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用于培育特异IGF1转基因绵羊基因序列及其鉴定引物和鉴定方法
本发明提供了一种用于培育特异IGF1转基因绵羊基因序列及其鉴定引物和鉴定方法,通过将合成的特异IGF1基因序列染到绵羊成纤维细胞,将筛选出的阳性转基因细胞系作为核供体细胞,利用常规体细胞核移植的方式获得特异IGF1...
王立民周平张译元郭延华唐红张弘王新华
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过表达TLR4转基因绵羊单核巨噬细胞吞噬沙门氏菌的分子机制研究
单核巨噬细胞是动物机体中一类重要的免疫细胞,其发挥的吞噬细菌作用在病原菌入侵时发挥至关重要的作用。当动物的免疫细胞吞噬病原菌后可以激活多种免疫应答,随后对侵入的病菌进行清除。Toll样受体(Toll-like recep...
王塑天
关键词:转基因绵羊TOLL样受体4沙门氏菌信号通路
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过表达oTLR4转基因绵羊抗布鲁氏菌病能力的评估及其机制研究
Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)是一种重要的免疫识别受体,在单核巨噬细胞,DC细胞等多种细胞中广泛表达,它识别布鲁氏菌在内的革兰氏阴性菌的LPS,引发炎症反应,在侵入病原体的感知与清...
王志贤
关键词:转基因绵羊炎症反应
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精原细胞介导法制备转基因绵羊以及后代肉品质测定
骨骼肌是目前肉羊育种中的重要经济性状,成肌调节因子(Myogenic regulatory factors,MRFs)负责调控整个骨骼肌的发生过程,MyoG是MRFs家族中唯一在所有骨骼肌细胞中均有表达的基因,在中胚层成...
肖天荣
关键词:肉羊育种转基因绵羊成肌调节因子屠宰性能
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pIL6-TLR4转基因绵羊外周血单核细胞抑制沙门氏菌胞内寄生的研究
脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分,由于其在细菌裂解死亡后大量释放又被称为细菌内毒素。常见的革兰氏阴性菌有霍乱弧菌、沙门氏菌、大肠杆菌及布鲁氏菌等,革兰氏阴性菌可引起动物...
宗炎
关键词:绵羊转基因沙门氏菌
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无标记Fat-1基因真核表达载体的构建及转基因绵羊细胞系的建立
2016年
为了建立无筛选标记基因Fat-1基因绵羊细胞系,本研究将PCR克隆得到的Fat-1基因,合成的attB、Loxp序列并克隆入pN1-EGFP框架载体,得到可删除筛选标记基因的pEGFP-N1-Fat-1真核表达载体。体外录合成phiC31整合酶mRNA并与线性化的pEGFP-N1-Fat-1载体共绵羊胎儿皮肤成纤维细胞,G418筛选得到表达绿色荧光的单克隆,再利用pET-28a-His-NLS-TAT-Cre质粒诱导Cre重组蛋白表达,将纯化后的Cre穿膜肽导表达绿色荧光的单克隆细胞,将荧光淬灭的细胞系扩繁,提取基因组DNA,进行PCR及测序鉴定,得到无标记Fat-1基因绵羊胎儿皮肤成纤维细胞系,为生产无筛选标记基因转基因绵羊奠定基础。
阿力玛朱和平王瑞瑶闫涛苏小虎李璐王丙萍那顺温都乐齐贵春周欢敏
关键词:真核表达载体
实时定量PCR检测转基因绵羊拷贝数被引量:2
2015年
【目的】利用高通量、快速、灵敏的实时荧光定量PCR法,检测类胰岛素样生长因子1-红色荧光蛋白基因(insulin-like growth factor 1-red fluorescent protein,IGF1-RFP)绵羊中外源基因的拷贝数。【方法】以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)作为绵羊的内源参照基因,梯度稀释法。【结果】分别获得RFP和GAPDH基因的Ct值与起始模板数的相关性标准曲线,R2分别为0.999和0.999,相关性高。通过比较目的基因RFP和GAPDH起始模板数,得到外源基因转基因绵羊中的拷贝数。编号0152、0216、0217、0218的转基因绵羊拷贝数分别为3、1、1、1。【结论】以IGF-I转基因细毛羊为研究对象,针对外源基因序列和内源参照基因序列设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR法对IGF-I转基因细毛羊外源基因的拷贝数进行检测,并且准确检测外源基因的拷贝数。
赵帅王立民王聪慧唐红张宾郭延华张译元赵兴旺丁新平张银国周平
关键词:转基因绵羊实时荧光定量PCR拷贝数
过表达oTLR4转基因绵羊的生物安全评估
转基因动物在生命科学、生物医药、环保、农业等方面有着广阔的应用前景,且转基因动物技术发展越来越快。过表达oTLR4(ovine toll-like receptor4,oTLR4)转基因绵羊表现出良好的抗病潜力,但只有通...
白海
关键词:绵羊转基因生物安全毒理
皮肤组织特异性表达绵羊Wnt10b基因转基因小鼠和转基因绵羊研究
Wnt10b基因作为'第一表皮信号'候选基因,对毛囊生长发育和周期性循环生长具有重要意义。研究发现,Wnt10b基因在小鼠毛囊形成和毛囊生长期初期有表达量显著上调的趋势,Wnt10b蛋白在体外培养的胚胎表皮中通过经典的W...
杨祖
关键词:绵羊转录因子
皮肤组织特异表达β-catenin转基因小鼠和转基因绵羊的研究
β-catenin是一个多功能分子,主要参与细胞间的黏附连接和Wnt通路的信号传递。研究表明β-catenin在毛囊的形态发生和毛囊干细胞分化过程中发挥重要作用。β-catenin表达异常会使胚胎期毛囊形成受阻及出生后个...
崔凯
关键词:Β-CATENIN组织特异性表达转基因小鼠转基因绵羊
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周平
作品数:123被引量:206H指数:8
供职机构:新疆农垦科学院
研究主题:绵羊 超细毛羊 碱基 胚胎移植 基因
王小龙
作品数:79被引量:169H指数:7
供职机构:西北农林科技大学
研究主题:绵羊 基因 山羊 滩羊 绒山羊
唐红
作品数:56被引量:65H指数:4
供职机构:新疆农垦科学院
研究主题:绵羊 碱基 核移植 去核 体细胞核移植
郭延华
作品数:72被引量:90H指数:5
供职机构:新疆农垦科学院
研究主题:绵羊 胚胎 基因 核移植 去核
汪锋
作品数:27被引量:27H指数:3
供职机构:中国农业大学
研究主题:褪黑素 体外发育 外源 牛卵母细胞 体外成熟