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调节刺激因子基因表达对小鼠再生的影响
目的:刺激因子(hepatic stimulator substance, HSS),也称为再生增强因子(augmenter of liver regeneration, ALR),是从新生动物脏或部分切除术后的...
韩丽红闫斌于跃利
关键词:肝刺激因子肝内注射肝再生RNA干扰细胞增殖
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刺激因子促进过氧化氢诱导的星形细胞凋亡被引量:4
2018年
目的刺激因子(hepatic stimulator substance, HSS)可以抑制纤维化,而且在星形细胞中表达,但是其在星形细胞中的作用尚不清楚。因此本研究探讨刺激因子星形细胞凋亡的影响,从而为研究HSS抑制脏纤维化的机制奠定基础。方法选择人星形细胞系LX-2作为研究对象,利用瞬时转染的方法构建过表达HSS的细胞模型后,使用2.5μmol/L H_2O_2刺激细胞20min诱导细胞凋亡;利用Hoechst 33342染色、TUNEL染色、Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡,caspase 3/7活性检测试剂盒检测caspase 3/7活性,进而分析HSS对LX-2细胞凋亡的影响。结果在H_2O_2刺激下,过表达HSS的细胞与转染对照质粒细胞相比,Hoechst 33342染色显示细胞凋亡数目增多,TUNEL染色阳性细胞数增多,流式细胞术检测Annexin V和PI双阳性细胞数显著增多,caspase 3/7活性显著性升高。结论 HSS可以促进H_2O_2诱导的星形细胞凋亡。
艾伟伦董凌月安威
关键词:肝刺激因子肝星形细胞细胞凋亡
刺激因子基因敲除促进非酒精性脂肪性炎发生发展的分子机制被引量:2
2017年
目的探讨刺激因子(HSS)基因敲除促进非酒精性脂肪性炎发生发展的分子机制。方法运用改良DL-乙硫氨酸胆碱缺乏(cDE)高脂饮食法构建C57BL6-HSS叫-和C57BL6-HSS+/+的非酒精性脂肪性炎(NAsH)小鼠模型各20只,另取C57BL6-HSS-/-和C57BL6-HSS+/+小鼠各20只为对照组,不予以造模。每组分别于1个月和2个月时处死小鼠10只并取材,运用ELISA法测定脏中三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)的含量;运用HE染色、Masson染色观察脏病理改变及胶原沉积;油红O染色观察和统计组织内脂质含量;运用实时荧光PCR和蛋白质印迹法检测组织中过氧化物酶体增殖物受体7共辅激活因子1d(PGC-1a)、线粒体转录因子A(TFAM)、转录因子-E2相关因子a(Nrf2)、D环基因(D-loop)、动力相关蛋白1(Drpl)、线粒体分裂蛋白1(Fisl)、线粒体融合蛋白1(Mfnl)、自噬相关基因3(Atg3)的mRNA和蛋白表达水平;检测组织内丙二醛(MDA)、环氧合酶1V(COXIV)和三磷酸腺甙(ATP)的含量;运用分光光度法测定呼吸链复合物V和细胞色素C氧化酶活性。组间采用t检验。结果C57BL6-HSS州’组小鼠的HSSmRNA和蛋白水平分别为0.154±0.04和0.08土0.01,均显著低于C57BL6-HSS+/+组小鼠的0.952±0.08和1.362±0.130,两组比较差异均有统计学意义(t值分别为10.24=4、10.375,均P〈0.05)。造模1个月和2个月,C57BL6-HKS-/-组小鼠脏中TC含量分别为(248.6±21.5)和(217.4±18.0)μmol/g,高于C57BL6-HSS+/+组的(153.5±11.2)和(140.8±7.5)μmol/g,两组比较差异均有统计学意义(t值分别为15.270和10.542,均P〈0.05)。HE染色、油红0染色和Masson染色结果显示C57BL6-HSS-/-组小鼠组织内脂肪和胶原沉积以及炎性反应较C57BL6-HSS+/+组小鼠严重。造模1个月C57BL6-HSS叫-组小鼠脏中Drpl、Fis
陈宁宁会彬占伟丽侯环荣康艳红刘翠平尚佳
关键词:非酒精性脂肪性肝炎肝刺激因子基因敲除线粒体分子机制
刺激因子通过抑制脏星状细胞活化减轻脏纤维化的研究
背景和目的脏受到损伤后,实质细胞发生坏死或凋亡,诱发炎症反应,分泌多种细胞因子,进而刺激静息状态的星状细胞(hepatic Stellate Cell,HSC)发生活化,进一步转分化为肌成纤维细胞(myofibro...
艾伟伦
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刺激因子敲减通过抑制线粒体融合影响非酒精性脂肪性炎的研究
背景与目的:非酒精性脂肪性病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指患者并无过量饮酒史,而由其他原因引起的类似于酒精性脂肪细胞脂肪变性和炎症的一类脏代谢综合征。NAF...
盖曲倞
关键词:肝刺激因子线粒体非酒精性脂肪性肝炎
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刺激因子稳定转染人癌细胞系的方法建立与表达鉴定
2015年
目的建立稳定表达刺激因子(hepatic stimulator substance,HSS)的BEL-7402癌细胞系,并对其生物学特性进行鉴定。方法采用脂质体法将鉴定后的Flag-HSS-pc DNA3.0质粒转染到癌细胞系BEL-7402中,进行G418筛选,获得稳定转染的人癌细胞系。通过real-time PCR、Western blotting和免疫荧光染色等方法鉴定HSS mRNA和蛋白质表达及亚细胞定位。结果免疫荧光染色实验证实HSS基因能在稳定转染的癌细胞系中表达,并定位于线粒体中。同时发现在稳定转染细胞中HSS mRNA和蛋白质的表达也均高于野生型BEL-7402细胞。结论目前已成功构建稳定转染HSS的BEL-7402癌细胞系。为深入研究HSS的生理功能提供实验工具和研究基础。
吴媛张静董凌月安威
关键词:肝刺激因子人肝癌细胞转染
刺激因子对非酒精性脂肪性炎保护作用的初探被引量:1
2015年
目的通过油酸(oleic acid,OA)诱导人癌细胞系BEL-7402建立非酒精性脂肪性炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的细胞模型,探讨刺激因子(hepatic stimulator substance,HSS)对NASH的保护作用。方法采用25、50、100、200、400μmol/L浓度OA处理BEL-7402细胞24h后,再采用噻唑蓝[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]法检测OA对细胞存活率的影响,使用脂质检测试剂盒测定细胞中三酰甘油(triglyceride,TG)的含量,以最适实验条件作用于转染空载体和稳定转染HSS的BEL-7402细胞,检测细胞内TG的含量及细胞上清中丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)含量,油红O染色观察细胞内脂质堆积情况以及使用caspase-3/7活性测定试剂盒检测细胞凋亡情况,综合观察稳定转染HSS保护细胞免受损伤的能力。结果用200和400μmol/L浓度的OA作用于BEL-7402细胞24h可以使细胞活力显著降低。OA浓度为100μmol/L时,BEL-7402细胞内的TG含量最多。与转染空载体的细胞相比,稳定转染HSS细胞内的TG含量和胞外ALT含量均显著下降,用油红O染色可以观察到细胞内红色脂滴沉积减少。结论 HSS对OA诱导的NASH损伤起保护作用。
史一君郭庆安威
关键词:脂肪肝肝刺激因子油酸
CCAAT/增强子结合蛋白α抑制人癌细胞内的刺激因子表达被引量:1
2014年
目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα)对人癌细胞内刺激因子(hepatic stimulator substance,HSS)表达的影响及其在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)抑制HSS表达过程中的作用。方法采用凝胶迁移电泳实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)研究C/EBPα与HSS启动子的体外相互作用,real-time PCR和Western blotting的方法测定hHSS mRNA和蛋白质表达情况。结果 EMSA实验证实C/EBPα可以与hHSS启动子-343/-330区域内的C/EBPα结合位点结合,对hHSS表达具有负性调节作用,C/EBPαsiRNA转染入HepG2细胞后,hHSS mRNA和蛋白质表达均升高。但C/EBPα表达下降并不影响EGF对hHSS表达,而EGF不改变C/EBPα的活性和表达。结论 C/EBPα可通过C/EBP位点抑制hHSS的表达,但不参与EGF对hHSS的转录调节过程。
吴媛董凌月安威
关键词:肝刺激因子表皮生长因子
刺激因子在MCD饮食喂养小鼠非酒精性脂肪性炎中的作用被引量:1
2014年
目的探讨刺激因子(hepatic stimulator substance,HSS)对蛋氨酸胆碱缺乏饲料(methionine and choline-deficient diet,MCD)饮食引起的小鼠非酒精性脂肪性炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的保护作用。方法采用MCD饮食进行小鼠NASH模型的制备,股静脉注射腺病毒包装HSS表达载体pAdxsi-Flag-HSS,用HE染色观察细胞组织改变,油红O染色观察内脂质沉积,并检测β-羟脂酰CoA脱氢酶(β-hydroxyacyl-COA dehydrongenase,HAD)的活性。结果 HSS的表达能显著减少MCD引起NASH小鼠细胞的脂滴的形成,并提高HAD的活性。结论 HSS对MCD造成的NASH损伤起到保护作用,这种保护作用可能部分通过提高HAD的活性而实现的。
任梦肖卫纯安威
关键词:肝刺激因子非酒精性脂肪性肝炎
人重组刺激因子在制备用于治疗非酒精性脂肪性病的药物中的用途
本发明涉及人重组刺激因子在制备用于治疗非酒精性脂肪性病的药物中的用途。发明人用饱和脂肪酸诱导内质网应激以建立脂毒性细胞模型,观察到人重组刺激因子能够通过稳定内质网结构与功能来对抗内质网应激。HSS对细胞的保护作...
安威张静李媛俞豪
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相关作者

安威
作品数:105被引量:314H指数:9
供职机构:首都医科大学基础医学院
研究主题:肝刺激因子 非酒精性脂肪性肝炎 小鼠 己酮可可碱 肝癌细胞
董凌月
作品数:25被引量:25H指数:3
供职机构:首都医科大学基础医学院
研究主题:肝刺激因子 细胞凋亡 表皮生长因子 CCAAT/增强子结合蛋白 前体细胞
吴媛
作品数:15被引量:12H指数:2
供职机构:首都医科大学基础医学院
研究主题:肝刺激因子 肝癌细胞 抗凋亡 线粒体 转染
梅懋华
作品数:35被引量:135H指数:7
供职机构:大连医科大学
研究主题:四氯化碳 肝刺激因子 肝细胞生长因子 四氯化碳损伤 肝细胞
陈莉
作品数:60被引量:293H指数:9
供职机构:首都医科大学附属北京口腔医院
研究主题:正畸力 肝癌细胞 正畸牙齿移动 IL-23 摇椅形唇弓