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重组鸡白细胞介素-6/2融合蛋白对新城疫(LaSota株)活疫苗免疫增强作用研究被引量：5: 2019年; 为探究重组鸡白细胞介素-6/2融合蛋白(rChIL-6-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)对新城疫病毒(NDV)活疫苗(LaSota株)的免疫增强作用,本研究将90只SPF鸡随机分为6组,分别为PBS对照组、NDV弱毒苗对照组、rChIL-6-Linker-ChIL-2免疫增强组、rChIL-6蛋白免疫增强组、rChIL-2蛋白免疫增强组及rChIL-6+rChIL-2混合蛋白免疫增强组,将鸡白细胞介素重组融合蛋白水剂与LaSota株联合接种于SPF鸡,分别采用MTS法、流式细胞术、ELISA和HA/HI法检测接种前后不同时间各组鸡外周血及脾淋巴细胞增殖活性、鸡外周血中CD3+CD4+/CD3+CD8+T淋巴细胞的百分含量、血清中Th1/Th2型细胞因子表达水平及免疫抗体水平等指标。结果显示,接种后7～21d时,与NDV弱毒苗对照组相比,同时接种重组融合蛋白组鸡淋巴细胞增殖活性、外周血CD3+CD4+/CD3+CD8+T淋巴细胞的百分含量比值及血清中重组鸡IL-4蛋白(rChIL-4)、ChIL-6、ChIL-2、重组鸡IFN-α蛋白(ChIFN-α)、ChIFN-γTh1/Th2型细胞因子表达水平明显提升;HI免疫抗体较NDV弱毒苗对照组提高了1.0～1.9个滴度,较单一rChIL-6、rChIL-2对照组分别提高了0.2～0.7、0.2～1.1个抗体滴度。综上所述,rChIL-6-Lin-ker-ChIL-2融合蛋白对NDV(LaSota株)活疫苗在鸡体内具有明显的免疫增强效果。; 刘梅芬李勤楠马震原吴志明班付国闫若潜王华俊; 关键词：免疫增强作用 TH1/TH2型细胞因子

鸡白细胞介素-6/2嵌合基因的融合表达及活性研究: 为研究具有鸡白细胞介素-6、2(ChIL-6,ChIL-2)协同免疫增强作用的鸡基因工程复合免疫增强剂,本研究采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法将鸡ChIL-6和ChIL-2基因构建成ChIL-6-linker-C...; 刘梅芬谢彩华闫若潜赵雪丽王东方王淑娟马震原王华後; 关键词：白细胞介素-6 白细胞介素-2 嵌合基因生物活性

重组鸡白细胞介素-6/2融合蛋白对鸡T、B淋巴细胞免疫活性的影响研究: 目的:为研究重组鸡白细胞介素-6/2融合蛋白在体内对鸡T、B淋巴细胞免疫活性,并与重组鸡白细胞介素-6(r Ch IL-6)和重组鸡白细胞介素-2(r Ch IL-2)进行比较,揭示重组融合蛋白在鸡体内发挥r Ch IL...; 李勤楠闫若潜吴志明谢彩华赵雪丽李宁李方方; 关键词：免疫活性; 文献传递

重组鸡白细胞介素-6-2融合蛋白对鸡T淋巴细胞和B淋巴细胞免疫活性的影响被引量：1: 2015年; 为研究重组鸡白细胞介素-6-2融合蛋白（rChIL-6-Linker-ChIL-2）对鸡体免疫功能的影响,采用MTS法检测重组融合蛋白在28日龄SPF鸡体内接种后不同时间对外周血淋巴{6}（PBLC）中T淋巴{6}和脾B淋巴{6}增殖活性的影响,采用流式{6}术检测它对鸡PBLC中CD3＋CD4＋T淋巴{6}、CD3＋CD8＋T淋巴{6}百分含量及CD4＋/CD8＋比值的影响。结果显示,接种后第7~35天,重组融合蛋白可显著提高鸡体PBLC中T淋巴{6}和脾中B淋巴{6}的增殖活性,两者活性分别高于单一rChIL-2蛋白或单一rChIL-6蛋白对照、低于或接近于rChIL-6蛋白＋rChIL-2蛋白混合物。接种后第7~21天,重组融合蛋白可显著提高CD3＋CD4＋T淋巴{6}百分含量、降低CD3＋CD8＋T淋巴{6}百分含量,显著提高CD4＋/CD8＋比值,其活性显著高于单一rChIL-6蛋白或单一rChIL-2蛋白对照,但与rChIL-6蛋白＋rChIL-2蛋白混合组差异不显著。结果表明,重组融合蛋白在鸡体内可显著促进T、B淋巴{6}增殖,提高CD3＋CD4＋T淋巴{6}百分含量和CD4＋/CD8＋比值,从而增强鸡体的体液免疫和{6}免疫功能;重组融合蛋白在体内发挥了ChIL-6和ChIL-2的协同作用活性。; 李勤楠闫若潜吴志明谢彩华赵雪丽李方方李宁张珂刘阳利; 关键词：T淋巴细胞 B淋巴细胞增殖活性

不同浓度重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在鸡体内外活性研究: 引言细胞因子作为免疫佐剂可有效提增强疫苗的免疫作用.IL-6是Th2型细胞，有极好的免疫增强效果，可提高体液免疫，促进抗体的分泌，研究表明人、小鼠、猪、鸡的IL-6可作为疫苗免疫佐剂有效增强疫苗的免疫反应.本文研究了重...; 曹伟伟吴志明闫若潜赵雪丽谢彩华王淑娟马震原王东方李勤楠

重组鸡白细胞介素-6/2融合蛋白对鸡T、B淋巴细胞免疫活性的影响研究: 究重组鸡白细胞介素-6/2融合蛋白(rChIL-6-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)对鸡体免疫功能的影响,采用MTS法检测重组融合蛋白在28日龄SPF鸡体内接种后不同天数(dpi)对外周血淋巴细胞(PBLC)中...; 李勤楠闫若潜吴志明谢彩华赵雪丽李方方李宁张珂刘阳利; 关键词：重组融合蛋白 B淋巴细胞免疫增强作用

重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)对传染性法氏囊灭活疫苗的免疫增强机理研究被引量：5: 2014年; 为了评价重组鸡白细胞介素-6（rChIL-6）蛋白在鸡体内的免疫增强作用机理,本研究将40只7日龄健康SPF鸡随机平均分为4组以进行rChIL-6蛋白对鸡传染性法氏囊病毒（IBDV）灭活疫苗免疫增强作用试验,于14日龄时进行免疫接种和rChIL-6蛋白注射。分别检测4组鸡免疫前和免疫后不同时间血清中IBDV抗体水平、不同细胞因子表达水平、脾淋巴细胞增殖活性和外周血T淋巴细胞增殖活性等指标以揭示rChIL-6蛋白在机体内对疫苗的免疫增强机理。结果表明：免疫后7~49d,rChIL-6蛋白与IBDV灭活疫苗共免疫组（第4组）鸡血清中IBDV抗体水平极显著高于IBDV灭活疫苗对照组（P〈0.01）;免疫后7~35d,第4组鸡血清中的{16}-4、6、2（ChIL-4、ChIL-6、ChIL-2）和γ干扰素（ChIFN-γ）等4种细胞因子的表达水平极显著高于其他3组对照组（P〈0.01）,α干扰素（ChIFN-α）的表达水平于免疫后14~35d期间极显著高于其他3组对照鸡（P〈0.01）;rChIL-6蛋白单独应用后可显著提高机体的ChIL-4、ChIL-6和ChIL-2的表达水平,但对ChIFN-γ、ChIFN-α的表达水平无明显影响。免疫后7~14d,第4组鸡的脾淋巴细胞增殖活性显著高于其他3组对照鸡（P〈0.01）;免疫后7~21d,第4组鸡的外周血T淋巴细胞的增殖活性稍高于其他3组对照组（P〉0.05）。结果表明,rChIL-6在体液免疫和细胞免疫水平对鸡传染性法氏囊灭活疫苗免疫后均具有免疫增强作用;对机体体液免疫应答的增强能力高于细胞免疫应答。; 闫志玲闫若潜吴志明赵明军程俊贞刘梅芬赵雪丽孔刚锐陈慧娟杨晓璐张林海张代宝; 关键词：鸡传染性法氏囊病毒灭活疫苗免疫增强

鸡白细胞介素-6-2嵌合基因的融合表达及其表达产物活性的研究被引量：4: 2014年; 为研制具有鸡白细胞介素-6、2(ChIL-6,ChIL-2)协同免疫增强作用的鸡基因工程复合免疫增强剂,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法将ChIL-6和ChIL-2基因构建成ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因;对嵌合基因进行原核表达,采用自行创新的专利纯化方法对表达的rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白(重组融合蛋白)进行纯化。采用间接ELISA方法检测重组融合蛋白分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体的特异性免疫反应活性,采用MTS法检测重组融合蛋白体外促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示,成功构建了ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因及其重组表达质粒rpQE-30-ChIL-6-linker-ChIL-2,表达的重组融合蛋白的分子质量约为40ku,纯化后的纯度在96%以上。该重组融合蛋白可分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体发生特异性免疫反应,并具有显著的促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞增殖活性,其活性优于任一重组蛋白对照。本研究结果初步证明了rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在对鸡免疫细胞的增殖作用方面与rChIL-6和rChIL-2蛋白的作用相似,为进一步研究rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。; 张书阳谢彩华闫若潜吴志明赵明军赵雪丽刘梅芬杨晓璐张代宝张林海; 关键词：嵌合基因活性

不同浓度重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在鸡体内外活性研究: 为了研究重组鸡白细胞介素-6（rChIL-6）蛋白在SPF鸡体内外活性相关性，从而为开发以rChIL-6蛋白为主要成分的基因工程免疫增强剂研究提供科学依据，本研究采用间接ELISA法和MTS法分别测定不同浓度的rChIL...; 张书阳; 关键词：传染性法氏囊病毒新城疫病毒灭活疫苗免疫增强

重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)对传染性法氏囊灭活疫苗的免疫增强机理研究: 为了评价重组鸡白细胞介素-6 (rChIL-6)蛋白在鸡体内的免疫增强作用机理,本研究将40只7日龄健康SPF鸡随机平均分为4组以进行rChIL-6蛋白对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)灭活疫苗免疫增强作用试验,于14日龄...; 赵明军闫若潜闫志玲吴志明程俊贞刘梅芬赵雪丽陈慧娟

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