研究通过稳定同位素技术和高通量测序技术测定了桑沟湾贝类区与贝藻区中底播养殖青蛤和魁蚶的食物组成,分析了食物来源差异性的影响因素。结果显示:(1)青蛤和魁蚶的食物来源主要是浮游植物(占比40.4%~79.6%),其次是浮游动物(13.3%~37.3%)。贝类生物沉积物和海带碎屑对青蛤与魁蚶的食物贡献率存在区域性差异。贝类养殖区生物沉积物和海带碎屑对青蛤的食物贡献率为2.7%(贝类生物沉积物2.0%,海带碎屑0.7%),对魁蚶的食物贡献率为10.3%(贝类生物沉积物7.4%,海带碎屑2.9%);贝藻养殖区青蛤为8.5%(贝类生物沉积物5.1%,海带碎屑3.4%),魁蚶为7.4%(贝类生物沉积物4.3%,海带碎屑2.1%)。(2)青蛤胃含物中的主要成分是绿藻门(占比达56.55%),其次是链形植物门(44.35%),魁蚶胃含物中的主要成分是绿藻门(47.27%),其次是脊索动物门(30.3%)。两种贝类胃含物中的真核生物组成主要是浮游植物,且主要来自于底层海水中,与稳定同位素结果一致。(3)在贝类区和贝藻区,筏式养殖产生的有机物(生物沉积物和海带碎屑)对魁蚶的贡献率高于青蛤;贝藻区海带碎屑对青蛤的贡献率高于魁蚶。从食源结构的角度比较分析,魁蚶和青蛤均可作为桑沟湾综合养殖区域的底播贝类,青蛤更适宜底播在有藻类养殖的区域。; 李兵张继红张继红吴文广刘毅康秦梓陈杜宇宫雪徐豪; 关键词：双壳贝类食物来源高通量测序技术

不同密度三疣梭子蟹混养中国明对虾、青蛤对生长、经济效益及水质的影响: 2023年; 为优化虾蟹贝养殖模式,研究了不同密度三疣梭子蟹(A组15000只/hm^(2),B组22500只/hm^(2),C组30000只/hm^(2))分别混养中国明对虾(60000尾/hm^(2))和青蛤(240000只/hm^(2))对生长性能、经济效益及水质的影响。210 d的饲养结果表明:随着养殖密度的增大,各处理组雄蟹平均体质量分别为238.46,218.50和181.62 g,雌蟹平均体质量分别为247.29,220.18和184.78 g,均随养殖密度的增加而减小,且存在显著差异(P<0.05);各处理组三疣梭子蟹成活率和产量均随养殖密度增大而减小;各处理组中国明对虾和青蛤养成规格、成活率、产量之间无显著差异(P>0.05)。经济效益方面,B组净利润((144.93±3.43)×10^(3)元/hm^(2))显著大于A组((106.68±7.27)×10^(3)元/hm^(2))和C处理组((80.81±21.58)×10^(3)元/hm^(2))(P<0.05)。B组回报率最高((97.00±3.09)%),显著高于A组((74.71±5.02)%),A组显著高于C组((51.78±13.89)%)(P<0.05)。各处理组氨氮、亚硝酸盐氮、pH和溶解氧含量均无显著差异,符合正常养殖水平。综合考虑养殖经济效益和三疣梭子蟹生长性能,三疣梭子蟹-中国明对虾-青蛤混养池塘中三疣梭子蟹放养密度以22500只/hm^(2)为最佳。; 葛红星葛红星申欣李健李健; 关键词：三疣梭子蟹混养水质

青蛤贝壳与内部组织间连接观察: 2022年; 青蛤作为我国沿海地区的重要经济型贝类,具有广阔的养殖和消费市场。对青蛤个体进行解剖及形态观察,探究双壳贝类贝壳形态及贝壳与组织之间的作用方式。结果显示,在外部形态观察中,发现青蛤具有圆形且左右对称贝壳一对,通过铰合部及韧带连接,内有数目不等排列不一的异齿型绞合齿;在内部结构观察中,解剖软体部发现,内包含有外套膜、足及内脏团,其中外套膜在青蛤组织连接中起到承上启下的作用,并分化出闭壳肌;鳃与外套膜及内脏团直接连接在一起;内脏团顶部为斧足,受足收缩肌控制完成运动;外套膜和闭壳肌通过生物粘附机制完成了与贝壳的有机相—无机相连接,并在贝壳内面留有外套线、外套湾和闭壳肌痕等机体痕迹,达到在壳内固定软体部目的。通过详细探究青蛤的形态、组织间连接方式、组织与贝壳间的连接方式,认为外套膜在青蛤组织生长过程中起到了至关重要的作用。该研究可为双壳贝类形态及解剖学提供并补充可靠资料。; 王亦我仉佳文刘玉魏敏张明月吴雨晨仇攀宋杰郑伟董志国; 关键词：贝壳

浒苔发酵工艺优化及青蛤喂养效果评价被引量：1: 2022年; 本试验以自然海区打捞上岸的浒苔(Enteromorpha prolifera)为原料,以植物乳酸杆菌为发酵菌种,发酵浒苔喂养青蛤(Cyclina sinensis)的特定生长率为响应值,确定浒苔发酵的最佳工艺。在单因素试验的基础上,以发酵时间、发酵温度、料液比为响应因素,以青蛤特定生长率为响应值,利用Box-Behnken中心组合方法进行三因素三水平试验设计,进行响应面分析。结果表明:影响浒苔发酵工艺的因素主次顺序为发酵温度、料液比和发酵时间,最佳发酵工艺条件为:发酵温度35℃,料液比(1∶1.5) g·m L^(-1),发酵时间84 h。通过测定发酵前后浒苔的常规营养成分,发现浒苔发酵产物的粗蛋白含量显著高于未发酵浒苔(P<0.05);使用工艺优化后的浒苔发酵产物所喂养的青蛤与投喂小球藻的青蛤在特定生长率与存活率方面无显著差异。本试验证明优化后的浒苔发酵工艺具有可靠性,其发酵产物具备成为青蛤养殖饲料的条件,为浒苔发酵饲料的开发利用提供理论依据的同时,也为贝类配合饲料的开发及应用提供极大参考价值。; 夏青孙泽鹏柳梅梅廖晓婷董志国; 关键词：浒苔青蛤发酵工艺响应面法

肝细胞肝癌中CyclinA1的表达及意义: 2022年; 目的探讨细胞周期蛋白A1(CyclinA1)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及意义。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot方法,分别检测新鲜HCC及相应癌旁非瘤组织中CyclinA1 mRNA和蛋白的表达水平;应用组织芯片及免疫组织化学方法,检测HCC及相应癌旁非瘤石蜡包埋组织中CyclinA1蛋白的表达情况。结果新鲜HCC组织中CyclinA1 mRNA和蛋白质的表达均明显高于相应癌旁非瘤组织(t=4.739、12.690,P<0.01);HCC石蜡包埋组织中CyclinA1的表达高于癌旁非瘤组织(z=-16.019,P<0.001)。CyclinA1的表达水平与HCC分化程度、TNM分期、肿瘤是否多发、脉管侵犯、被膜侵犯和肿瘤大小有关(χ^(2)=4.559~15.551,P<0.05)。生存分析表明,CyclinA1低表达HCC病人的术后总体和无病生存时间较高表达者更长(χ^(2)=15.060、12.930,P<0.05)。Cox多因素回归分析表明,CyclinA1、分化程度、肿瘤是否多发、肿瘤大小是影响HCC病人术后总体及无病生存时间的独立预后因素(β=-1.379~1.453,HR(95%CI)=0.252(0.145~0.436)~4.274(2.188~8.350),P<0.05)。结论 CyclinA1可能促进HCC发生,并且促进肿瘤的生长及侵袭转移;CyclinA1高表达提示病人预后不良,可作为判断HCC病人预后的潜在分子标志物及潜在治疗靶点。; 马晏然杨茜李宏宋京芝周璇项锋钢; 关键词：肝肿瘤肿瘤转移预后

青蛤Ⅰ型溶菌酶在毕赤酵母中的重组DNA表达被引量：1: 2022年; Ⅰ型溶菌酶是无脊椎动物免疫系统中一种富含半胱氨酸的重要蛋白质免疫因子,具有良好的抗病原微生物功能。通过反转录PCR自青蛤闭壳肌中克隆到Ⅰ型溶菌酶(CslyⅠ)基因,以pPⅠCZαA为表达载体、毕赤酵母X-33为工程菌,构建重组毕赤酵母菌株X-33/pPⅠCZαA-CslyⅠ,经高质量浓度博莱霉素培养基筛选获得高拷贝重组菌株。该菌株在28℃、250r/min条件下,经1%甲醇诱导表达72h后获得蛋白质类表达产物。Western blot和MALDⅠ-TOF/TOF质谱分析表明,该表达产物为预期的重组青蛤Ⅰ型溶菌酶;进一步的抑菌试验证明,该重组青蛤Ⅰ型溶菌酶具有抗金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和副溶血性弧菌的活性,并且显示良好的热稳定性。本研究可为无脊椎动物来源Ⅰ型溶菌酶的制备提供基于重组毕赤酵母的生物合成技术。; 冯付霭赵震陶妍谢晶谢晶; 关键词：青蛤蛋白质表达抑菌活性

温度、盐度、流速和小球藻对青蛤吐沙净化的影响被引量：1: 2022年; 从自然海区中采捕的青蛤含沙率极高,通常需要经过吐沙净化才能食用。在实验室条件下,以定量化口感测试为评价方法,研究温度、盐度、流速和投喂对青蛤吐沙净化效果的影响。温度设14、18、22、26、30℃共5个梯度;盐度设15、20、25、30共4个梯度;流速设10、20、40、80、160、320 L/h共6个梯度;设投喂和不投喂2个处理;试验开始后的第4、8、12、16 h进行取样。试验结果显示,青蛤在前4 h吐沙净化效率最高,在温度22℃、盐度30、流速40 L/h和不投喂条件下,吐沙4 h后口感测试得分便可达到9分以上。在低温和低盐条件下,青蛤吐沙净化需要更长的时间,提高流速有助于获得更好的净化效果;投喂小球藻组和不投喂小球藻组的吐沙净化效果差异不显著(P>0.05),但从净化成本和饵料对青蛤食用口感影响的不确定性两方面考虑,青蛤吐沙净化时建议不投喂。; 陈文超刘金虎杜以帅孙建明邱天龙; 关键词：青蛤温度盐度流速投喂

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