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提高抗体ADCC活性的细胞培养工艺
本发明公开提供了一种有效提高抗体ADCC活性的细胞培养工艺,包括:i)向生物反应器中添加表达一种单克隆抗体或其片段的哺乳动物细胞和基础培养基,并将所述生物反应器的培养温度设置为t<Sub>1</Sub>;ii)在培养一段...
裴新姚小员靳孝庆徐凯李金美李学宁王雅丽李海鹰李渝成
SARS-CoV-2特异性抗体ADCC活性与抗体滴度和中和活性呈正相关
2023年
目的:探讨SARS-CoV-2感染者血浆样本抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)及其与抗体滴度和中和活性的相关性。方法:采用表达SARS-CoV-2刺突(spike;S)蛋白的HEK293T细胞为靶细胞,表达FcγRⅢa-V158的Jurkat细胞为效应细胞,建立一种简便的抗体ADCC检测方法。对效应细胞和靶细胞比例进行优化后,分析38份血浆样本的ADCC活性进行。血浆特异性抗体采用捕获ELISA法检测,即用抗标签抗体捕获C-端带标签的重组SARS-CoV-2 S蛋白。血浆抗体中和活性采用假病毒中和试验测定。统计学分析使用Mann-Whitney U检验进行组间比较,非参数Spearman相关检验计算相关性。结果:特异性抗体检测结果显示,38份血浆样本S、S1和受体结合结构域(receptor-binding domain,RBD)抗体阳转率均为97.4%(37/38);动态观察抗体滴度随康复时间的变化趋势,结果显示抗体滴度在3~4周达到峰值。抗体滴度>1∶320的血浆样本的中和活性高于抗体滴度<1∶320的血浆样本[IC 50值:749.6(396.5~3772.0)vs 81.4(11.6~228.4),P<0.01]。对同样的样本进行抗体ADCC活性检测,86.8%(33/38)的血浆样本可检测出ADCC活性,其随康复时间的变化趋势与特异性抗体滴度是一致的,同样在3~4周达到峰值。进一步分析抗体ADCC活性与抗体滴度和中和活性相关性,结果显示均呈正相关,针对S、S1和RBD三个不同靶向区域的抗体,其相关系数分别为0.686、0.535、0.471(P均<0.01),与中和活性的相关系数为0.573(P<0.01)。结论:本研究提供了一种简便的抗体ADCC检测方法,检测结果表明SARS-CoV-2可诱导特异性血浆抗体ADCC活性,且ADCC活性可能来自非中和抗体。同时,ADCC活性在3~4周达到峰值,这些发现为临床血浆救治提供了参考。
钟可馨温莺芬张绪磊邢晓敏庾蕾
关键词:中和活性假病毒
一种用于抗体样品的ADCC活性测定装置
本实用新型公开了一种用于抗体样品的ADCC活性测定装置,涉及ADCC技术领域,包括培养皿体,所述培养皿体的顶部设置有皿盖,所述皿盖的底部中部转动连接有螺纹杆,所述培养皿体的底部内壁固定连接有与螺纹杆相适配的螺纹套筒,螺纹...
熊新辉张弢
提高抗体ADCC活性的细胞培养工艺
本发明公开提供了一种有效提高抗体ADCC活性的细胞培养工艺,包括:i)向生物反应器中添加表达一种单克隆抗体或其片段的哺乳动物细胞和基础培养基,并将所述生物反应器的培养温度设置为t<Sub>1</Sub>;ii)在培养一段...
裴新 姚小员 靳孝庆 徐凯 李金美 李学宁 王雅丽 李海鹰 李渝成
文献传递
检测抗HIV抗体的ADCC活性的方法
本发明涉及分子病毒学和基因工程领域。具体地,本发明涉及一种HIV包膜蛋白,其编码序列,以及包含其的HIV假病毒,所述HIV假病毒可用于检测抗HIV抗体的ADCC活性。本发明还涉及一种用于检测抗HIV抗体ADCC活性的试剂...
王佑春王萌聂建辉黄维金刘强
文献传递
用CRISPR/Cas9技术改造CHO细胞株生产高ADCC活性的抗体药物
背景及目的:在过去的几十年中,单克隆抗体药物治疗在生物制药领域占据了很大的比例,治疗性单克隆抗体被越来越多地用于治疗癌症和自身免疫性疾病,市场数据预测其有更快的增长趋势。抗体激活免疫系统的机制是复杂的,最主要的包括补体依...
宗会芳
关键词:基因敲除ADCC
文献传递
检测抗HIV抗体的ADCC活性的方法
本发明涉及分子病毒学和基因工程领域。具体地,本发明涉及一种HIV包膜蛋白,其编码序列,以及包含其的HIV假病毒,所述HIV假病毒可用于检测抗HIV抗体的ADCC活性。本发明还涉及一种用于检测抗HIV抗体ADCC活性的试剂...
王佑春王萌聂建辉黄维金刘强
一种提高单克隆抗体ADCC活性的哺乳动物细胞培养工艺
本发明公开了一种适于哺乳动物细胞培养并快速有效提高单克隆抗体ADCC活性的工艺途径,该工艺特征在于通过在培养过程中添加核苷和金属离子的方法,控制单抗的糖基化水平,提高单克隆抗体的ADCC活性。该工艺具有稳定性好,可操作性...
吴伟范林萍于鹏展
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ADCC活性得到增强的抗体及其制造方法
本发明的课题在于提供ADCC活性得到增强的抗体及其制造方法。本发明人进一步扩展了Genentech Inc等研究者进行的Fc部分的氨基酸变异,通过向采用计算机检索无法导出的有可能伴有大幅结构变化的氨基酸即半胱氨酸(Cys...
村上昭弘
文献传递
紫杉醇对小鼠巨噬细胞ADCC活性的影响
2001年
目的 研究紫杉醇对小鼠巨噬细胞ADCC活性的影响。方法 按常规方法收集纯化8~12周龄BALB/C雌性小鼠腹腔巨噬细胞,用RPMI1640培养基培养,按所用药物紫杉醇不同浓度和(或)干扰素γ进行分组并设对照组。ADCC活性测定用血红蛋白酶释放法。结果 一定浓度的紫杉醇能增强巨噬细胞ADCC活性,且随浓度的增大,活化作用增强。联合干扰素γ时,作用明显增强。结论 紫杉醇抗肿瘤作用与活化巨噬细胞有关。
王岚郑宏贾卫东
关键词:紫杉醇巨噬细胞

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王佑春
作品数:395被引量:1,308H指数:19
供职机构:中国食品药品检定研究院
研究主题:戊型肝炎病毒 人类免疫缺陷病毒 假病毒 疫苗 HIV
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作品数:68被引量:606H指数:13
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研究主题:人参皂甙 中药 动物模型 小鼠 巨噬细胞
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作品数:504被引量:573H指数:10
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研究主题:电离辐射 E838 DNA损伤 单细胞凝胶电泳 编码基因
黄维金
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供职机构:中国食品药品检定研究院
研究主题:疫苗 假病毒 戊型肝炎病毒 中和抗体 乙型肝炎病毒
马健
作品数:132被引量:826H指数:16
供职机构:南京中医药大学
研究主题:温病 IA抗原表达 细胞毒作用 巨噬细胞 中医药疗法