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重组腺病毒p53基因诱导舌癌细胞株SCC-15凋亡的研究
2020年
目的检测重组腺病毒介导的p53基因(Ad-p53)对舌癌细胞株SCC-15的转染率及增殖抑制作用,分析Ad-p53诱导SCC-15凋亡的作用机制。方法通过构建带有示踪基因-红色荧光蛋白基因(DsRed)的Adp53,荧光显微镜、激光共聚焦显微镜下观察Ad-p53对舌癌细胞株SCC-15的转染情况及增殖抑制作用,应用流式细胞仪检测药物转染率及诱导凋亡率;Western blotting、RT-PCR、Q-PCR检测p53及其上下游基因MDM2、P21基因以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白和mRNA的表达变化,探讨Ad-p53诱导SCC-15凋亡的作用机制。结果随着Ad-p53-DsRed感染复数(MOI)的增加,转染率、细胞凋亡率逐渐增加。Western blot和RT-PCR/QPCR检测到Ad-p53-DsRed作用后P53、P21、促凋亡基因Bax的mRNA和蛋白表达增加,而抗凋亡基因Bcl-2的mRNA和蛋白表达降低。结论 Ad-p53能有效转染并诱导舌癌细胞株SCC-15细胞凋亡。
刘三霞邓子辉王超王昊胡敏
关键词:舌癌P53基因凋亡
钩吻总碱通过JAK2/STAT3/Survivin通路调控人舌癌细胞株Tca8113增殖、凋亡的作用探讨被引量:7
2020年
目的观察钩吻总碱对人舌癌细胞株Tca8113增殖、凋亡的作用,并探讨其对酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)/Survivin通路的调控作用。方法取人舌癌细胞株Tca8113,培养至对数期,分装至6孔板中,分为对照组、A组、B组和C组,每组设置5个复孔。A组、B组和C组分别加入25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度的钩吻总碱处理(20μl),对照组加入等量PBS缓冲液。以倒置显微镜观察72 h后各组细胞形态;以MTT法检测24 h、48 h、72 h后细胞增殖抑制率;以流式细胞仪检测72 h后细胞凋亡率;以RT-PCR检测72 h后JAK2、STAT3、Survivin mRNA相对表达量;以WB检测72 h后IL-6蛋白、JAK2、STAT3、Survivin蛋白表达并计算p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-Survivin/Survivin。结果72 h后,倒置显微镜下观察结果显示对照组细胞紧密,轮廓清晰,贴壁生长状态良好;A组细胞有浮起、变圆,B组和C组可见不同程度细胞壁皱缩和细胞碎片,其中C组变化最为明显,B组次之,A组变化最轻;各组24 h、48 h、72 h后增殖抑制率比较差异均有统计学意义(P<0.05),各组增殖抑制率均随时间延长显著增长,且呈时间依赖性和剂量依赖性;各组72 h后细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.05),各组凋亡率均随剂量升高显著增高;各组72 h后JAK2、STAT3、Survivin mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05);各组p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-Survivin/Survivin比较差异均有统计学意义(P<0.05),每两组间比较也可见差异具有统计学意义(P<0.05),其中对照组均最高,A组均次之,B组均稍低,C组均最低;各组IL-6蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论钩吻总碱能够呈剂量依赖性抑制人舌癌细胞株Tca8113增殖、促进凋亡,推测与直接调控JAK2/STAT3/Survivin通路,抑制JAK2、STAT3、Survivin蛋白磷酸化有关。
魏薇唐祎代婧陈胡杰
关键词:舌癌增殖凋亡
抑制IL1B对舌癌细胞株功能的影响
舌鳞状细胞癌是临床上最常见的口腔癌,由于舌体独特的组织学特征,即拥有丰富的淋巴循环以及高度肌肉化的结构,使得舌癌较其他类型的口腔癌更容易发生局部侵袭与远处转移,这也是舌癌预后不良的一个重要原因。虽然在舌癌诊疗方面的技术不...
陈伟涛
关键词:舌鳞状细胞癌增殖
文献传递
过表达CDH11对舌癌细胞株细胞功能的影响
过表达CDH11对舌癌细胞株细胞功能的影响
郑必坛
关键词:舌癌粘附迁移
文献传递
miR-302b过表达对人舌癌细胞株TSCCa增殖、迁移和侵袭的影响被引量:3
2019年
目的研究miR-302b过表达对人舌癌细胞株TSCCa增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在的分子机制。方法用miR-302b-NC和miR-302b mimic转染舌癌细胞TSCCa,命名为miR-302b-NC组和miR-302b mimic组,以未转染的细胞为对照,转染48 h后,采用流式细胞仪检测转染效率,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测TSCCa细胞中miR-302b的表达情况,分别采用MTT实验、划痕实验和Transwell小室检测TSCCa细胞增殖、迁移和侵袭能力,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测TSCCa细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达情况。结果流式细胞仪检测结果显示转染效率达85%以上;转染后,miR-302b mimic组人舌癌细胞TSCCa中miR-302b的表达水平明显高于对照组和miR-302b-NC组(P <0. 05); miR-302b mimic组人舌癌细胞TSCCa增殖率、迁移能力和侵袭能力显著低于对照组和miR-302b-NC组(P <0. 05); miR-302b mimic组人舌癌细胞TSCCa中PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平明显低于对照组和miR-302b-NC组(P <0. 05)。结论 miR-302b过表达能够抑制人舌癌细胞TSCCa增殖、迁移和侵袭,推测这一作用是通过调控PCNA、MMP-2、MMP-9的表达水平实现的,为舌癌的靶向治疗提供一定的理论依据。
杨军成刘广毅何兴状牟辉
关键词:舌肿瘤增殖细胞核抗原基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶-9
siRNA下调VEGF基因沉默对人舌癌细胞株Tca8113的生物学作用
2019年
目的利用siRNA干扰技术特异性抑制人舌癌细胞株Tca8113的VEGF基因表达,旨在对口腔舌鳞状细胞癌抗血管生成的基因治疗提供理论依据。方法体外构建两对针对VEGF基因的siRNA重组质粒,利用脂质体转染法导入Tca8113细胞内,MTT法观察转染后的Tca8113细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率的改变,RT-PCR技术和western Blot法检测VEGF蛋白表达量。结果本研究设计的两个靶位点siRNA能有效抑制Tca8113细胞增殖,流式细胞术结果显示G0/G1期细胞阻滞,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率增高。VEGF基因蛋白表达率降低,与对照组相比,差异有统计学意义P<0.01。结论体外构建siRNA可特异有效的下调VEGF基因蛋白表达。瞬时转染siRNA可不同程度的抑制Tca8113细胞增殖和诱导凋亡。为口腔舌鳞状细胞癌抗血管生成基因治疗提供理论依据。
崔云峰金月魏来金明光
关键词:SIRNATCA8113细胞基因治疗
新型酪氨酸激酶靶向抑制剂对舌癌细胞株VEGFRs表达以及生长侵袭的影响
研究目的:  了解新型酪氨酸激酶靶向抑制剂(以下简称新药)抑制舌癌细胞血管内皮生长因子受体2(vascular epidermal growth factor receptor2,VEGFR-2)与血管内皮生长因子受体3...
王振瑞
关键词:舌癌细胞株
5-氮杂-2’-脱氧胞苷对舌癌细胞株SCC-4细胞RECK基因甲基化水平及侵袭的影响被引量:2
2014年
目的:探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷5-aza-2-deoxycytidine(5-aza-Dc)对舌癌细胞株SCC-4中抑癌基因RECK基因甲基化水平及侵袭能力的影响。方法:用不同浓度的5-aza-Dc处理舌癌细胞株SCC-4,72 h后,以甲基化特异性PCR(MSP)检测SCC-4细胞RECK基因的甲基化状态,实时定量PCR技术检测SCC-4细胞RECK基因mRNA的表达,Western印迹检测蛋白质表达,Transwell体外侵袭实验检测侵袭能力。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:MSP检测未处理组细胞RECK基因呈高甲基化状态,经5-aza-dC处理后甲基化得到逆转。实时定量PCR检测显示,不同浓度5-aza-dC处理SCC-4细胞72 h后,相对mRNA表达随着药物浓度增加而增加(P<0.05)。Western印记分析结果显示,不同浓度5-aza-dC组的RECK蛋白表达相对水平随药物浓度增加而增加,SCC-4细胞的侵袭力随药物浓度增加而降低。结论:5-aza-dC可逆转舌癌SCC-4细胞中RECK基因的高甲基化状态,并恢复RECK基因mRNA及蛋白的表达,降低其体外侵袭能力。
蒋序
关键词:舌癌RECK甲基化
Hedgehog信号通路相关因子在TCA舌癌细胞株中的表达及其意义
目的:研究Hedgehog(Hh)信号通路相关因子在舌癌细胞株TCA中的表达,探讨其对TCA细胞株增殖和迁移的影响。  方法:本研究用Hh信号通路抑制剂Cyclopamine处理TCA细胞后,采用MTT和划痕实验来检测细...
程志芬
关键词:舌癌蛋白表达
文献传递
巴西苏木素联合平阳霉素对人舌癌细胞株(Tca8113)生长的影响
目的:观察平阳霉素及巴西苏木素体外对Tca8113细胞增殖及凋亡的影响,以及两者联合应用体外对Tca8113细胞增殖及凋亡的作用,为口腔鳞状细胞癌临床联合化疗提供新的思路与方法。方法:MTT法分别检测平阳霉素、巴西苏木素...
王飞
关键词:舌鳞状细胞癌TCA8113平阳霉素CASPASE-3CASPASE-9
文献传递

相关作者

周红梅
作品数:158被引量:508H指数:11
供职机构:四川大学华西口腔医院
研究主题:口腔扁平苔藓 癌相关成纤维细胞 口腔 口腔鳞状细胞癌 口腔癌
王安训
作品数:147被引量:330H指数:11
供职机构:中山大学附属第一医院
研究主题:口腔鳞癌 舌鳞癌 纳米微球 自杀基因 表达及意义
吴俊华
作品数:336被引量:113H指数:7
供职机构:南京大学
研究主题:药物 药物新用 抗肿瘤活性 药理学实验 体外
费继敏
作品数:43被引量:67H指数:4
供职机构:昆明医科大学
研究主题:高温 舌癌细胞 鳞状细胞癌 鼻咽癌 头颈部肿瘤
曾融生
作品数:245被引量:466H指数:12
供职机构:中山大学
研究主题:正颌外科 牵张成骨 牙颌面畸形 矫治 颌骨