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搜索到1482篇“ 细胞株建立“的相关文章

抗人CD3鼠单抗及兔单抗研发及稳转细胞株建立: 本发明提供本发明提供一种抗人CD3抗体，其重链CDR区氨基酸序列选自SEQ ID NO.1‑5，轻链CDR区氨基酸序列选自SEQ ID NO.6‑9。本发明属于抗体领域，本发明提供了抗人CD3鼠单抗和兔单抗的蛋白序列，建...; 张洋施嘉敏褚冰儿赵鑫萍徐飞张娅褚建达

乳腺癌氟维司群耐药细胞株建立及耐药机制初步研究: 研究背景:乳腺癌是中国女性最常见的恶性肿瘤之一。内分泌治疗是目前雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性乳腺癌最有的效治疗手段之一,它主要包括选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen...; 牟园; 关键词：乳腺癌雌激素受体耐药氟维司群

一种抗人CD16鼠单抗及兔单抗蛋白序列测定及稳转细胞株建立: 本发明提供本发明提供一种抗CD16抗体，其重链CDR区氨基酸序列选自SEQ ID NO.1‑3，轻链CDR区氨基酸序列选自SEQ ID NO.4‑6。本发明属于抗体领域，本发明提供了一种抗人CD16鼠单抗的蛋白序列，并根...; 张洋昌鑫褚建达褚冰儿赵鑫萍徐飞张娅施嘉敏

胰高血糖素样肽-1受体敲除H9c2细胞株建立及其抗凋亡作用初探: 2022年; 目的通过CRISPR/Cas9技术构建大鼠H9c2心肌细胞胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R^(-/-))基因敲除的稳转株,探讨甲基乙二醛对其凋亡的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术敲除H9c2心肌细胞的GLP-1R^(-/-)基因建立GLP-1R^(-/-)H9c2细胞系,单克隆后通过测序和免疫印迹进行鉴定。H9c2细胞为野生型(WT)组,GLP-1R^(-/-)H9c2细胞为GLP-1R^(-/-)组。采用免疫荧光对两组细胞进行染色,电子显微镜观察细胞形态;采用甲基乙二醛对两组细胞进行干预,利用CCK-8检测细胞活力,JC-1检测线粒体膜电位,实时荧光定量PCR检测GLO1、Bax、Bcl-2和caspase-3 mRNA的表达。结果基因测序及免疫印迹结果证实,GLP-1R^(-/-)H9c2细胞系构建成功;免疫荧光染色显示GLP-1R^(-/-)组细胞形态较WT组显著缩小(P<0.01);CCK-8检测结果显示,GLP-1R^(-/-)组细胞活力较WT组显著降低(P<0.01);JC-1检测结果显示,GLP-1R^(-/-)组细胞的线粒体膜电位损伤显著高于WT组(P<0.01);实时荧光定量PCR检测结果显示,GLP-1R^(-/-)组细胞的Bax mRNA表达显著上调(P<0.01),Bcl-2 mRNA表达显著下调(P<0.01)。而caspase-3 mRNA和GLO1 mRNA的表达在两组细胞间无显著差异(P>0.05)。结论在GLP-1R^(-/-)基因敲除的H9c2细胞系中,GLP-1R^(-/-)蛋白缺失会影响H9c2细胞的细胞形态,降低细胞活力,损伤线粒体膜电位,增强甲基乙二醛诱导的凋亡,从而证明GLP-1R^(-/-)蛋白在H9c2细胞中的保护作用。; 林筝鸣钱航李东锋许浩陈继舜闵新文陈俊李小雷杨汉东; 关键词：胰高血糖素样肽-1受体甲基乙二醛 H9C2心肌细胞凋亡

吉非替尼耐药肺癌细胞株建立及其EGFR信号通路改变被引量：3: 2020年; 目的建立吉非替尼(gefitinib)耐药的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变肺腺癌H3255和HCC827细胞株并探究其EGFR下游信号通路改变。方法采用Gefitinib浓度梯度递增法诱导建立H3255和HCC827耐药株;CCK8法检测比较Gefitinib耐药细胞株H3255/GR和HCC827/GR的增殖;Western blot检测比较H3255、HCC827、H3255/GR、HCC827/GR细胞的EGFR下游信号的改变。结果 H3255/GR和HCC827/GR细胞的增殖显著低于非耐药株;H3255/GR和HCC827/GR耐药细胞株磷酸化信号分子p-AKT,p-ERK1/2和p-Stat3与其未耐药株相比均未观察到明显改变。Gefitinib处理的H3255/GR细胞p-Stat3和p-ERK1/2表达水平亦无显著改变,但p-AKT表达显著下调,而吉非替尼仅轻微抑制未耐药株p-ERK1/2表达;在HCC827/GR细胞,p-AKT和p-STAT3不被吉非替尼抑制,p-ERK1/2则被中度抑制。结论H3255/GR和HCC827/GR细胞株Gefitinib耐药的信号机制存在明显差异。; 丁萌廖海秀周楠楠程娟王琴管世鹤周强胡伟陈礼文; 关键词：肺癌吉非替尼耐药

慢病毒介导沉默CDH1基因的MDCK细胞株建立中最佳的MOI值及嘌呤霉素浓度的筛选被引量：1: 2020年; 目的:筛选出慢病毒介导沉默CDH1基因的MDCK细胞株建立中最佳的感染复数(Multiplicity of infection,MOI)及嘌吟霉素浓度(Puromycin)。方法:CDH1干扰阴性对照慢病毒以MOI值0、1、10、100(TU number/cell)分别侵染MDCK细胞,72h后病毒感染效率达80%以上且细胞形态良好的对应MOI值为最佳MOI值。MDCK细胞中分别加入0~11μg/ml Puromycin,每1μg/ml设置一个浓度梯度,选择第4天细胞全部死亡的最低浓度为Puromycin的最佳浓度。结果:MOI值为100时,细胞荧光率为80%~90%,细胞形态良好,100确定为最佳MOI值。Puromycin浓度为7μg/ml,四天后MDCK细胞全部死亡,确定为最佳浓度。结论:确定了慢病毒介导沉默CDH1基因的MDCK细胞株建立中最佳的MOI值及嘌呤霉素浓度,为后续慢病毒介导沉默CDH1基因的MDCK细胞株的建立打下了重要基础。; 冶昡青郭寿清乔自林刘振斌; 关键词：MDCK细胞 CDH1基因嘌呤霉素

慢病毒介导干扰SIRT2人外周血白血病T细胞株建立及其抗凋亡活性研究: 2020年; 目的建立慢病毒介导稳定干扰SIRT2基因的人外周血白血病T细胞株(Jurkat)并检测其对细胞凋亡的影响。方法构建2条针对人源SIRT2基因的shRNA(shSIRT2-1#,shSIRT2-2#),连接到慢病毒载体(pCDH-EF1-MCS-T2A-copGFP)并进行测序鉴定。将SIRT2shRNA慢病毒载体和包装质粒一起转染到293T细胞中,然后收集病毒液,将病毒浓缩液浓缩后去感染人外周血白血病T细胞。采用嘌呤霉素筛选细胞株,进而去建立能够稳定表达SIRT2 shRNA的细胞株。通过蛋白质印迹法来检测SIRT2蛋白水平的表达变化情况,使用流式细胞术来检测细胞的凋亡变化情况。结果琼脂糖凝胶电泳法鉴定经酶切后的重组质粒,结果显示片段大小约为500bp,与SIRT2片段长度相符,SIRT2shRNA慢病毒干扰载体构建成功。蛋白质印迹法检测SIRT2蛋白,与阴性对照组相比,shSIRT2-1#组和shSIRT2-2#组Jurkat细胞中SIRT2蛋白水平显著下调。流式细胞术结果显示,稳定敲低SIRT2蛋白的细胞早中期凋亡率为(20.77±0.66)%,较沉默敲除细胞明显增加,P=0.004。结论成功建立了shRNA慢病毒载体介导的稳定敲低SIRT2的Jurkat细胞株,功能试验证实病毒介导的敲除SIRT2基因的Jurkat细胞的凋亡率增加,说明SIRT2基因具有抗凋亡作用,为进一步深入研究SIRT2蛋白生物学功能提供理论依据。; 姜翠孙涛; 关键词：JURKAT 慢病毒

共表达人kappa阿片受体与PKAcat-EGFP的CHO稳定细胞株建立及功能鉴定被引量：1: 2018年; 目的在中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞上建立人kappa阿片受体(human kappa opioid receptor,hKOR)及增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记的蛋白激酶A催化亚基(catalytic domain of cAMP-dependent protein kinase A,PKAcat)融合蛋白(PKAcat-EGFP)稳定共表达的细胞模型,为体外高通量筛选作用于hKOR的药物及药物分子机制研究打下基础。方法通过脂质体介导法将潮霉素B抗性的hKOR重组质粒[pcDNA3.1/Hygro(+)-hKOR]转染入已稳定表达PKAcatEGFP的CHO细胞中,随后用含潮霉素B的选择性培养基培养细胞,有限稀释法挑取耐药单克隆,PKA重分布实验筛选阳性克隆,利用Z’因子对建立的细胞模型的可靠性进行评价,利用PKA重分布实验与LANCE cAMP 384 Kit检测受体功能。结果 PKA重分布实验与LANCE cAMP 384 Kit结果表明,CHO-PKAcat-EGFP/hKOR-13号克隆反应性良好,100nmol·L^(-1)的U-50488作用时的Z’平均值为0.596,证明了该细胞模型的可靠性,且经多次传代后的受体表达也能保持稳定。结论成功建立了hKOR与PKAcat-EGFP融合蛋白稳定共表达的细胞模型CHO-PKAcat-EGFP/h KOR-13。; 李玉蕾龙隆温泉王莉莉宫泽辉苏瑞斌; 关键词：蛋白激酶A 稳定转染中国仓鼠卵巢细胞

双特异性磷酸酶5过表达/干扰RAW264.7细胞株建立及其对自噬调控的影响: 2018年; 为探究双特异性磷酸酶5(dual-specificity phosphatase 5,DUSP5)在巨噬细胞RAW264.7自噬中的调控作用,该研究采用慢病毒转染的技术方法建立DUSP5过表达/干扰RAW264.7细胞株,并用自噬激活剂雷帕霉素(rapamycin,Rapa)和抑制剂巴弗洛霉素A1(bafilomycin A1,Baf A1)分别对其进行刺激,使用蛋白免疫印迹技术(Western blot)、荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,q RT-PCR)、单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)染色以及免疫荧光等方法探究过表达或抑制DUSP5后对巨噬细胞RAW264.7自噬的影响。结果显示:DUSP5过表达/干扰慢病毒转染RAW264.7可显著提高/抑制DUSP5 m RNA和蛋白的表达量(P<0.01);Rapa刺激后,过表达DUSP5抑制自噬相关蛋白Beclin1和LC3II表达且自噬体形成减少,而抑制DUSP5表达结果与此相反;用Baf A1阻断DUSP5干扰RAW264.7稳定转染细胞株自噬流,DUSP5干扰RAW264.7稳定转染细胞株中LC3II表达量和自噬体数量均显著上调(P<0.01)。由此说明,DUSP5参与调控巨噬细胞自噬,可能通过抑制自噬体合成来阻碍巨噬细胞自噬进程。此结论为进一步探究巨噬细胞自噬调控机制提供了新的研究思路。; 骆佳曾瑾杨易王玉炯; 关键词：巨噬细胞自噬

肝癌放疗抵抗细胞株建立及其机制的初步研究: 目的：　　1.建立肝癌放射抗拒细胞株(MHCC-97H-R)及确定亚致死剂量，为研究肝癌放疗抗拒机制提供细胞平台;2.MHCC-97H-R细胞株DNA损伤修复能力与修复相关基因表达的观察;3.研究SLUG可以通过影响肿瘤...; 詹泽涛; 关键词：肝癌细胞株; 文献传递

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