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RAPD在肺炎克雷伯菌及产酸克雷伯菌分型中的应用: 2024年; 目的探索随机扩增多态DNA技术(RAPD)在肺炎克雷伯菌及产酸克雷伯菌分型中的应用。方法收集2022年12月-2023年10月清远市人民医院临床分离的产酸克雷伯菌22株、肺炎克雷伯菌74株,通过筛选模板、单引物、RAPD反应体系及扩增参数、双引物,构建克雷伯菌分型体系,后进行聚合酶链反应(PCR)扩增仪器间、扩增批次内(间)重复性实验。对96株已知克雷伯菌确定分型相似度标准,运用NTsys2.10软件构建遗传距离聚类图。结果煮沸提取基因组DNA满足实验需要,可在-20℃、60d条件下稳定保存;筛选出7条单引物用于双引物配对组合,最佳双引物反应体系为:引物各1μl,模板DNA0.75μl,2×PCR Taq Mix9μl,ddH_(2)O 8.25μl最佳扩增参数为Tm=38℃,退火40s,循环30次;重复性实验获得的RAPD图谱结果基本一致。分型效果最好的双引物组合为RAPD1+M13,该引物组合可在86%的相似度下区分肺炎克雷伯菌与产酸克雷伯菌的差异,将96株克雷伯菌分为40种亚型。结论上述双引物组合可初步用于RAPD对肺炎克雷伯菌及产酸克雷伯菌的种间分型,操作简便,具有较好重复性和稳定性,对病原微生物的分子流行病学分类具有重要意义。; 向琳陈雨珊晏嘉徐令清田国宝钟兰兰鲁洋李林海; 关键词：随机扩增多态DNA技术肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌细菌分型技术

妊娠期糖尿病患者并发尿路感染的影响因素及中段尿病原菌分布特征分析被引量：1: 2023年; 目的探讨妊娠期糖尿病患者并发尿路感染的影响因素及中段尿病原菌分布特征。方法选取2018年12月至2021年12月期间在连云港市第二人民医院就诊的220例妊娠期糖尿病患者作为研究对象,统计尿路感染发生率,根据尿路感染确诊结果分为感染组和未感染组,感染组采取中段尿进行病原菌培养,分析主要革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药率,采用logistic回归模型分析妊娠期糖尿病患者尿路感染的影响因素。结果220例妊娠期糖尿病患者中发生尿路感染者共32例,感染率为14.55%(32/220),其中共鉴定出43株病原菌,主要为革兰阴性杆菌[72.09%(31/43)],其次是革兰阳性球菌[20.93%(9/43)]和真菌[6.98%(3/43)]。主要的革兰阴性杆菌中大肠埃希菌对氨苄西林、左氧氟沙星耐药率较高,肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢唑林耐药率高。感染组与非感染组在年龄、住院时间、个人尿路感染史、妊娠期性生活史、抗菌药物使用情况、空腹血糖、血清白蛋白、糖化血红蛋白方面比较差异均有统计学意义(均P<0.05);多因素logistic回归结果显示,有个人尿路感染史、妊娠期有性生活、未规范使用抗菌药物、血清白蛋白<30 g/L、糖化血红蛋白≥7%、空腹血糖≥8.5 mmol/L是妊娠期糖尿病患者尿路感染的独立危险因素(均P<0.05)。结论妊娠期糖尿病患者存在较高的尿路感染发生率,危险因素复杂,革兰阴性杆菌为主要致病菌,临床上可根据药敏试验合理选择抗菌药物进行干预。; 傅丽群李永明赵小云; 关键词：泌尿道感染细菌分型技术

疫情背景下日用豆腐的防腐保鲜技术的探讨: 2021年; 目的新冠肺炎疫情肆虐全球,时间长,范围广,疫情扩散中多地出现冷链食品源疫情,为食品卫生工程提出新的挑战。传统的冷链食品杀毒杀菌可能难以满足疫情的卫生需求,本文以盒装豆腐为代表探讨疫情背景下食品防腐保鲜新技术,旨在杜绝食源性疫情发生。方法随机抽取盒装豆腐样品,采用高温水浴消毒法进行杀毒杀菌,再对腐败菌经菌落培养依据伯杰氏细菌学手册进行分型鉴定,根据敏感菌型选择尼泊金酯类防腐剂与传统的山梨酸防腐剂进行抑菌对比试验。结果(1)高温杀毒杀菌后进行腐败菌菌型鉴定,发现日用盒装豆腐腐败菌主要为产气肠杆菌、松鼠葡萄球菌、木糖葡萄球菌、梭形芽孢杆菌;新冠肺炎病毒核酸检测阴性;(2)高温杀毒后选用尼泊金丁酯防腐保鲜效果优于其他防腐保鲜剂;(3)保鲜评价表明尼泊金丁酯防腐保鲜结合高温水浴杀毒杀菌,各项卫生指标都符合国家标准,且无质构变化。结论选用0.3g/kg浓度尼泊金丁酯浸泡豆腐30 min并结合82℃30 min的巴氏杀毒杀菌综合防腐保鲜技术可能是疫情情况下日用豆腐的防腐保鲜理想方案。; 何丽华孙永祥戚亚江; 关键词：食品保鲜技术细菌分型技术豆腐防腐剂

胞内分枝杆菌临床分离株亚种组成及体外耐药性分析被引量：6: 2021年; 目的分析深圳地区胞内分枝杆菌临床分离株的亚种组成及其耐药谱,为治疗胞内分枝杆菌肺病提供科学依据。方法选取中国疾病预防控制中心国家结核病参比实验室保存且初步鉴定为胞内分枝杆菌的临床分离株,共计97株。菌株均分离自深圳市第三人民医院2018年收集的疑似肺结核和非结核分枝杆菌(NTM)肺病患者的呼吸道标本。采用PCR及基因测序鉴定胞内分枝杆菌临床分离株亚种,使用Sensititre?SLOWMYCO药敏板测定菌株对13种药品(克拉霉素、阿米卡星、莫西沙星、利奈唑胺、利福平、利福布汀、乙胺丁醇、链霉素、多西环素、环丙沙星、异烟肼、乙硫异烟胺及复方磺胺甲噁唑)的药物敏感性情况。结果97株胞内分枝杆菌临床分离株以亚种胞内分枝杆菌最多[63.92%(62/97)],其次为奇美拉分枝杆菌[18.56%(18/97)]和副胞内分枝杆菌[17.53%(17/97)]。药物敏感性试验显示,胞内分枝杆菌的MIC50和MIC_(90)值最低的是利福布汀(0.5和8μg/ml),最高的是链霉素(32和64μg/ml);亚种胞内分枝杆菌和副胞内分枝杆菌的MIC_(90)均为2μg/ml,而奇美拉分枝杆菌则高达64μg/ml。胞内分枝杆菌临床分离株对克拉霉素、乙胺丁醇、利福平、利福布汀、链霉素、阿米卡星、利奈唑胺和莫西沙星总的耐药率分别为9.28%(9/97)、44.33%(43/97)、42.27%(41/97)、15.46%(15/97)、36.08%(35/97)、11.34%(11/97)、38.14%(37/97)和46.39%(45/97);奇美拉分枝杆菌对克拉霉素的耐药率[27.78%(5/18)]明显高于亚种胞内分枝杆菌[4.84%(3/62)],差异有统计学意义(χ^(2)=8.156,P=0.012)。结论深圳地区胞内分枝杆菌以亚种胞内分枝杆菌为主,对各药品的敏感性有差异,且各亚种对同一药品的敏感性也不同,建议临床治疗前应鉴定至亚种并行药物敏感性试验,以实现个性化治疗。; 李远春张越曾祥洁贺文从邱倩赵雁林李燕明; 关键词：分枝杆菌分枝杆菌感染细菌分型技术微生物敏感性试验细菌

福建省261株非结核分枝杆菌的菌种鉴定分析被引量：7: 2021年; 目的通过对福建省261株非结核分枝杆菌(NTM)进行菌种鉴定,分析福建省NTM的菌种分布情况,为福建省NTM病的临床诊疗和流行病学研究提供科学依据。方法从福建省9个省级结核病耐药监测点和9个地市级疾病预防控制中心结核病实验室2016年6月至2019年12月开展常规培养的菌株中,收集到分枝杆菌菌株3355株,经对硝基苯甲酸(PNB)生长试验初步鉴定出261株NTM菌株,采用GenoType Mycobacterium CM试剂盒进行分枝杆菌的菌种鉴定,DNA测序或MeltPro Myco试剂盒进一步鉴定无法确定菌种的菌株。结果从261株被初步鉴定为NTM的菌株中,鉴定出213株(81.61%)NTM,NTM的分离率为6.35%(213/3355),其中,位列前三的NTM菌种分别是胞内分枝杆菌(65.73%,140/213)、脓肿分枝杆菌(17.37%,37/213)和堪萨斯分枝杆菌(4.22%,9/213);同时,发现了6种罕见的NTM,分别为M.arupense、M.peregrinum、M.phocaicum、M.sinense、M.vanbaalenii和M.dioxanotrophicus;还鉴定出了9株混合感染菌株,其中,8株为结核分枝杆菌复合群(MTBC)和胞内分枝杆菌的混合感染,1株为MTBC和鸟分枝杆菌的混合感染。结论三种NTM鉴定方法的联合使用,揭示了福建省最常见的3种NTM分别是为胞内分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌,还发现了6种罕见的NTM和9株混合感染菌株。; 林建赵永戴志松魏淑贞林淑芳; 关键词：分枝杆菌细菌分型技术聚合酶链反应流行病学研究

山东地区439株非结核分枝杆菌临床分离株菌种鉴定及耐药情况被引量：4: 2021年; 为分析山东地区非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacterium,NTM)临床分离株菌种分布及耐药情况,笔者选取2015年1月至2019年12月山东省胸科医院收治的354例NTM肺病患者的临床分离株进行菌种鉴定,并分析菌株对异烟肼、利福平、乙胺丁醇等25种药品的耐药情况(2018年前采用绝对浓度法检测,2018年及以后采用微孔板法检测)。结果显示,354株NTM临床分离株共鉴定出12种菌种,主要以胞内分枝杆菌(69.77%,247/354)、堪萨斯分枝杆菌(12.71%,45/354)及脓肿分枝杆菌(7.63%,27/354)为主。男性和≥45岁患者构成比[分别为64.97%(230/354)和84.75%(300/354)]明显高于女性和<45岁患者[分别为35.03%(124/354)和15.25%(54/354)],差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为18.639和42.363,P值均<0.01)。183株(51.69%)NTM分离株行药物敏感性试验,其中,50株采用绝对浓度法,结果显示:除对乙胺丁醇的耐药率为52.00%(26/50)外,对其余9种药品(异烟肼、利福平、链霉素、卷曲霉素、左氧氟沙星、对氨基水杨酸、阿米卡星、卡那霉素、氧氟沙星)的耐药率均≥86.00%;133株采用微孔板法,结果显示:对莫西沙星、阿米卡星及克拉霉素的耐药率均较低[分别为0.00%(0/133)、3.76%(5/133)、6.02%(8/133)],对亚胺培南/西司他丁、多西环素、米诺环素、复方磺胺甲噁唑的耐药率均较高[分别为98.50%(131/133)、91.73%(122/133)、90.23%(120/133)、90.23%(120/133)];且不同NTM菌种对部分药品的耐药性存在种间差异。; 封彬彬金锋景辉王俊玲林美英乔秀丽李铭邱丽华; 关键词：细菌分型技术微生物敏感性试验

84例非结核分枝杆菌肺病患者临床特征及耐药性分析被引量：2: 2021年; 目的分析非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)肺病患者临床特征、菌种分布及对常用抗结核药物的耐药情况。方法采用回顾性研究的方法,按照入组标准收集2016年1月至2021年1月苏州市第五人民医院确诊的84例NTM肺病患者(NTM组)和同期的84例肺结核患者(肺结核组)的临床资料,分析两组患者在既往病史、入院初期的临床症状和影像学表现等方面的差异,并记录NTM分离株的菌种鉴定结果及各菌种对异烟肼、链霉素、对氨基水杨酸、阿米卡星、左氧氟沙星、利福平、乙胺丁醇、丙硫异烟胺等8种常用抗结核药品的耐药性。结果NTM组患者有慢性呼吸系统疾病[22.6%(19/84)]、发热[27.4%(23/84)]、咳嗽[95.2%(80/84)]、咯血[29.8%(25/84)]、胸闷[40.5%(34/84)]、并发肺部空洞[38.1%(32/84)]、支气管扩张[45.2%(38/84)]及γ-干扰素释放试验阴性[77.4%(65/84)]等方面均明显高于肺结核组[分别为2.4%(2/84)、3.6%(3/84)、57.1%(48/84)、9.5%(8/84)、15.5%(13/84)、21.4%(18/84)、7.1%(6/84)、2.4%(2/84)],差异均有统计学意义(χ^(2)=15.728,P<0.001;χ^(2)=18.202,P<0.001;χ^(2)=38.403,P<0.001;χ^(2)=10.898,P=0.001;χ^(2)=13.028,P<0.001;χ^(2)=5.581,P=0.018;χ^(2)=31.531,P<0.001;χ^(2)=98.536,P<0.001)。84株NTM分离株前3位的菌种依次为:胞内分枝杆菌(58株,69.0%)、堪萨斯分枝杆菌(15株,17.9%)和龟/脓肿分枝杆菌(6株,7.1%)。药物敏感性试验结果显示,84株NTM分离株对8种抗结核药品的耐药率由高到低依次为异烟肼(84株,100.0%)>链霉素(83株,98.8%)>对氨基水杨酸(82株,97.6%)>阿米卡星(77株,91.7%)>左氧氟沙星=利福平(69株,82.1%)>乙胺丁醇(22株,26.2%)>丙硫异烟胺(13株,15.5%)。结论NTM肺病好发于有慢性呼吸系统疾病的老年患者,γ-干扰素释放试验阴性可早期及时区分NTM肺病和肺结核。NTM对常用抗结核药物耐药率高,治疗难度大,早期诊断并积极进行药物敏感性试验意义重大。; 王熠陆静李苏梅朱雪峰曾令武; 关键词：疾病特征细菌分型技术微生物敏感性试验

痤疮丙酸杆菌的新命名及其与寻常痤疮的相关性被引量：10: 2020年; 近来,有研究者建议将痤疮丙酸杆菌命名为Cutibacterium acnes(C.acnes),以更好研究其分型并与其他丙酸杆菌区分。C.acnes是人类皮肤重要的定植菌,参与维持皮肤健康,但也可能转变成为寻常痤疮的机会性病原菌。最新的研究显示,C.acnes不同型别间的平衡和与其他微生物的相互作用在寻常痤疮发生发展中发挥关键作用。本文综述C.acnes分型及其与寻常痤疮的相关性、药物敏感性和与其他微生物的相互作用。; 郎德休廖勇杨蓉娅; 关键词：寻常痤疮痤疮丙酸杆菌细菌分型技术表皮葡萄球菌细菌噬菌体

沙门菌临床分型方法研究进展被引量：3: 2020年; 沙门菌是可引起食源性疾病的常见病原体[1-2],其感染率较高,可引起严重的公共卫生问题[3]。目前,表型分型是临床实验室的传统分型方法,如血清学分型、噬菌体分型等。此类方法直观、可靠,但因操作烦琐、鉴定时间长、主观性强等缺陷,其应用受到极大的限制。随着分子生物学的快速发展,分子分型技术逐步用于沙门菌分型中,如聚合酶链反应(PCR)技术、脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分析(MLST)、多位点可变重复序列分析(MLVA)、成簇的规律间隔的短回文重复序列分析(CRISPR)及全基因组测序(WGS)等。; 仝雪薇章波冶学燕伊贝拜汗·买卖提(综述)张新; 关键词：沙门菌属表型细菌分型技术

339株非结核分枝杆菌临床分离株菌种鉴定及耐药性分析被引量：18: 2020年; 回顾性分析2014年3月至2019年3月天津市海河医院经罗氏培养和"DNA微阵列芯片技术"确定的339株非结核分枝杆菌(NTM),并对其药物敏感性试验(简称"药敏试验")结果进行分析。339株NTM临床分离株中,排在前3位者分别为胞内分枝杆菌38.6%(131/339)、龟-脓肿分枝杆菌21.2%(72/339)、堪萨斯分枝杆菌18.3%(62/339)。体外药敏试验显示胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和龟-脓肿分枝杆菌对8种抗结核药品(异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、对氨基水杨酸、卡那霉素、卷曲霉素、氧氟沙星)耐药率情况为:胞内分枝杆菌的耐药率分别为95.6%(108/113)、82.3%(93/113)、94.7%(107/113)、54.0%(61/113)、92.0%(69/75)、81.3%(61/75)、85.3%(64/75)、87.5%(49/56);堪萨斯分枝杆菌的耐药率分别为100.0%(54/54)、3.7%(2/54)、98.1%(53/54)、11.1%(6/54)、95.0%(38/40)、90.0%(36/40)、27.5%(11/40)、13.8%(4/29);龟-脓肿分枝杆菌的耐药率分别为96.9%(62/64)、93.8%(60/64)、95.3%(61/64)、92.2%(59/64)、88.4%(38/43)、86.0%(37/43)、88.4%(38/43)、87.1%(27/31)。临床分离NTM菌种以胞内分枝杆菌、龟-脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌为主,其中胞内分枝杆菌、龟-脓肿分枝杆菌对常用一线、二线抗结核药品具有较高的耐药性,堪萨斯分枝杆菌对利福平、乙胺丁醇、氧氟沙星、卷曲霉素的耐药率低。; 秦中华景晔杜岩青宋晓梅张丽霞; 关键词：生物学鉴定法细菌分型技术微生物敏感试验

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