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骨骼肌中肌浆网/内质网钙ATP酶的功能及其作用机制被引量：4: 2022年; 骨骼肌是机体生命活动和能量代谢的重要场所,其代谢紊乱会诱发一系列肌肉疾病。Ca^(2+)作为肌肉收缩过程的重要调节器,在骨骼肌的功能行使中发挥重要作用。骨骼肌细胞中Ca^(2+)浓度主要受肌浆网/内质网钙ATP酶(sarcoplasmic/endoplasmic reticulum Ca^(2+)ATPase,SERCA)的调节。SERCA利用ATP水解产生的能量介导胞质Ca^(2+)进入肌浆网内腔,维持胞质Ca^(2+)平衡。SERCA功能的失调会引发一系列骨骼肌疾病,而SERCA活性受部分肌浆网蛋白质的调控,跨膜蛋白质PLN、SLN、MRLN、DWORF和sAnk1以及胞质蛋白质THADA和SAR,其通过磷酸化,进而调控SERCA的功能。本文对骨骼肌中SERCA的功能、调控SERCA的相关功能蛋白质的结构及其作用机制进行了总结,以期为骨骼肌相关疾病的治疗提供最新的思路和方法。; 李晨晨吴玲玲史新娥; 关键词：钙离子骨骼肌

雌二醇调节大鼠内耳质膜钙ATP酶异构体2表达的研究被引量：1: 2022年; 目的观察大鼠血清雌二醇水平变化是否会影响内耳质膜钙ATP酶异构体2(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase isoform 2,PMCA2)的表达,探讨雌二醇对耳石调节蛋白的影响。方法25只三月龄雌性Sprague-Dawley大鼠应用随机数字表法分成5组,每组5只,其中4组行卵巢切除术(ovariectomized,OVX),1组行假手术。造模1月后OVX各组分别补充雌二醇(E2组)、孕酮(P组)、雌二醇和孕酮(E2+P组)、溶剂芝麻油(Veh组),假手术组(Sham组)补充溶剂芝麻油。补充1个月后断头处死各组大鼠,取出双侧听泡。酶联免疫吸附(ELISA)方法检测各组大鼠术前、给药前、处死前血清雌二醇、孕酮水平变化;蛋白印迹杂交(Western Blot)、实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法检测各组大鼠内耳总PMCA2蛋白和mRNA的表达水平。采用SPSS 25.0软件进行统计学分析。结果术前5组大鼠血清雌二醇、孕酮水平差异均无统计学意义(P值均>0.05);给药前各OVX手术组大鼠血清雌二醇、孕酮水平均较Sham组显著降低,差异有统计学意义(P值均<0.05);处死前E2组、E2+P组大鼠血清雌二醇水平与Sham组相比差异无统计学意义(P值均>0.05),而P组、Veh组与Sham组相比差异有统计学意义(P值均<0.05),P组、E2+P组与Sham组相比血清孕酮水平升高(P值均<0.05),而Veh组、E2组与Sham组相比孕酮水平显著下降(P值均<0.05)。与Sham组相比,P组、Veh组大鼠听泡总PMCA2蛋白和mRNA相对表达量均明显下降(P值均<0.05),而E2组、E2+P组的相对表达量无明显变化,差异无统计学意义(P值均>0.05)。结论血清雌二醇水平下降可引起大鼠耳石调节蛋白PMCA2表达下降,进而影响耳石代谢,这可能是雌激素影响耳石代谢的一个重要环节。; 田青冯美艳顾欢欢张照环钱淑霞庄建华; 关键词：雌二醇耳石内耳 SPRAGUE-DAWLEY

比索洛尔对心力衰竭大鼠心肌肌浆网钙ATP酶2a活性的影响被引量：7: 2017年; 目的:观察比索洛尔对心力衰竭大鼠心肌肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)活性的影响。方法:采用阿霉素腹腔注射法建立大鼠心力衰竭模型,随机分为正常对照组、假手术组、模型组、比索洛尔组、卡托普利组和比索洛尔+卡托普利组,分别以蒸馏水、比索洛尔、卡托普利、比索洛尔+卡托普利连续灌胃35d。观察大鼠心功能指标,ELISA法检测血浆脑钠肽水平,茎环状引物实时定量PCR检测心肌miR-25-3p表达水平,Western blot检测心肌SERCA2a和PLB蛋白表达水平,定磷法测定心肌SERCA2a活性。结果:比索洛尔组、卡托普利组和比索洛尔+卡托普利组大鼠心功能指标明显高于模型组,血浆脑钠肽水平明显低于模型组,miR-25-3p表达水平明显低于模型组,SERCA2a和受磷蛋白(PLB)蛋白表达水平明显高于模型组(P<0.01)。比索洛尔组和比索洛尔+卡托普利组SERCA2a/PLB比值和SERCA2a活性明显高于模型组(P<0.01或P<0.05),卡托普利组与模型组比较无明显差异。结论:比索洛尔可以改善心力衰竭大鼠心功能,机制可能与下调心肌miR-25-3p表达水平,提高SERCA2a、PLB表达水平,提升SERCA2a/PLB比值,增强SERCA2a活性有关。; 吴锦波叶小汉冼绍祥董明国; 关键词：比索洛尔肌浆网钙ATP酶受磷蛋白

质膜钙ATP酶异构体1～3在新生大鼠耳蜗基底膜的表达: 2016年; 目的通过Western blot方法检测质膜钙ATP酶异构体1～3（plasma membrane Ca2＋-ATPase isoforms 1～3,PMCA1～3）在新生大鼠耳蜗基底膜（basilar membrane,BM）的表达,并检测PMCA2在单个新生大鼠耳蜗毛细胞纤毛的表达量。方法 1取出生后2天（P2）和8天（P8）健康SD大鼠各4只,断头后分离出BM,提取总蛋白,分别取20μg,通过Western blot法检测BM的PMCA1～3表达。2取P2和P8大鼠BM总蛋白3μg,通过Western blot方法检测BM的PMCA2的表达。3取4只P8大鼠,分离出BM,提取总蛋白,分别取5、10、20μg总蛋白并取100、400和800ng牛血清白蛋白（BSA）作为对照组,跑完电泳后将胶分为2部分,部分泳道用于SYPRO染胶,其余泳道用于Western blot检测PMCA2的表达。结果 1在20μg的P2和P8大鼠BM总蛋白中,PMCA1仅有微弱的表达（分别为0.126±0.024、0.131±0.012）,PMCA2表达水平较高（分别为4.16±0.528、4.25±0.319）,PMCA3几乎没有表达（均为0）,三者间差异有统计学意义（P〈0.05）。2在3μg的P2和P8大鼠BM总蛋白中,P8大鼠PMCA2的表达水平（4.571±0.336）高于P2大鼠（3.622±0.285）,差异有统计学意义（P〈0.05）。3PMCA2在单个P8大鼠BM的含量约为2.5ng。结论 PMCA1～3在新生大鼠耳蜗BM的表达水平不同,PMCA2表达量最大,这可能是由于耳蜗毛细胞对这几种PMCA亚型有不同的Ca2＋调节需求。; 陈请国褚汉启周良强陈金刘云罗蜜陶雁玲; 关键词：基底膜耳蜗

质膜钙ATP酶异构体1～4的剪接体在新生大鼠前庭器官的表达被引量：2: 2016年; 目的研究质膜钙ATP酶异构体(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase isoforms,PMCAs)1~4(PMCA1~4)的A端和C端剪接变异体在新生大鼠前庭器官的表达。方法取出生2天的健康SD大鼠10只,断头后分离出前庭器官(椭圆囊斑和球囊斑),提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测PMCA1~4的A端和C端剪接变异体的表达。结果在新生大鼠的椭圆囊斑和球囊斑PMCA1~4表达的剪接体分别为PMCA1x/b,PMCA2w/(a、b),PMCA3z/(a、b、c)和PMCA4(x、z)/b。结论在新生大鼠前庭器官,PMCA1、PMCA2、PMCA3和PMCA4之间表达的A端和C端剪接变异体类型均不同,这可能是由于椭圆囊斑和球囊斑对这些PMCA亚型有着不同的Ca2+调节需求。; 罗蜜褚汉启陶雁玲周良强陈金刘云潘春晨陈请国; 关键词：剪接体

紫外线照射经活性氧信号通路抑制人晶状体上皮细胞膜钙ATP酶的表达: 目的：研究紫外线(UVB)照射对人晶状体上皮细胞系B-3(HLE B-3)细胞质膜钙ATP酶3(plasma membrane calcium ATPase3,PMCA3)表达的影响,探讨其活性氧信号通路之间的关系. ...; 吴秋欣郭大东毕宏生; 关键词：紫外线B 钙稳态人晶状体上皮细胞

C57BL／6J小鼠耳蜗质膜钙ATP酶异构体2的年龄相关性表达被引量：1: 2015年; 目的研究质膜钙ATP酶异构体2（plasmamembraneCa2＋-ATPaseisoform2，PMCA2）在C57BL／6J小鼠耳蜗组织中的分布及年龄相关性表达，探讨其与年龄相关性听力损失的关系。方法运用免疫荧光组织化学的方法检测PMCA2蛋白在不同鼠龄（4、14、22、45周）C57BL／6J小鼠耳蜗中的分布和表达变化；采用实时定量多聚酶链反应（Real-timePCR）检测PMCA2mRNA在不同鼠龄（4、14、22、45周）小鼠耳蜗中的表达。采用SPSS17．0软件进行统计学分析。结果免疫荧光的结果显示不同鼠龄C57BL／6J小鼠的耳蜗内外毛细胞、血管纹和螺旋神经节细胞均可见PMCA2蛋白表达，螺旋韧带亦可见有少量PMCA2蛋白表达。随着鼠龄的增长，耳蜗毛细胞出现缺失，螺旋神经节细胞数目逐渐减少，PMCA2蛋白的表达也随着鼠龄的增加而逐渐减少。Real—timePCR结果揭示：随着鼠龄的增长，PMCA2mRNA表达水平逐渐下降，14周龄的表达水平与4周龄相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；22周龄表达水平与14周龄相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；45周龄表达水平与14周龄相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PMCA2蛋白主要分布于C57BL／6J小鼠耳蜗内外毛细胞、血管纹和螺旋神经节细胞，随着鼠龄的增长，PMCA2蛋白和mRNA的表达量逐渐减少。PMCA2的表达下降或功能缺失可能与C57BL／6J小鼠内耳形态的年龄相关性改变以及听力损失有一定关系。; 高燕陶雁玲褚汉启陈金陈请国周良强刘云余洋崔永华; 关键词：耳蜗老年性聋小鼠近交C57BL

紫外线B照射对人晶状体上皮细胞质膜钙ATP酶3表达的影响被引量：3: 2014年; 背景细胞质膜钙ATP酶3（PMCA3）参与维持晶状体上皮细胞（LECs） Ca2＋的平衡,可能与白内障的病理过程有关,紫外线B（UVB）是引起白内障的重要因素之一,但UVB对LECs中PMCA3表达的影响少有报道. 目的研究UVB对人LECs系B-3（HLE B-3） PMCA3表达的影响. 方法对HLE B-3细胞进行培养和传代,当细胞达80％以上融合时分别暴露于用不同剂量（0、5、10、20 mJ·s/cm2）的UVB分别照射0、20、40和80 s,然后继续培养24、48和72 h,用MTT法检测不同剂量UVB照射后细胞的生存率;用JC-1染色法检测UVB照射后细胞线粒体膜电位（△ψm）的变化;以DCFH-DA染色法检测UVB照射后细胞内活性氧簇（ROS）的变化;采用annexin V-FITC/PI染色法检测UVB照射后细胞的凋亡情况;用Fluo-3/AM染色法检测细胞内Ca2＋浓度的变化;分别采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）法和Western blot法检测UVB照射后细胞中PMCA3 mRNA及PMCA蛋白的表达变化. 结果随着UVB照射剂量的增加和照射时间的延长,细胞生存率均明显下降,差异均有统计学意义（F分组=72.411,P=0.000; F时间=36.588,P=0.000）,其中10 mJ·s/cm2、20 mJ·s/cm2 UVB照射后24 h HLE B-3细胞的生存率分别为（75.3±2.2）％和（48.7±4.5）％,明显低于对照组的（100.0±0.0）％,差异均有统计学意义（P=0.001、0.000）;5、10、20 mJ·s/cm2 UVB照射后48 h细胞的生存率分别为（84.9±1.2）％、（69.3±17.4）％和（32.8±4.5）％,均明显低于对照组的（100.0±0.0）％,差异均有统计学意义（P=0.047、0.000、0.000）;5、10、20 mJ·s/cm2 UVB照射后72 h细胞的生存率分别为（55.1±3.0）％、（42.1±1.9）％和（26.1±4.7）％,与对照组的（100.0±0.0）％相比生存率明显降低,差异均有统计学意义（均P=0.000）.JC-1染色法检测表明,对照组细胞内可见红色荧光,5mJ·s/cm2 UVB照射后细胞内出现绿色荧光,10 mJ·s/cm2及20 mJ·s/cm2 UVB照射组出现绿色荧光增强,红�; 吴秋欣郭大东毕宏生王道光; 关键词：紫外线B 钙稳态人晶状体上皮细胞

肌浆网钙ATP酶过表达对心房颤动兔心房心电生理的影响被引量：8: 2014年; 目的探讨肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)过表达对急性心房颤动(AF)兔心房肌电重构及结构重构的影响。方法 36只成年新西兰大白兔,随机分为假手术组作为对照组(Control组,n=12)、腺病毒/绿色荧光蛋白+AF组(rAd/GFP+AF组,n=12)、腺病毒/SERCA2a+绿色荧光蛋白+AF组(rAd/SERCA2a/GFP+AF组,n=12)。采用快速心房起搏(频率600次/min)制作急性AF模型。观察各组起搏0、4、8、12、24 h心房有效不应期的变化;应用超声测量左右心房内径、左心室射血分数;荧光显微镜下观察心肌组织绿色荧光表达情况。结果 rAd/SERCA2a/GFP+AF组自起搏12 h后AERP较rAd/GFP+AF组延长(P<0.05)。rAd/SERCA2a/GFP+AF组与rAd/GFP+AF组相比较,兔左右心房直径增大,但增加不显著(P>0.05);EF值升高,两组有统计学差异(P<0.05)。rAd/SERCA2a/GFP+AF组兔心肌冰冻切片在荧光显微镜下可见弥漫绿色荧光。结论以rAd为载体介导SERCA2a基因转导在心房肌组织中过表达可以抗快速起搏引起的AERP缩短,可有效逆转快速心房起搏兔心房肌的电重构及结构重构,有望成为一种潜在的治疗AF的方法。; 王红丽李志强周贤惠周祁娜汤宝鹏; 关键词：心房颤动电重构

肌浆网钙ATP酶基因转导治疗急性心肌梗塞的实验研究: 目的：1/)通过扩增和纯化重组腺病毒携带肌浆网钙ATP酶/(rAd.SERCA2a/)基因,获得高效价的rAd.SERCA2a基因,可满足基因转染浓度和数量的需要,同时也为扩增和纯化肌质网Ca2+-ATP酶/(SERCA...; 范平; 关键词：肌浆网钙ATP酶心肌梗塞微电极阵列骨髓干细胞; 文献传递

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