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鼠伤寒沙门氏菌细菌铁蛋白(Bfr)的生物信息学分析及原核表达载体构建: 2024年; 为了获得高纯度的鼠伤寒沙门氏菌细菌铁蛋白(Bfr),试验利用生物信息学软件对Bfr的结构、翻译后修饰和抗原表位等进行预测分析;通过PCR扩增鼠伤寒沙门氏菌Bfr基因,将其与pET-32a(+)载体连接并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,通过SDS-PAGE分析和Western-blot检测表达及纯化后的目的蛋白。结果表明:Bfr由476个氨基酸组成,分子式为C_(1440)H_(2406)N_(476)O_(606)S_(85),相对分子质量为38808.87,理论等电点为5.25;无信号肽和跨膜区,二级结构包含α-螺旋(81.01%)、无规则卷曲(13.19%)、β-折叠(3.16%)和延伸链(1.90%);含有9个线性B淋巴细胞抗原表位和5个T淋巴细胞抗原表位,以及10个磷酸化位点和10个互作蛋白,Bfr和Bfrd蛋白表面匹配良好、结合稳定。试验成功克隆出Bfr基因,其大小约为476 bp,获得大小约为35 ku的高纯度重组蛋白Bfr。说明Bfr蛋白具有良好的反应原性,有可能成为鼠伤寒沙门氏菌的疫苗开发和疾病诊断的候选蛋白。; 张伟张伟于海涛霍明凯于海涛黄炜涵周霞王震周霞; 关键词：鼠伤寒沙门氏菌生物信息学原核表达 SDS-PAGE

一种厌氧氨氧化细菌的细菌铁蛋白的分离纯化方法: 本发明公开了一种厌氧氨氧化细菌的细菌铁蛋白的分离纯化方法，先对<I>K.S</I> Bfr基因进行扩增，再经克隆和表达后得到菌体，然后用裂解液悬浮，超声裂解，经离心收集上清液，再经两次分离纯化即得到细菌铁蛋白，包括：将凝...; 陈猷鹏王谨晏鹏傅慧敏方芳郭劲松

根癌农杆菌细菌铁蛋白的体外组装及组装体稳定性研究: 铁是生物所必需的一种元素，作为蛋白的辅助因子参与生物体内多种重要的生理生化过程。缺铁会影响生长、代谢以及致病菌的毒力等，而铁过量会引发芬顿反应，对细胞造成氧化性损伤。铁蛋白能够利用O2或H2O2将二价铁氧化为三价铁存储在...; 高苗苗; 关键词：根癌农杆菌细菌铁蛋白自组装

细菌铁蛋白的生化活性及酶活分子机制研究: 铁蛋白是一种广泛存在于生物体内的储铁蛋白，具有调控铁离子代谢、保护细胞组分的功能。近年来随着对铁蛋白结构认识的深入，基于其结构和磁性特点，铁蛋白受到了生物工程、生物医学领域的瞩目。本文以来源于大肠杆菌和嗜热火球菌中的铁蛋...; 王玲; 关键词：细菌铁蛋白生化活性酶活性

鸡白痢沙门氏菌优势抗原细菌铁蛋白诱导产生IFN-β的分子机理: 鸡白痢沙门氏菌(Salmonella Pullorum)主要侵害2-3周龄以内的幼雏,引起白色下痢,病死率高。成年鸡感染后,虽然不会出现典型的临床症状,但长期处于带菌状态,可以水平和垂直传播病菌,对养禽业造成极大的危害,...; 徐志超; 关键词：鸡白痢沙门氏菌细菌铁蛋白 IFN-Β 信号转导细胞凋亡

棕色固氮菌细菌铁蛋白捕获能力、稳定性和亚基相互作用的强度被引量：4: 2008年; 选用柱层析、电泳和反相高效液相色谱（RP-HPLC）技术制备质谱纯棕色固氮菌细菌铁蛋白（Bacteri-al ferritin ofAzotobacter vinelandii,AVBF）,并采用释放铁动力学和肽质量指纹图谱（Peptide mass fingerprint-ing,PMF）技术分别鉴定AVBF。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和电泳技术揭示AVBF亚基之间相互作用强度、稳定性和聚合态。AVBF可直接捕获有机小分子亚甲蓝（MB）,其捕获率为15.0±2.0MB/AVBF,认为介于AVBF亚基单体之间的血红素参与捕获MB。较高浓度（40%～50%）的乙腈和丙酮均能使AVBF和鲨鱼肝铁蛋白（Liver ferritin of shark,SLF）释放不稳定亚基,但在较低浓度（20%～30%）的乙腈条件下,却需要借助来源于质谱仪的激光才能使AVBF或SLF释放不稳定亚基,并供质谱分析。AVBF亚基之间的相互作用强度明显低于SLF。铁蛋白亚基之间的相互作用强度高低与铁蛋白执行释放和储存铁的速率有关。; 黄琳陈旭罗联忠林青黄河清; 关键词：细菌铁蛋白电泳亚基稳定性

细菌铁蛋白电子光谱和释放铁动力学的新颖特性被引量：3: 2006年; 棕色固氮菌细菌铁蛋白(Bacterial ferritin ofAzotobacter vinelandii,AvBF)分子结构由蛋白壳、铁核和横跨蛋白壳的电子隧道组成.细菌铁蛋白由24个相同类型的亚基组成,其分子量略高于魟鱼肝铁蛋白(Liver ferritin ofDasyatis aka-jei,DALF).电泳纯的AvBF在可见光谱区内呈现出4个特征吸收峰,波长分别位于414(α峰),525(β峰),555(S峰)和585(未知)nm.经Na2S2O4还原后,其AvBF在紫外可见区内的整体吸收峰强度明显增高.经物理铂金电极还原后,AvBF的α特征吸收峰(414 nm)强度随着控制还原电位降低(-200,-400,-600 mV vs NHE)而增强.动力学研究表明,在弱碱(pH8.0)条件下,AvBF和DALF均以二分之一级反应动力学方式释放铁,均未表现出释放铁速率转换行为,认为AvBF和DALF的释放铁速率和铁蛋白蛋白壳的柔性调节速率处于同步进行状态,使铁蛋白释放铁的过程符合二分之一级反应动力学规律.; 胡晓慧黄河清; 关键词：细菌铁蛋白棕色固氮菌电子光谱动力学

棕色固氮菌细菌铁蛋白的晶体结构研究福氏志贺氏痢疾杆菌若干基因的克隆、表达及蛋白质的初步晶体学研究: 本论文主要包括两部分的工作。第一部分是棕色固氮菌的细菌铁蛋白的晶体学研究。铁是大多数生物体不可缺少的元素。作为铁的存储蛋白，铁蛋白和细菌铁蛋白是生物体有效利用铁元素的关键蛋白质。但其存储铁的机制仍然不清楚，直到最近才揭示...; 刘合力; 关键词：棕色固氮菌细菌铁蛋白福氏志贺氏菌结构基因组学; 文献传递

固氮菌突变种DJ35钼铁蛋白和UW3细菌铁蛋白的纯化、特性、晶体生长及鉴定: 一、棕色固氮菌突变种DJ35固氮酶钼铁蛋白的纯化、体外重组及结晶研究棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)突变种DJ35的菌体破碎后,所得的未经加热的粗提物经DEAE Cellulos...; 赵剑峰; 关键词：细菌铁蛋白纯化和特性; 文献传递

棕色固氮菌突变种UW3部分提纯的固氮酶CrFe蛋白溶液中残存细菌铁蛋白的晶体生长及鉴定被引量：2: 2004年; 从无钼、无氨而含铬的固氮培养基中生长的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)突变种UW3中纯化得到了部分纯的CrFe蛋白。在试图培养CrFe蛋白大晶体时发现，棕色晶体和砖红色晶体可同时或单独出现。SDSPAGE和厌氧天然PAGE皆表明，棕色晶体主要由与固氮酶钼铁蛋白(Avl)类似大小的亚基(～60kD)组成，而砖红色晶体则由～20kD亚基组成。免疫分析表明只有～60kD的亚基可与固氮酶钼铁蛋白的抗体反应，而～20kD亚基则无这种反应。在部分纯的CrFe蛋白溶液中，～20kD的总蛋白含量远低于～60kD蛋白的含量，表明由这种小亚基组成的蛋白只是CrFe蛋白溶液中的一种污染蛋白。用3，5-二氨基苯甲酸染色的天然电泳表明，形成砖红色和棕色晶体的蛋白是迁移率不同的两种含铁蛋白。质谱分析表明砖红色晶体蛋白为棕色固氮菌的细菌铁蛋白。分辨率为2．34A的X射线衍射结果也表明，砖红色晶体属于H3空间群，晶胞参数为a=124．965A^°，b=124．965A^°和c=287．406A^°。即将发表的三维结构解析表明，此砖红色晶体确为24聚体的细菌铁蛋白。; 赵剑峰刘合力周会娜汪志平赵颖边少敏李树兴毕汝昌黄巨富; 关键词：细菌铁蛋白棕色固氮菌突变种

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