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- 继代培养对链格孢菌生长及产毒的影响
- 2024年
- 目的探究连续继代培养对链格孢菌(Alternaria alternata)菌株的生长以及产毒的影响。方法将10株链格孢菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(potato dextrose agar,PDA)上连续继代培养,分析菌株的生长、产孢情况;利用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测并分析主要链格孢霉毒素[包括交链孢酚(alternariol,AOH)、交链孢酚单甲醚(alternariol monomethyl ether,AME)、交链孢烯(altenuene,ALT)、细交链格孢菌酮酸(tenuazonic acid,TeA)]的含量变化。结果在PDA培养基中,连续继代培养链格孢菌极易出现角变、菌丝变白、菌丝生长速率加快等菌株退化现象。随着继代培养次数的增加,菌株生长速度加快,菌落直径变大,角变率增大;10株链格孢菌中有7株(MY-4、MY-12、MY-15、MY-73、MY-80、MY-103、MY-117)产孢量随着继代次数的增加先增加后降低,3株(MY-65、MY-67和MY-108)产孢量随着继代次数的增加显著降低;10株链格孢菌中有4株可以产生TeA毒素,且Te A毒素的含量随着继代次数的增加先上升后下降,第五代菌株(F5)产毒能力最强。继代培养对ALT毒素含量影响较大,除MY-103以外,随着继代次数的增加,ALT毒素的含量显著降低(达91.13%~99.85%)。AOH和AME毒素含量随着继代次数的增加呈下降或者呈先上升后下降的趋势。结论连续继代培养5代对链格孢菌的生长、产孢、产毒等均会产生较大影响。在菌株的实际应用过程中,应该避免菌株过多次的继代培养,尽量使用5代以内的链格孢菌。
- 陈新悦孟佳佳郭文博范楷聂冬霞赵志辉伍晓斌韩铮
- 关键词：链格孢菌继代培养产孢
- 响应面法研究链格孢菌Alternaria ochroleuca的产毒条件
- 2024年
- 比较了不同链格孢菌(Alternaria ochroleuca、Alternaria alternata和Alternaria tenuissima)的产毒能力,并通过单因素实验和响应面试验考察了不同的培养温度、培养时间和培养基初始pH对A.ochroleuca产主要链格孢霉毒素链格孢酚(AOH)、链格孢甲基醚(AME)和细交链格孢菌酮酸(TeA)3种毒素的影响。结果表明:3种毒素的产量均随培养温度、培养时间和培养基初始pH的增加呈先增加后逐渐减少的趋势,培养温度26.8℃、培养时间11.4 d、培养基初始pH 4.7是TeA的最佳产生条件,最大产量为4841.3 mg∕kg;当培养温度为25.9℃、培养时间为7.8 d、培养基初始pH为6.4时,AOH和AME的产量最高,分别达2096.1 mg∕kg和152.8 mg∕kg。培养温度和培养基初始pH对TeA的产生具有显著的交互作用,而培养温度和培养时间对AOH和AME的产生具有显著的交互作用。本研究明确了链格孢菌A.ochroleuca产生链格孢霉毒素的主要影响因素,对控制链格孢霉毒素污染、保障食品安全具有重要意义。
- 曹浩杰孟佳佳黄晴雯王杰赵秀英范楷聂冬霞韩铮
- 关键词：响应面法链格孢菌
- 甘肃省陇南市核桃枝枯病菌Alternaria alternate的生物学特性
- 2024年
- 以核桃枝枯病菌(Alternaria alternate)为对象,研究温度、碳源、氮源、光照、培养基和pH等对菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响。结果表明,pH 7和全黑暗有利于核桃枝枯病菌的菌丝生长、产孢和孢子萌发;25℃有利于菌丝生长,25~30℃有利于产孢,20~30℃有利于孢子萌发;最适生长的碳源为可溶性淀粉,氮源为酵母浸粉、KNO_(3)和蛋白胨,最适产孢的碳源和氮源分别为山梨醇和KNO_(3),最适孢子萌发的碳源和氮源分别为乳糖和NH_(4)NO_(3);PSA、OA和PDA培养基适合菌丝生长,LB培养基适合产孢,OA培养基适合孢子萌发。该研究结果为明确核桃枝枯病的发生规律提供理论依据,也为综合防治措施的制定提供参考。
- 邓小芸高孟春杨成德
- 关键词：生物学特性
- 芍药响应细极链格孢侵染的转录组分析
- 2024年
- 【目的】芍药在生长发育过程中容易遭受病原菌侵染,感染病害,由细极链格孢(Alternariatenuissima)引起的红斑病是其主要叶部病害,严重影响品质和产量,目前对芍药红斑病的抗病机理尚未清晰。本研究运用生理学和转录组学手段,探究芍药响应细极链格孢侵染的生理变化及分子途径。【方法】以芍药‘大富贵’为试验材料,取A.tenuissima接种后12、24和96 h的芍药叶片,测定其相关生理指标并进行转录组测序分析,以未接种叶片为对照。【结果】病原菌接种后,芍药叶片的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性增强,可溶性糖与可溶性蛋白以及丙二醛(MDA)含量升高,脯氨酸含量降低。在A.tenuissima侵染芍药12、24和96 h后,芍药分别有5045、5961和2748个差异表达基因上调,有4284、5665和3536个差异表达基因下调。GO富集分析发现差异基因主要富集到部分生物合成和代谢过程、光合作用、信号转导和节律相关条目中。KEGG富集分析显示差异基因主要富集到碳代谢、氨基酸的生物合成、植物-病原菌互作、植物激素信号转导、MAPK信号等通路中。3条抗病通路(植物-病原菌互作、MAPK信号和植物激素信号转导)中共同富集到53个差异基因,这些差异基因中包括1个MPK6、2个PR1、4个MKK4/5和46个BAK1。随机选取9个芍药响应细极链格孢侵染的差异表达基因进行qRT-PCR分析,基因表达规律与转录组测序结果一致,证实RNA-seq的准确性。AP2/ERF-ERF、WRKY、bHLH和MYB-related转录因子家族是芍药响应A.tenuissima侵染的关键转录因子家族。【结论】A.tenuissima侵染芍药后,芍药通过提高SOD、POD、CAT和PAL的活性提升抗氧化能力,清除病害胁迫所产生的大量活性氧,通过增加可溶性糖与可溶性蛋白的含量、降低脯氨酸的含量进行渗透调节保持细胞水分。BAK1、PR1、MKK4/5和MPK6在芍�
- 蔚书涵秦小杰吴其超李玲臧德奎马燕
- 关键词：芍药转录组学生理指标
- 链格孢菌侵染泡桐单板的研究
- 2024年
- 以蛋白胨为氮源和可溶性淀粉为碳源的2种培养基为营养基础,对比链格孢菌在泡桐单板表面的顺纹侵染长度差异,利用扫描电子显微镜(SEM)、色差仪与傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)等技术手段,研究其侵染路径、表面色差、耐光色牢度、顺纹侵染趋势和木材化学组分变化。结果表明:1)相比于氮源培养基(17.25 mm),碳源培养基的18 d顺纹侵染长度(44.31 mm)更长。2)菌丝主要从导管进入木材,在孔径大的早材部位染色效果更显著。3)侵染18 d后,碳源培养基条件下泡桐单板表面颜色变化更明显(总色差值ΔE^(*)为32.20),在氮/碳源培养基条件下光照4 h的色差值由55.55分别降低至1.49和1.36,耐光色牢度明显提升。4)线性拟合结果显示,顺纹侵染长度与侵染时间正相关,在碳源培养基内平均侵染速率(2.28314 mm/d)快于氮源培养基((0.83837 mm/d))。5)侵染会影响纤维素、半纤维素,木质素波动较小。
- 张涵高云霄唐睿琳于志明
- 关键词：链格孢菌泡桐单板侵染培养基
- 链格孢毒素危害及防控措施的研究进展
- 2024年
- 链格孢毒素主要是由链格孢霉(Alternaria)产生的次生代谢产物,在世界各地的食品中广泛存在,对人类健康构成严重威胁。因此,解析其毒性和发现危害防控措施已成为目前的研究重点。本文主要概述了食品中常见4种链格孢毒素的毒性、暴露风险、污染控制和毒性干预方法等,旨在为链格孢毒素的风险评估、安全限量标准和防控措施的制定提供参考,对保障食品安全和人类健康具有重要意义。
- 于松朱怡平邹连蓬汪国权熊丽蓓
- 关键词：毒性霉菌毒素食品污染物
- 江西省烟草赤星病菌RAPD遗传多样性分析
- 2024年
- 【目的】为明确江西省烟草赤星病菌Alternaria alternat的遗传多样性,开展了相关研究。【方法】运用RAPD分子标记法对江西省6个主要烟区赤星病分离出的37个菌株进行了遗传多样性、遗传结构与分化及种间遗传变异分析。【结果】其中6个不同地理种群的Nei’s基因多样性指数(He)为0.1618~0.3209,Shannon信息指数(I)为0.2419~0.4785,表明不同地理来源种群之间的链格孢菌具有丰富的遗传多样性;遗传距离分析表明,兴国和信丰的菌株遗传距离最小,亲缘关系较近,石城和黎川的菌株遗传距离最大,亲缘关系较远;居群每代迁移数(Nm)为1.8171,表明不同地理来源的种群间存在一定程度的基因流动;利用NTSYS软件按UPGMA法聚类分析,当相似系数划定为0.56时,可将37个菌株划分为10个类群,37个菌株基本上以地理来源聚类到不同分支,表明菌株间的遗传多样性受其地理来源影响明显。【结论】利用RAPD分子标记法明确了江西省主要烟区烟草赤星病菌Alternaria alternat的遗传多样性,为江西省烟区选育抗赤星病品种及其综合防治提供措施奠定理论基础。
- 张文梅蔡梁李松宴胡长志崔汝强
- 关键词：烟草赤星病菌RAPD
- 柑橘感染褐斑病过程中BAG1的作用
- 2024年
- 本研究旨在探究柑橘BAG1参与褐斑病菌(Alternaria alternata)侵染的调控机制。从‘秤砣红橘’(Citrus tangerina Hort.ex Tanaka)、‘宫本温州蜜柑’(C.unshiu Macf)、‘爱媛38’杂柑(C.reticulata Blanco)和‘金秋砂糖橘’(C.reticulata Blanco)叶片中扩增BAG1基因。BAG1蛋白相对保守,均具有Ubiquitin泛素结构域和BAG结构域,‘爱媛38’的BAG结构域存在3个新的氨基酸变动,导致侧链基团变动。上游启动子序列显示4个柑橘品种均包含相同的激素和胁迫相关顺式作用元件。系统分析显示4个柑橘品种与宽皮柑橘类BAG1蛋白聚为一支,相似度最高,与甜橙类、柚类亲缘关系较远。qRT-PCR显示在褐斑病菌THJ菌株侵染的抗、感品种上BAG1的表达差异显著。BAG1受外源Me JA、ABA和SA诱导上调表达。烟草亚细胞定位显示BAG1存在于细胞核和细胞膜中。BAG1沉默能够增强对A.alternata的抗性,过表达对A.alternata的抗性降低。表明BAG1通过参与活性氧激发和ABA、JA或SA信号途径,参与柑橘对褐斑病菌的调控。
- 周慧珍张嘉胡军华李白雪曹立余歆王福生邹修平周彦
- 关键词：柑橘褐斑病菌活性氧
- QuEChERS-HPLC-MS/MS法测定中药中4种交链孢霉毒素
- 2024年
- 样品用1%甲酸-乙腈溶液提取,经N-丙基乙二胺(PSA)净化,采用BEH-C_(18)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,采用电喷雾离子源负离子模式扫描,多反应模式(MRM)监测目标物,内标法定量。4种交链孢霉毒素在0.200~200 ng/mL的范围内呈现良好的线性关系(R^(2)≥0.999),并以西洋参为例做方法学验证。该方法还可应用在铁皮石斛、薏仁、陈皮、莲子和橄榄这五种基质中。该方法操作简单快捷,可用于中药中4种交链孢霉毒素的检测。
- 吴丽倩
- 关键词：QUECHERS中药
- 生防芽孢杆菌与杀菌剂复配对苹果斑点落叶病菌的联合毒力
- 2024年
- [目的]为苹果斑点落叶病的防控提供新的杀菌剂及其增效组合。[方法]采用对峙培养法筛选生防菌,菌丝生长速率法筛选化学杀菌剂,Horsfall法确定菌药复配比例。[结果](1)7种化学杀菌剂均对病菌有较强的抑制活性,其中戊唑醇、苯醚甲环唑和丙环唑3种药剂对病菌抑制效果最佳,EC50分别达0.21、0.30和0.81μg/mL;其次为吡唑醚菌酯、代森锰锌和嘧菌酯;多菌灵的抑菌效果最差,EC50为15.03μg/mL。(2)3种芽孢杆菌中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SJ1606的抑菌效果最好,其发酵上清液和发酵上清粗提物对病菌的EC50分别为2.38μL/mL和0.53μL/mL。(3)解淀粉芽孢杆菌SJ1606发酵上清液粗提物和代森锰锌、吡唑醚菌酯的复配均表现为增效作用,其中体积比6∶4和7∶3达最大毒性比,分别为1.39和1.41。[结论]戊唑醇、苯醚甲环唑和丙环唑对苹果斑点落叶病菌的毒力最大;解淀粉芽孢杆菌SJ1606发酵上清液粗提物对化学杀菌剂代森锰锌和吡唑醚菌酯具有增效作用,为后续农药新制剂研发提供了参考数据。
- 孟祥涛李梦洁段海明王猛陆文杰张智成
- 关键词：苹果斑点落叶病化学杀菌剂
