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斜带石斑鱼BAG-1{1}克隆及表达分析: 2022年; 【目的】明确斜带石斑鱼(Epinephelu coioides)BAG-1{1}(EcBAG-1)的结构特征、组织表达分布及在脂多糖(LPS)和聚肌胞苷酸(PolyI:C)刺激后的表达变化,进一步揭示鱼类BAG-1在病原感染中的作用机制,也为了解鱼类的抗病免疫提供参考依据。【方法】依据EcBAG-1{1}EST序列设计特异性引物克隆EcBAG-1{1},通过SMART、TMHMM Server v.2.0、SOPMA、SWISS-MODEL、ExPASy、ClustalX及MEGA 5.0等在线软件进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR检测EcBAG-1{1}的组织表达特征及其在LPS和PolyI:C刺激后的表达模式。【结果】克隆获得的EcBAG-1{1}开放阅读框(ORF)长624 bp,共编码207个氨基酸残基;EcBAG-1蛋白分子量为49.84 kD,理论等电点(pI)为5.18,为疏水性蛋白。EcBAG-1蛋白具有BAG-1家族保守的BAG结构域和UBQ泛素相关结构域,无跨膜结构域,主要分布在细胞质和细胞核,其二级结构中α-螺旋占65.22%、延伸链占10.63%、无规则卷曲占20.29%、β-转角仅占3.86%。EcBAG-1氨基酸序列与大黄鱼的BAG-1氨基酸序列相似性最高(96.62%),亲缘关系最近;与原鸡和热带爪蛙的亲缘关系相对较远,对应的BAG-1氨基酸序列相似性分别为58.45%和57.50%。EcBAG-1{1}在斜带石斑鱼的肝脏、胸腺、脾脏、头肾、鳃、皮肤、肌肉、大脑、外周血淋巴细胞及心脏等组织中均有表达,且以在大脑中的相对表达量最高,显著高于在其他组织中的相对表达量(P>0.05,下同);经LPS和PolyI:C刺激24 h后,斜带石斑鱼脾脏中的EcBAG-1{1}相对表达量显著上调。【结论】EcBAG-1蛋白含有BAG-1蛋白家族典型的BAG结构域和UBQ结构域,具有与哺乳动物BAG-1相似的生物学功能,即EcBAG-1{1}在斜带石斑鱼抵御细菌/病毒感染的过程中发挥重要作用,为深入了解鱼类的抗感染机理拓宽了思路。; 李星吴子杰温依铭刘结红蔡佳简纪常; 关键词：斜带石斑鱼 BAG-1基因病原感染免疫反应

BAG-1{1}在Luminal型乳腺癌中的表达及其对他莫昔芬敏感性的影响: 2019年; 目的探讨Bcl-2结合抗凋亡基因({1}-1)与Luminal型乳腺癌细胞株MCF-7对他莫昔芬(TMA)敏感性的关系以及可能的作用机制。方法 (1)采用免疫组织化学法检测Luminal型乳腺癌组织和癌旁组织中{1}-1的表达;(2)采用药物浓度梯度间歇诱导法体外建立MCF-7耐药细胞,采用MTT法测定TMA对MCF-7和MCF-7/TMAR细胞增殖活性的影响;(3)采用RNA干扰技术靶向沉默MCF-7/TAMR细胞{1}-1的表达;(4)采用RT-PCR法和Western blot法检测MCF-7细胞和MCF-7/TAMR细胞{1}-1、ER、p-AKT和p-ERK1/2 mRNA和蛋白的表达水平。结果 (1)乳腺癌组织中{1}-1的高表达率明显高于癌旁组织(P<0. 05);(2)MCF-7/TAMR细胞中{1}-1、p-AKT和p-ERK1/2相对表达量明显高于MCF-7细胞(P<0. 05);两组细胞ER表达情况差异无统计学意义(P>0. 05); TMA对MCF-7/TAMR细胞增殖活性的抑制作用明显低于MCF-7细胞(P<0. 05);(3)经siRNA {1}-1转染后,MCF-7/TAMR细胞增殖活性明显低于阴性对照组细胞(P<0. 05); p-AKT和p-ERKmRNA和蛋白表达水平下调,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0. 05)。结论下调{1}-1可降低AKT和ERK磷酸化水平,从而提高Luminal型乳腺癌细胞对他莫昔芬的敏感性。; 陈巍田燕妮张毓; 关键词：他莫昔芬敏感性

RNA干扰抑制BAG-1{1}表达对皮肤鳞状细胞癌增殖及凋亡的影响研究被引量：7: 2018年; 目的:探讨抑制BAG-1(Bcl-2-associated athanogene-1){1}表达对皮肤鳞状细胞癌增殖及凋亡的影响。方法:采用LipofectamineTM2000将BAG-1的siRNA转染皮肤鳞状细胞癌A431,转染后48 h,RT-PCR检测BAG-1的mRNA表达,Western blot检测BAG-1的蛋白表达;CCK8和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况;Western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)家族促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)及Wnt/β-catenin信号通路β-连环蛋白(β-catenin)、Survivin的蛋白表达;ELISA试剂盒检测白介素6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果:与空白组和阴性对照组比较,转染BAG-1的siRNA可明显抑制BAG-1在转录和翻译水平上的表达;与空白组比较,BAG-1-siRNA组细胞增殖显著降低,细胞凋亡率显著增加,Bax蛋白表达上调,β-catenin、Survivin蛋白表达下调,IL-6、VEGF含量均显著降低(P<0.05)。结论:BAG-1表达沉默可降低皮肤鳞状细胞癌增殖,促进细胞凋亡,上调Bax及下调Wnt/β-catenin信号通路表达,降低IL-6、VEGF因子的分泌。; 邢枫陶思羽张黎; 关键词：BAG-1基因皮肤鳞状细胞癌凋亡信号通路

BAG-1{1}与乳腺癌TAM治疗敏感性的相关性研究被引量：2: 2017年; 目的研究BAG-1{1}与乳腺癌他莫昔芬(TAM)治疗敏感性的相关性。方法以58例乳腺癌患者为观察组,50例乳腺良性肿瘤患者为对照组。予以观察组患者TAM治疗,检测并统计2组患者肿瘤组织BAG-1{1}的阳性率;并根据检测结果将观察组患者分为BAG-1阳性组与阴性组,对比分析观察组BAG-1阳性者与阴性者的临床预后及血清肿瘤标志物水平,包括癌胚抗原(CEA)、糖类抗原153(CA153)。结果观察组BAG-1{1}阳性率为74.14%,对照组为12%,2组比较,P<0.05。观察组BAG-1阳性组患者临床缓解率为46.51%,阴性组为66.67%,2组比较,P<0.05;BAG-1阳性组患者临床控制率为67.44%,阴性组为86.67%,2组比较,P<0.05。观察组BAG-1阳性组患者平均OS为(1.55±0.86)a,PFS为(1.02±0.31)a,阴性组依次为(2.76±0.95)a、(2.06±0.82)a,2组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组BAG-1阴性组患者血清CEA、CA153指标值均低于对照组(P<0.05)。结论 BAG-1{1}与乳腺癌TAM治疗敏感性密切相关,BAG-1阳性者行TAM治疗的临床效果及预后均较阴性者差。; 金科朱剑梅邱发麒; 关键词：TAM 敏感性

BAG-1{1}的小干扰RNA转染对肝癌细胞生物学特性的影响被引量：1: 2017年; 目的观察RNA干扰BAG-1{1}表达对肝癌细胞增殖凋亡及Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响。方法以人正常肝癌细胞L02作为对照细胞，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot分别检测BAG-1在无转移能力的HepG2、Huh7人肝癌细胞株及转染潜能依次增高的MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3人肝癌细胞株中的表达；将阴性小干扰RNA（siRNA）和BAG-1-siRNA转染HCCLM3细胞，不转染的细胞为空白对照组，转染48 h后检测转染效果；分别于转染后的24、48、72 h通过细胞计数试剂盒（CCK-8）实验检测细胞的增殖；流式细胞仪检测转染48 h细胞的凋亡；Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路β-catenin、生存素（Survivin）、c-Myc的蛋白表达。结果BAG-1在肝癌细胞中的表达均显著高于对照细胞L02（mRNA表达：PHepG2＝0.000；PHuh7＝0.000；PMHCC97L＝0.000；PMHCC97H＝0.000；PHCCLM3＝0.000；蛋白表达：PHepG2＝0.030；PHuh7＝0.001；PMHCC97L＝0.000；PMHCC97H＝0.000；PHCCLM3＝0.000）；BAG-1-siRNA转染HCCLM3细胞后BAG-1的蛋白表达（0.097±0.010）显著低于空白对照组（0.489±0.039）（P＝0.000）；BAG-1-siRNA转染HCCLM3细胞48 h（0.312±0.024）和72 h（0.398±0.036）后细胞的增殖显著低于空白对照组（0.448±0.032）、（0.673±0.051）（P48 h＝0.004；P72 h＝0.002）；与空白对照组（2.13±0.11）%、（0.512±0.048）、（0.349±0.032）、（0.166±0.015）比较，BAG-1-siRNA组细胞凋亡率[（13.47±1.05）%]显著升高，β-catenin（0.247±0.028）、Survivin（0.153±0.017）、c-Myc（0.089±0.009）蛋白显著下调表达（Pβ-catenin＝0.001；PSurvivin＝0.001；Pc-Myc＝0.002）。结论抑制BAG-1表达可通过下调Wnt/β-catenin信号通路降低肝癌细胞增殖，促进细胞凋亡。; 高志强汪俊峰陈德华马雪松唐哲; 关键词：BAG-1基因肝癌脱噬作用

BAG-1{1}与乳腺癌细胞TAM敏感性及相关信号通路的研究: 目的:　　在ER阳性乳腺癌细胞中，研究BAG-1对4-羟基-他莫昔芬治疗敏感性的影响，并探讨BAG-1基因和AKT, p-AKT, m-TOR, p-mTOR的关系;研究BAG-1不同表达水平的 ER阳性乳腺癌细胞对 m...; 崔芳; 关键词：乳腺癌 BAG-1基因信号通路

ERCC2和BAG-1{1}多态性与NSCLC铂类化疗疗效的关系被引量：2: 2016年; 目的本研究主要探讨ERCC2和BAG-1{1}的多态性与非小细胞肺癌的发病风险、化疗敏感性的相关性。方法采用PCR-RFLP方法对105例非小细胞肺癌患者新鲜血标本中ERCC2/XPDLys751Gln和BAG-1codon 324多态性进行检测,采用SAS软件统计(v.9.1.3e),使用logistic回归分析各{1}型与肺癌发病风险和化疗敏感性的相关性。使用比值比(OR)及95%可信区间(CI)表示各{1}型与肺癌发病的风险。所有的统计检验均为双侧检验。结果调整了年龄、性别和吸烟后,ERCC2/XPDLys751Gln与肺癌的发病风险无关。携带BAG-1codon 324C/T+T/T{1}型者与携带C/C{1}型者相比,发病风险降低。携带ERCC2/XPDLys751Gln C/A{1}型和A/A{1}型者与C/C{1}型者相比,与化疗敏感性有关;BAG-1codon 324C/T型与C/C型{1}型相比,与化疗敏感性有关。结论ERCC2/XPD、BAG-1{1}多态性与非小细胞肺癌发病风险相关,ERCC2/XPD C/A{1}型与化疗敏感性具有相关性;BAG-1codon324C/T{1}型患者比C/C{1}型患者化疗敏感。; 陈赛华张一心刘继斌施民新李桃陆俊国; 关键词：BAG-1 基因多态性化疗敏感性

非小细胞肺癌RAD51、ERCC2和BAG-1{1}多态性的表达被引量：4: 2015年; 目的:研究DNA修复基因RAD51和着色性干皮病基因(ERCC2/XPD)以及Bcl-2结合抗凋亡基因1(Bcl-2 associated athanogene 1,BAG-1)基因多态性与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)遗传易感性的关系。方法:采用病例对照研究设计,选取100例非小细胞肺癌病例和80例正常对照。以ERCC2/XPD Lys751Gln和RAD51 codon 135以及BAG-1codon 324基因多态性为研究位点,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对多态性进行检测。应用Logistic回归计算OR值及95%CI,比较不同基因型与NSCLC发病风险的关系。结果:ERCC2/XPD 751基因型在病例组的分布频率为C/C型69例(69%)、C/A型26例(30%)和A/A型5例(5%)。与野生基因型C/C型相比,携带ERCC2/XPD C/A基因型和A/A基因型者患NSCLC的危险度比值比(odds ratio,OR)分别是1.53(95%CI:1.15-3.32)和0.58(95%CI:0.15-2.39)。BAG-1 codon 324基因型的分布频率为C/C型81%(81/100)、C/T型19%(19/100)以及T/T型0%(0例)。与野生基因型C/C型相比,携带BAG-1 C/T基因型者患NSCLC的OR是1.28(95%CI:1.08-2.74)。RAD51 codon 135基因型的分布频率为G/G型67%(67/100)、G/C型33%(33/100)、未现C/C型。与野生基因型G/G型相比,RAD51 G/C基因型者患NSCLC的OR是1.03(95%CI:1.06-2.29)。分析结果提示吸烟、环境危险因素与XPD Lys751Gln基因多态存在交互作用,交互效应OR值分别为2.24(95%CI:1.18-2.87)和2.53(95%CI:1.71-3.46),携带XPD Ly s751Gln突变基因者若同时暴露于吸烟、环境危险因素下,则患NSCLC的危险显著增加,相较未暴露于上述因素者,OR值均增大。结论:BAG-1和ERCC2/XPD以及RAD51基因多态性可能与当地居民NSCLC遗传易感性有关,ERCC2/XPD与吸烟、饮酒、环境危险因素存在交互作用。; 陆俊国李桃张晓东孟云刘继斌; 关键词：非小细胞肺癌 RAD51 BAG-1 基因多态性

ERCC2、RAD51和BAG-1{1}多态性与晚期非小细胞肺癌铂类化疗敏感性的研究被引量：4: 2015年; 目的:研究着色性干皮病基因(ERCC2/XPD)、DNA修复基因RAD51 codon 135以及Bcl-2结合抗凋亡基因1(Bcl-2 associated athanogene 1,BAG-1)codon 324多态性与晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)以铂类药物为基础的化疗敏感性的关联。方法:选取100例晚期NSCLC患者,使用PCR-RFLP方法检测ERCC2/XPD Lys 751 Gln、RAD51 codon 135以及BAG-1 codon 324基因多态性,应用非条件Logistic回归计算OR值及95%CI,分析不同基因型与化疗敏感性的关系。结果:100例晚期NSCLC患者中,ERCC2/XPD 751基因Lys/Lys、Lys/Gln、Gln/Gln基因型的分布频率分别为69例(69%)、26例(26%)和5例(5%);RAD51 codon 135的基因型频率分布为G/G型占67%(67/100)、G/C型33%(33/100)、未发现C/C型;BAG-1 codon 324基因型频率分布C/C型占81%(81/100)、C/T型占19%(19/100),未发现T/T型。100例NSCLC患者化疗后,其中完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)和进展(PD)患者分别为0、31、41和28例。ERCC2/XPD C/A基因型多态性与化疗敏感性具有相关性(OR=3.53,95%CI=1.58-11.46,P<0.01);BAG-1 codon 324 C/C型患者与C/T型患者的化疗有效率差异有统计学意义(P=0.036),携带C/C基因型患者比C/T基因型患者化疗敏感(OR=2.67,95%CI=1.16-8.23,P<0.05);RAD51 codon 135G/C基因型患者是G/G基因型患者化疗敏感性的2.12倍(OR=2.12,95%CI=1.08-7.41,P<0.05)。结论:ERCC2/XPD、BAG-1 codon 324以及RAD 51 codon 135基因多态性可能与晚期NSCLC铂类药物化疗敏感性有关。; 陆俊国李桃徐燕飞丁华刘继斌; 关键词：BAG-1 RAD51 基因多态性化疗敏感性

乳腺癌中过表达BAG-1{1}与ER表达相关性的研究: 目的：　　雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)和人类表皮生长因子受体-2（Human epidermal growth factor re...; 马园园; 关键词：乳腺癌 BAG-1基因雌激素受体靶向治疗; 文献传递

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