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一种肿瘤特异性CTL细胞制备的工艺方法
本发明涉及免疫细胞治疗领域,具体是一种肿瘤特异性CTL细胞制备的工艺方法,D0准备高效诱导的人工抗原提呈细胞1120株,从人外周血单个核细胞分选CD8细胞和Non‑CD8PBMC细胞;共同孵育人工抗原提呈细胞和肺癌抗原肽...
施炜星 孙陈莉 彭志杰
肿瘤特异性CTL细胞的培养方法及细胞治疗产品
本发明提供了一种肿瘤特异性CTL细胞的培养方法及细胞治疗产品。其中,该培养方法包括:将PBMC体外诱导分化为负载肿瘤新生抗原多肽的成熟DC;将成熟DC与CD8+细胞进行共培养,从而刺激CD8+细胞活化为CTL细胞;对CT...
黄英李波李娜胡远安婷余冰琼董碘
一种肿瘤特异性CTL细胞制备的工艺方法
本发明涉及免疫细胞治疗领域,具体是一种肿瘤特异性CTL细胞制备的工艺方法,D0准备高效诱导的人工抗原提呈细胞1120株,从人外周血单个核细胞分选CD8细胞和Non‑CD8PBMC细胞;共同孵育人工抗原提呈细胞和肺癌抗原肽...
施炜星 孙陈莉 彭志杰
一种肿瘤特异性CTL的制备方法
提供一种肿瘤特异性CTL的制备方法,包括如下步骤:肿瘤抗原的包被;外周血单个核细胞的分离;培养肿瘤特异性CTL。通过将外周血中获得的外周血单个核细胞在肿瘤抗原包被的培养瓶中进行孵育培养,然后添加细胞因子进行连续培养,一次...
姜维吕明锦吴庆军
文献传递
应用rmIL-18诱导肿瘤特异性CTL治疗肝癌的实验研究被引量:2
2017年
目的:研究rm IL-18在体外培养系统(Coculture system in vitro,CCs)诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)及在小鼠体内发挥的抗肝癌效果。方法:采用Stem Sep^(TM)免疫磁性细胞分离方法分离培养小鼠脾脏NK细胞、T细胞及DCs,建立体外培养系统;采用不同途径,不同剂量CTL免疫肝细胞癌荷瘤小鼠,研究CTL对荷瘤小鼠肿瘤生长速度和生存时间的影响。结果:rmIL-18能够在体外培养系统中诱导并促进CTL介导的肿瘤特异性杀伤效应;CTL能够明显抑制荷肝癌小鼠的肿瘤生长速度(P<0.01)及明显延长荷瘤小鼠生存时间(P<0.01),并且这种作用随rmIL-18浓度的增加而增强(P<0.01),且肿瘤内注射均优于腹腔内注射(P<0.01)。结论:rmIL-18可以在体外诱导肿瘤特异性CTL并在小鼠体内发挥抗肝癌作用。
米旭光刘磊李首庆魏海峰许淑芬谭岩方艳秋
关键词:细胞毒性T淋巴细胞抗肿瘤
DC荷载α-GalCer联合肿瘤特异性CTL对小鼠Heps肝癌移植瘤生长的影响
2016年
目的:探讨树突状细胞(DC)荷载α-半乳糖神经酰胺(α-GalCer)联合肿瘤特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对小鼠Heps肝癌移植瘤生长的抑制作用。方法:诱导扩增小鼠骨髓来源的DC细胞和T淋巴细胞,培养成为具有肿瘤特异性CTL,DC细胞体外荷载α-GalCer。建立Heps肝癌移植瘤模型,将36只模型鼠随机分为4组(n=9),分别尾静脉给予生理盐水(对照组)、CTL(CTL组)、DC荷载α-GalCer(DC荷载α-GalCer组)、DC细胞荷载α-GalCer+CTL(联合治疗组)输注。每隔两天测量移植瘤体积,观察体积变化。于治疗后第14d,处死小鼠,取眼球血及瘤体组织。流式细胞术(FCM)检测外周血CD4^+、CD8^+T细胞比例。免疫组织化学染色观察肿瘤组织中Bcl-2/Bax凋亡蛋白的表达。结果:与对照组相比,各治疗组均可抑制肿瘤的生长,差异具有统计学意义(P<0.01);联合治疗组较DC荷载α-GalCer组及CTL肿瘤体积明显减小(P<0.05)。联合治疗组小鼠外周血CD4^+、CD8^+T细胞数量较另外三组显著升高(P<0.05);对照组、CTL组、DC荷载α-GalCer组小鼠外周血中CD4^+、CD8^+T细胞含量无明显差异(P>0.05)。与对照组相比,各治疗组移植瘤内Bax阳性细胞数量明显增加(P<0.05),Bcl-2阳性细胞数量明显减少(P<0.05);与CTL组和α-GalCer组相比,联合治疗组移植瘤内Bax阳性细胞明显增加(P<0.05),Bcl-2阳性细胞明显下降(P<0.05)。结论:DC荷载α-GalCer与肿瘤特异性CTL联合应用能够对小鼠Heps肝癌移植瘤具有协同杀伤作用。
王鹏栾智勇张南征吴亮群刘军权杭敏潘进
关键词:DC自然杀伤T细胞
DC 荷载α-GalCer 联合肿瘤特异性 CTL对小鼠 Heps 肝癌移植瘤生长的影响
2016年
目的:探讨树突状细胞(DC)荷载α-半乳糖神经酰胺(α-GalCer)联合肿瘤特异性细胞毒T 淋巴细胞(CTL)对小鼠 Heps 肝癌移植瘤生长的影响。方法诱导扩增小鼠骨髓来源的 DC 细胞和 T淋巴细胞,使其成为具有肿瘤特异性CTL;DC 细胞体外荷载α-GalCer。建立 Heps 肝癌移植瘤模型,采用随机数字表法将模型鼠分为4组(n =9):对照组(静脉给予生理盐水)、CTL 组、DC 荷载α-GalCer组、DC 细胞荷载α-GalCer 联合 CTL 组。干预2周后取肿瘤组织,称取各瘤体重量,计算抑瘤率。免疫组织化学法和 Western blotting 检测各组移植瘤组织内 Bax 和 Bcl-2的表达水平。结果 CTL 组、DC 荷载α-GalCer 组和联合治疗组的平均瘤重分别为(1.07±0.15)g、(1.11±0.17)g、(0.79±0.14)g,均低于对照组(1.69±0.23)g,差异有统计学意义(t =14.176,P =0.023;t =12.351,P =0.034;t =18.672,P =0.000)。联合治疗组的平均瘤重低于 CTL 组及 DC 荷载α-GalCer 组,差异有统计学意义(t =15.236,P =0.012;t =11.176,P =0.037)。联合治疗组(53.25%)的抑瘤率高于 CTL 组(36.69%)和 DC 荷载α-GalCer组(34.32%),差异有统计学意义(P =0.034;P =0.021)。免疫组织化学检测发现,CTL 组、DC荷载α-GalCer 组及联合治疗组移植瘤内 Bax 阳性细胞数量分别为35.83±0.75、33.67±0.82、41.17±1.17,与对照组(21.67±2.16)相比,差异有统计学意义(t =-13.789,P =0.002;t =-15.116,P =0.001;t =-17.452,P =0.000);联合治疗组移植瘤内 Bax 阳性细胞数与 CTL 组和 DC 荷载α-GalCer 组相比,差异有统计学意义(t =-7.730,P =0.009;t =-5.872,P =0.011)。CTL 组、DC 荷载α-GalCer 组及联合治疗组移植瘤内 Bcl-2阳性细胞数量分别为30.83±0.75、31.67±1�
王鹏栾智勇刘军权杭敏潘进张南征
关键词:树突细胞
乌司他丁联合肿瘤特异性CTL治疗癌性恶病质小鼠的实验研究
研究背景:恶病质是晚期肿瘤患者的重要表现和主要死亡原因,其本质是全身过度的非特异性炎症反应。具体表现为以巨噬细胞和中性粒细胞为主体的炎性细胞释放大量炎症因子,引发过度炎症反应,导致机体代谢紊乱、免疫崩溃及多器官衰竭。目前...
肖春红
关键词:癌性恶病质细胞因子细胞毒T淋巴细胞乌司他丁
文献传递
调节性T细胞对肿瘤特异性CTL杀伤效能的影响被引量:1
2012年
目的探讨CD+4CD+25Treg细胞对肿瘤特异性CTL杀伤效果的影响及机制。方法将C57BL/6小鼠80只随机分为4组,每组20只。实验组1:DC与T细胞共同培养前删除CD+4CD+25Treg;实验组2:DC与T细胞共同培养后删除CD+4CD+25Treg;实验组3:DC与T细胞共同培养时不删除CD+4CD+25Treg;对照组:无DC诱导的T细胞。应用脾脏来源DC细胞诱导T细胞制备CTL,在CTL形成的不同时期采用MACS法删除CD+4CD+25Treg。应用MTT法检测不同组别CTL对B16黑色素瘤细胞的杀伤效果。同时应用ELISA法检测细胞培养液中IL-2、IL-10含量变化。结果 3实验组CTL杀伤率明显高于对照组(P<0.05)。实验组1及实验组2删除CD+4CD+25Treg的CTL杀伤率明显高于未删除的实验组3(P<0.05)。但CTL形成的不同时期删除CD+4CD+25Treg对CTL杀伤率无显著差别(P>0.05)。结论删除CD+4CD+25Treg细胞可明显提高CTL的杀伤效果,是打破肿瘤免疫耐受机制的新途径。
张燕李红岩
关键词:CD4+CD25+调节性T细胞树突细胞细胞毒T细胞白介素-2白介素-10
CD4+CD25+Treg细胞对肿瘤特异性CTL杀伤效果的影响被引量:5
2010年
目的 探讨CD4+CD25+Treg细胞对肿瘤特异性细胞毒T细胞(CTL)杀伤效果的影响及机制.方法 将C57BL/6小鼠80只随机分为4组,每组20只.A组:树突状细胞(DC)与T细胞共同培养前删除CD4+CD25+Treg;B组:DC与T细胞共同培养后删除CD4+CD25+Treg;C组:DC与T细胞共同培养时不删除CD4+CD25+Treg;对照组:无DC诱导的T细胞.应用脾脏来源DC细胞诱导T细胞制备CTL,在CTL形成的不同时期采用MACS法删除CD4+CD25+Treg.应用噻唑蓝(MTY)比色法检测不同组别CTL对B16黑色素瘤细胞的杀伤效果.同时应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养液中白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ含量变化.结果 3组实验组CTL杀伤率明显高于对照组(P〈0.05).删除CD4+CD25+Treg的A组、B组CTL杀伤率明显高于未删除的C组(P〈0.05).但CTL形成的不同时期删除CD4+CD25+Treg对CTL杀伤率的影响无统计学意义(P〉0.05).IL-2、IFN-γ含量变化与杀伤率呈现相同的变化趋势.结论 删除CD4+CD25+Treg细胞可明显提高CTL的杀伤效果,是消除肿瘤免疫耐受机制的新途径.
张燕李红岩蔡建辉
关键词:树状突细胞白细胞介素-2干扰素-Γ免疫耐受

相关作者

谭岩
作品数:362被引量:1,074H指数:14
供职机构:吉林省人民医院
研究主题:IL-18 细胞凋亡 小鼠 肝癌 CIK
方艳秋
作品数:321被引量:881H指数:13
供职机构:吉林省人民医院
研究主题:IL-18 流式细胞术 血管内皮生长因子 乳腺癌 CIK
卢小玲
作品数:136被引量:48H指数:4
供职机构:广西医科大学
研究主题:宿主细胞 肿瘤抑制剂 分子检测 检测试剂 基因序列
董小林
作品数:6被引量:3H指数:1
供职机构:山西医学科学院
研究主题:CTL 半相合 灭活 肿瘤特异性CTL DC诱导
张俊萍
作品数:103被引量:306H指数:9
供职机构:山西医科大学
研究主题:免疫治疗 CTL 肿瘤 非小细胞肺癌 非小细胞