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部分胆管结扎致胆汁淤积小鼠模型的构建方法学研究: 2024年; 目的观察不同结扎位点和禁食方法对部分胆管结扎(partial bile duct ligation, pBDL)致胆汁淤积C57BL/6J小鼠模型的影响,研究成模率高、症状典型、稳定性好的pBDL造模方法。方法分别采用选择性结扎左肝胆管(L-pBDL法)和左侧与正中胆管汇合处(ML-pBDL法)进行造模,观察不同pBDL结扎法对C57BL/6J小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、总胆红素、总胆汁酸和肝组织病理学的影响。同时,通过术前分别禁食12 h和禁食16 h、术后均禁食禁水4 h,观察不同禁食方法对ML-pBDL模型体症和肝损伤的影响。结果 (1)ML-pBDL组黄疸出现率52.94%、术后3周内存活率64.71%,而L-pBDL组黄疸出现率11.76%、术后3周内存活率82.35%;与假手术组比较,L-pBDL组和ML-pBDL组血清肝功能指标均显著升高(P<0.01),且ML-pBDL组ALP活性明显高于L-pBDL组(P<0.05);相对于L-pBDL组,ML-pBDL组术后3周的肝纤维化更严重(P<0.01);(2)禁食16 h组黄疸出现率93.33%、术后3周内存活率73.77%,而禁食12 h组黄疸出现率42.86%、术后3周内存活率71.42%;与假手术组比较,禁食16 h组和禁食12 h组ALP活性、谷草转氨酶/谷草转氨酶比值、总胆汁酸水平与胶原纤维面积占比均显著升高(P<0.05)。禁食16 h组各观察指标均高于禁食12 h组,但无显著性差异(P>0.05),禁食12 h和禁食16 h组均出现明显的胆管增生与肝纤维化(P<0.01),且禁食16 h组纤维化更严重(P<0.01)。结论 L-pBDL和ML-pBDL结扎法均可建立小鼠胆汁淤积模型,但L-pBDL模型症状仅表现为一过性的损伤特征,而ML-pBDL模型的肝病变典型、症状稳定,且适当延长术前禁食时间可提高ML-pBDL模型的成模率和稳定性,且病理症状更典型。; 屠海烨包方奇张利棕蒋琛温思思赵梓宇方明笋陈民利; 关键词：C57BL/6J小鼠肝损伤

胆管结扎对大鼠血脑屏障上OCT1/2功能和表达的影响及其机制: 2024年; 探讨胆管结扎(BDL)诱导的肝损伤对血脑屏障(BBB)上有机阳离子转运体1/2(OCT1/2)功能和表达的影响及其可能机制。构建BDL大鼠模型,通过试剂盒、Western blot和LC-MS考察BDL大鼠生理生化指标、BBB完整性、皮层OCT1/2蛋白表达和功能以及血浆鹅去氧胆酸(CDCA)浓度。连续14 d灌胃CDCA后测定大鼠生理生化指标、血浆各胆汁酸浓度和皮层OCT1/2蛋白表达。结果显示,BDL大鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)等浓度升高,血浆CDCA浓度升高,金刚烷胺脑血浓度比值(K_(p))降低,皮层Claudin-5和Occludin无明显变化,OCT1表达下调,OCT2无明显变化。大鼠灌胃CDCA后,血清AST、ALT和ALP无明显变化,血浆CDCA浓度升高,皮层OCT1表达下调,OCT2无明显变化。本研究表明,BDL大鼠BBB上OCT1功能与表达下调与血液中升高的CDCA有关。; 戎光梅王洵刘晓东刘李; 关键词：胆管结扎肝损伤鹅去氧胆酸

肝复乐胶囊对胆管结扎诱导肝纤维化小鼠的保护作用及机制研究: 2022年; 目的研究肝复乐胶囊对肝纤维化小鼠保护作用及其机制。方法雄性C57BL/6小鼠48只,分为假手术组、模型组、肝复乐低剂量组、肝复乐高剂量组,每组12只。给药14 d后处死,肝脏固定切片进行HE染色、Masson染色,检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、白细胞介素-1P(IL-1P)、肿瘤坏死因子-P(TNF-P)含量,使用免疫印迹(Western Blot)、实时荧光定量PCR检测肝脏中肝纤维化及肝星状细胞活化相关指标I型胶原(COL1A1)、-平滑肌肌动蛋白(-SMA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)表达。结果与假手术组相比,模型组肝脏病理切片肝损伤明显,胶原蛋白沉积严重,血清中肝损伤相关指标ALT、AST表达显著性上升(P<0.05),IL-1P与TNF-P的转录与翻译均增强(P<0.05),出现明显炎症,同时,肝脏中肝纤维化与肝星状细胞活化相关指标COL1A1、P-SMA、MMP-9、TIMP1的转录与翻译水平与正常组出现显著性差异(P<0.05)。与模型组相比,肝复乐缓解了肝损伤与肝内胶原沉积,有效降低血清中ALT、AST水平(P<0.05)抑制了IL-1P与TNF-的转录与翻译(P<0.05),明显回调COL1A1、-SMA、MMP-9、TIMP1表达(P<0.05)。结论肝复乐通过减轻炎症、抑制肝星状细胞活化从而缓解胆管结扎造成的肝损伤及肝纤维化。; 周仲实柯畅; 关键词：胆管结扎炎症肝纤维化肝星状细胞

桑黄酸性多糖对胆管结扎所致小鼠肝纤维化的改善作用及其机制被引量：1: 2022年; 目的:探讨桑黄酸性多糖(PIP)对胆管结扎(BDL)所致小鼠肝纤维化的改善作用,阐明其可能的作用机制。方法:60只4周龄雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组和PIP给药组(PIP组),每组15只。对照组小鼠只绕胆总管穿过手术线但不结扎,模型组、阳性药组和PIP组小鼠结扎胆管。术后给药3周,末次给药12 h后眼球取血,处死小鼠。称量小鼠体质量和肝脏质量,并计算肝脏指数;微板法检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;双抗体夹心法检测各组小鼠血清中Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)水平;HE染色和天狼猩红染色观察各组小鼠肝组织病理形态表现和肝纤维化程度;检测各组小鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)水平。Western blotting法检测各组小鼠肝组织中核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠体质量差异无统计学意义(P>0.05),肝脏质量和肝脏指数均升高(P<0.05);与模型组比较,PIP组小鼠体质量无明显变化(P>0.05),肝脏质量和肝脏指数降低(P<0.05)。HE染色,对照组小鼠肝组织无异常表现;模型组小鼠肝组织中肝小叶结构破坏,可见灶状液化性肝坏死和较多炎症细胞浸润;与模型组比较,阳性药组和PIP组小鼠肝组织坏死程度明显减轻,炎症细胞浸润减少。天狼猩红染色,与对照组比较,模型组小鼠肝组织中胶原纤维含量明显增加;与模型组比较,PIP组小鼠肝组织胶原纤维含量明显减少。与对照组比较,模型组小鼠血清中ALT和AST水平明显升高(P<0.01),PCⅢ和ColⅣ水平明显升高(P<0.05),小鼠肝组织中SOD和GSH-Px活性明显降低(P<0.01),MDA和GSH水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,阳性药组和PIP组小鼠血清中ALT和AST�; 谷明柳林逢源吴雪峰周嘉宁卢学春杜培革安丽萍; 关键词：肝纤维化胆管结扎血红素加氧酶1

熊去氧胆酸对胆管结扎大鼠的肝脏炎症病变及血糖影响的研究: 目的:探究熊去氧胆酸对胆管结扎大鼠的肝脏炎症病变及血糖影响的研究。方法:选择健康雄性6-8周龄大小的SD大鼠32只,随机分为四组:A组（正常组,n=8）,不作任何处理,B组（假手术组,n=8）开腹后只游离胆管不结扎,C组...; 邢华冰; 关键词：熊去氧胆酸糖代谢胆管结扎

京尼平苷酸通过调控法尼醇X受体对胆管结扎诱导的胆汁淤积小鼠的影响被引量：4: 2022年; 目的基于法尼醇X受体(FXR)探讨京尼平苷酸(GPA)对胆管结扎(BDL)诱导的肝外胆汁淤积小鼠的影响。方法将60只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组(奥贝胆酸,40 mg·kg^(-1))及GPA高、中、低剂量组(100、50、25 mg·kg^(-1)),每组10只。采用胆管结扎法复制肝外胆汁淤积小鼠模型。术后灌胃给药,每日1次,连续7 d。采用比色法测定血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)的含量;采用qRT-PCR法测定肝组织中胆汁酸合成、吸收、转运相关基因(FXR、 SHP、BSEP、CYP27A1、CYP8B1、NTCP、MRP3、MRP4)、抗氧化应激相关基因(Nrf2、 HO-1、GCLC、GCLM)、炎症相关基因及凋亡因子(IL-6、IL-1β、TNF-α、NLRP3、NF-κB、Bax)、纤维化相关基因(TGF-β1、COL1A1、ICAM-1、p53)mRNA表达。采用HE染色法检测肝组织病理变化;采用天狼星红染色法检测肝组织纤维化情况;采用免疫荧光法测定肝细胞活性氧(ROS)含量。结果与假手术组比较,模型组小鼠肝组织胆管周围有大量炎症细胞浸润,大面积的肝细胞坏死,肝脏组织结构病理损伤明显;黄疸指标AST、ALT、TBA和TBIL水平均明显升高(P<0.01,P<0.001);肝组织炎症因子(IL-6、IL-1β、TNF-α、NLRP3和NF-κB)和凋亡因子(Bax)的mRNA表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001);肝组织的胆管周围有明显的胶原沉积,纤维化相关基因(TGF-β1、COL1A1、ICAM-1和p53)的mRNA表达水平均显著升高(P<0.001);肝组织的主要胆汁酸核受体(FXR、SHP)、胆汁酸顶腔侧膜外排转运体(BSEP)、胆汁酸合成主要限速酶(CYP27A1、CYP8B1)、胆汁酸重吸收转运体(NTCP)mRNA表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.001),而胆汁酸基底侧膜外排转运体(MRP3、MRP4)mRNA表达水平显著升高(P<0.001);肝细胞的ROS水平显著升高(P<0.01),抗氧化应激基因(Nrf2、GCLC、GCLM)mRNA表达水平显著降低(P<0.01,P<0.001)。与模型组比较,GP; 支廷威刘昌辉; 关键词：京尼平苷酸法尼醇X受体胆管结扎胆汁淤积纤维化小鼠

熊去氧胆酸对胆管结扎大鼠血糖及胰岛功能影响的研究: 目的:探讨熊去氧胆酸对胆管结扎大鼠血糖及胰岛功能的影响。方法:将雄性SD大鼠32只随机分为四组:A组（正常组,n=8）,B组（假手术组,n=8）只开腹游离胆管不结扎,C组（手术组n=8）开腹游离并结扎胆管,D组（手术+干...; 杜文晋; 关键词：熊去氧胆酸胰岛功能 GLP-1

保肝宁对胆管结扎诱导的肝纤维化损伤小鼠的保护作用被引量：1: 2022年; 目的:探讨保肝宁抗胆管结扎诱导的肝纤维化损伤的保护机制。方法:将60只小鼠随机分为假手术组、模型组、秋水仙碱组和保肝宁低、中、高浓度组,每组10只。假手术组小鼠打开腹腔并暴露胆管,但不结扎,其余各组用4-0手术缝合线双结扎小鼠胆总管。造模给药28 d后,测定各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平;取肝组织观察小鼠肝脏病理形态学变化、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结蛋白(desmin)和吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)蛋白表达水平以及树突状细胞(DCs)细胞表型和T细胞亚群的变化。结果:与模型组比较,保肝宁高浓度组小鼠血清ALT、AST水平及肝组织α-SMA、desmin、IDO1表达水平显著降低(P<0.01,P<0.05),肝脏胶原沉积明显减少(P<0.01);肝组织CD11c^(+) DCs数量以及成熟DCs百分比均显著增多(P<0.05,P<0.01)。但保肝宁各浓度治疗组和模型组之间肝组织的CD3^(+)T、CD3^(+)CD4^(+)T细胞百分比及CD4^(+)/CD8^(+)比值无显著性差异。结论:保肝宁可能通过调控IDO1的表达水平参与调节DCs数量和各成熟亚群的比例,在改善肝纤维化小鼠肝功能水平和肝纤维化病理程度中发挥积极作用。; 莫婵谢淑雯高磊吕志平; 关键词：肝纤维化结蛋白

逆转素对胆管结扎诱导大鼠肝损害的影响: 2021年; 目的探究小分子化合物逆转素(reversine,Rev)对胆管结扎(BDL)诱导的大鼠胆汁淤积性肝损害、纤维化、上皮细胞-间充质转化以及胆管反应的影响。方法雄性Lewis大鼠随机分成三组,每组各5只。按照如下处理:BDL组大鼠行2周的胆管结扎;BDL+Rev组行胆管结扎同时给予腹腔注射逆转素;对照采用假手术(Sham)。2周后获取血液和肝组织。血指标检测总白蛋白(TP)、总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ谷氨酰转肽酶(GGT)。H&E染色检测肝组织病理。Azan染色检测组织胶原蛋白。免疫组化检测肝组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结蛋白(Desmin)、波形蛋白(Vimentin)、细胞角蛋白(CK7,CK19)、β-连环蛋白(β-Catenin)以及上皮细胞粘附分子(EpCAM)蛋白的表达情况。结果胆管结扎导致肝脏合成的总白蛋白量下降,总胆红素(TBIL)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ谷氨酰转肽酶(GGT)水平明显上升,逆转素处理使下降的总白蛋白上升,使上升的总胆红素(TBIL)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ谷氨酰转肽酶(GGT)水平向正常水平回复。逆转素可以缓解胆汁淤积引起的肝纤维化,表现为下调BDL引起的胶原蛋白和α-SMA蛋白沉积。逆转素可以抑制胆汁淤积引起的上皮细胞-间充质转化表现为逆转素明显降低BDL导致的Desmin和Vimentin的表达。逆转素可以抑制胆汁淤积引起的胆管反应表现为明显减少CK7和CK19阳性胆管的表达含量。逆转素抑制胆汁淤积引起的胆管反应与调节β-Catenin和EpCAM的表达有关。结论逆转素可以缓解胆汁淤积引起的大鼠肝损害,具有一定的保护作用。逆转素可以成为一种潜在治疗药物。; 黄迪黄宇黄宇翁杰锋李佩霖翁杰锋古维立; 关键词：胆管结扎胆汁淤积

七叶皂苷钠对胆管结扎诱导的肝纤维化作用研究被引量：2: 2021年; 目的探究七叶皂苷钠(SA)对胆管结扎诱导的肝纤维化作用机制。方法54只雄性SD大鼠随机均分为:假手术组(Sham组)仅行开关腹,术后每日注射等量生理盐水、生理盐水组(OJ组)行胆管结扎后术后每日注射等量生理盐水、SA组(SA组)行胆管结扎后术后每日注射SA 3.6 mg/kg。通过ELISA测定各组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)的水平。HE及Masson染色观察大鼠肝脏形态结构和胶原纤维的改变。免疫荧光检测Ⅰ、Ⅲ型胶原。免疫组化及Western blot检测eIF-4E、P-4EBP1蛋白表达。结果OJ组大鼠肝脏结构紊乱,血清中的ALT、AST、TBIL水平上升,Ⅰ、Ⅲ型胶原增多,eIF-4E、P-4EBP1在肝细胞中表达减少。SA干预的大鼠血清中ALT、AST、TBIL较OJ组下降,大鼠肝脏中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达减少且上调OJ组大鼠肝细胞中原本下调的P-4EBP1、eIF-4E。结论七叶皂苷钠可以通过促进肝细胞中的4EBP1的磷酸化及eIF-4E的激活保护肝细胞从而减少了肝纤维化。; 王玮琛周大臣崔笑侯辉张彬; 关键词：EIF-4E 胆管结扎肝纤维化七叶皂苷钠

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