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一种表达麦芽四糖淀粉酶重组载体及应用: 本发明属于基因工程技术领域，具体的说涉及一种表达麦芽四糖淀粉酶重组载体及应用。载体含SEQ ID NO：1所示的麦芽四糖淀粉酶编码基因(mta基因)的核苷酸序列，或，与其同源性达到90％以上的核苷酸序列；其中，SEQ I...; 王从纲李明玉丛贵龙董思彤艾腾任晓鹏李宪臻

一种高产麦芽四糖淀粉酶的重组载体及其应用: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种高产麦芽四糖淀粉酶的重组载体及其应用。重组载体，载体中插入SEQ ID NO：1所示的麦芽四糖淀粉酶编码基因的核苷酸序列，或，与其同源性达到90％以上的核苷酸序列；其中，SEQ I...; 王从纲王心雨任晓鹏徐鸣李明玉艾腾李宪臻

基于麦芽糖诱导型启动子在枯草芽胞杆菌中异源表达麦芽四糖淀粉酶及其酶学性质的研究: 2024年; 麦芽四糖淀粉酶(Maltotetraose amylase,Mta)可以从淀粉的非还原末端特异性依次切割第4个α-1,4糖苷键形成麦芽四糖,目前在食品、医疗保健和造纸等领域具有重要应用。构建安全、高效的表达系统强化麦芽四糖淀粉酶的重组表达,进而降低以其为核心酶的麦芽四糖生物转化过程的生产成本具有迫切的现实需求。本研究将源自Pseudomonas saccharophila(DSM 654)的麦芽四糖淀粉酶基因mta在枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis中重组表达,利用麦芽糖诱导型启动子实现其安全高效表达,之后对重组酶进行分离纯化和酶学性质表征。结果显示,将携带麦芽糖诱导型启动子Pglv的表达载体转入B.subtilis WB800N中,成功构建工程菌后进行诱导表达,并且利用金属离子螯合层析技术成功获得了Mta纯酶。酶学性质研究结果显示其最适反应温度为55℃,最适反应pH为7.5。动力学常数Km为(1.26±0.17)g/L、kcat/Km为(2275.07±32.83)L/s·g,纯酶在4℃储存14 d后保留40%的酶活力。本研究成功构建出安全、高效表达重组麦芽四糖淀粉酶的表达系统,为其规模化制备和应用提供了新策略。; 丛贵龙李明玉姜梦彤国丹刘羽欣王从纲李宪臻; 关键词：麦芽四糖麦芽四糖淀粉酶枯草芽胞杆菌异源表达启动子酶学性质

一种产麦芽四糖淀粉酶的嗜热芽孢杆菌及其应用: 本发明公开了一种嗜热芽孢杆菌及其应用，属于发酵工程技术领域。本发明得到了一株表达麦芽四糖淀粉酶的嗜热芽孢杆菌，以麦芽糊精为底物，以菌株发酵液为催化剂合成麦芽四糖。本发明以终浓度为20g/100mL的麦芽糊精为底物，麦芽四...; 吴敬宿玲恰杨亚楠; 文献传递

一种产麦芽四糖淀粉酶的基因工程菌及其发酵工艺: 本发明公开了一种产麦芽四糖淀粉酶的基因工程菌及其发酵工艺，属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明以Bacillus subtilis WS11为宿主，构建了产麦芽四糖淀粉酶的基因工程菌Bacillus subtilis ...; 吴敬宿玲恰杨亚楠; 文献传递

一种产麦芽四糖淀粉酶的嗜热芽孢杆菌及其应用: 本发明公开了一种嗜热芽孢杆菌及其应用，属于发酵工程技术领域。本发明得到了一株表达麦芽四糖淀粉酶的嗜热芽孢杆菌，以麦芽糊精为底物，以菌株发酵液为催化剂合成麦芽四糖。本发明以终浓度为20g/100mL的麦芽糊精为底物，麦芽四...; 吴敬宿玲恰杨亚楠; 文献传递

Pseudomonas saccharophila麦芽四糖淀粉酶的重组表达、发酵优化及其应用研究: 麦芽四糖淀粉酶(maltotetraohydrolase或maltotetraose amylase,EC 3.2.1.60)具有外切酶活性,属于GH13家族的淀粉水解酶类,从淀粉的非还原末端,特异的依次切割第4个α-1...; 杨亚楠; 关键词：麦芽四糖淀粉酶枯草芽孢杆菌发酵优化麦芽四糖面包; 文献传递

重组Bacillus subtilis产麦芽四糖淀粉酶的发酵优化及麦芽四糖制备被引量：5: 2019年; 麦芽四糖淀粉酶可水解淀粉或麦芽糊精生成麦芽四糖,在食品领域有着广泛应用。为降低生产成本,对前期构建的生产麦芽四糖淀粉酶的重组枯草芽孢杆菌进行发酵优化。通过对培养基的氮源和碳源进行优化,以5%的接种量,在33℃、200 r/min条件下发酵48 h,发现以25 g/L豆粕粉和25 g/L工业蛋白胨为氮源,5 g/L甘油为碳源时,重组酶酶活力最高可达236 U/m L。利用发酵所得重组麦芽四糖淀粉酶制备麦芽四糖并进行酶反应条件优化,使用高效液相色谱检测产物含量。发现当酶转化反应温度为50℃,反应p H为7. 0,加酶量为30U/g底物,底物麦芽糊精的质量浓度为250 g/L时,反应12 h,麦芽四糖转化率可达73. 2%,为降低生产成本和工业制备麦芽四糖提供了理论依据。; 杨亚楠杨亚楠宿玲恰; 关键词：麦芽四糖淀粉酶发酵优化麦芽四糖

嗜糖假单胞菌麦芽四糖淀粉酶的枯草芽孢杆菌表达及酶学性质分析被引量：5: 2014年; 麦芽四糖淀粉酶是淀粉酶中第3种外切型酶,可以顺序地从淀粉非还原性末端依次切割第4个α-1,4糖苷键,产物为麦芽四糖,广泛应用于食品、医疗保健等领域。该研究采用含有P43启动子和SacB信号肽的pWB980枯草芽孢杆菌表达载体,连接嗜糖假单胞菌来源的麦芽四糖淀粉酶基因,获得了重组菌pWB980-G4/1A747,实现了麦芽四糖淀粉酶在枯草芽孢杆菌中的外分泌表达,并具有生物学活性。对表达产物进行酶学性质分析,结果表明麦芽四糖淀粉酶可广泛作用于7种不同来源的淀粉,生成单一产物麦芽四糖。最适反应温度为50℃,最适pH为7.0。进一步对pWB980-G4/1A747菌株进行发酵条件优化,得到其最佳活化时间为5 h,接种量为5%(v/v),通气量为20 mL/150 mL,培养时间为24 h,培养温度为37℃。; 韦云萍赵云张金龙张利杨芳潘盈盈吴自荣黄静; 关键词：麦芽四糖淀粉酶枯草芽孢杆菌酶学性质

麦芽四糖淀粉酶基因优化表达及酶学性质分析被引量：4: 2013年; 麦芽四糖淀粉酶是一种新型外切淀粉酶,从淀粉的非还原末端特异地顺序切割第4个α-1,4糖苷键,产物为麦芽四糖,广泛应用于食品、医疗保健等领域。对来自嗜糖假单胞菌(Pseudomonas saccharophila)的麦芽四糖淀粉酶基因序列进行优化,优化前后基因序列同源性达75%。将优化合成的成熟肽基因克隆至原核表达载体pET32a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,重组蛋白主要以包涵体形式存在。包涵体经变性、复性、多步纯化,获得有活性的麦芽四糖淀粉酶。将麦芽四糖淀粉酶与不同来源的淀粉水解反应,结果表明,该酶能与7种不同来源的淀粉反应产生单一的麦芽四糖。经SDS-PAGE电泳,DNS法和硅胶板薄层色谱分析法(TLC)进行酶学性质分析,结果表明麦芽四糖淀粉酶的分子量约为57kDa,纯化后的酶液最适反应温度为45℃,最适反应pH为8.0。研究结果为麦芽四糖淀粉酶的研究和开发提供依据和参考。; 赵云朱蓓霖汪正华周杰吴自荣黄静; 关键词：麦芽四糖淀粉酶酶学性质

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