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基于绿色荧光蛋白培育线粒体形态可视的番茄被引量:1
2024年
本研究旨在实现番茄线粒体形态特征和动态变化的可视化,以便于研究番茄线粒体功能。通过农杆菌(Agrobacterium)介导的遗传转化技术,获得具有线粒体定位功能的绿色荧光蛋白(mitochondria-green fluorescent protein,Mt-GFP)的转基因番茄,测定转基因Mt-GFP番茄果实在绿熟期、破色期和破色后3 d、6 d、9 d时的色差、硬度、可溶性固形物、酸度、呼吸速率和乙烯释放量,并以野生型番茄果实为对照。结果显示,Mt-GFP蛋白不影响番茄果实正常成熟,但使番茄果实酸度升高。用蛋白免疫印迹成功验证了番茄叶片和果实中Mt-GFP蛋白的表达,并在激光共聚焦显微镜下清晰地观察到花、叶片和果实细胞中线粒体形态特征以及花细胞中线粒体的动态变化。转基因Mt-GFP番茄植株的培育实现了番茄线粒体可视化,为研究番茄发育及果实成熟过程中的线粒体功能提供了良好的研究材料。
汤慧路瑶李金焱成柯朱鸿亮
关键词:绿色荧光蛋白番茄果实线粒体功能
一种检测卷烟烟气对线粒体形态和数量影响的方法及其应用
本发明公开了一种检测卷烟烟气对线粒体形态和数量影响的方法及其应用。本发明建立卷烟烟气对神经元线粒体形态和数量影响的检测方法,利用1‑甲基‑4‑苯基吡啶碘化物处理神经元构建帕金森疾病体外模型,研究卷烟烟气对帕金森病多巴胺能...
焦玲玲董卉林伍鹏霖秦艳华陈蕊曹毅刘梦梦朱怀远
基于线粒体形态特征与UPLC-Triple-TOF-MS整合分析的人参/三七心肌保护物质辨析研究被引量:1
2024年
人参为补气强身之要药,三七具有散血定痛之功,常用于治疗心脉瘀阻所致的心肌缺血性疾病。线粒体功能障碍常伴随线粒体形态的异常改变,其可塑性和动态性在心血管疾病中至关重要。该研究将原代乳鼠心肌细胞缺氧培养4 h再复氧2 h,构建心肌细胞缺氧复氧损伤模型。采用荧光探针MitoTracker Deep Red标记心肌细胞线粒体,Hoechst 33342标记细胞核,使用高内涵荧光成像系统采集心肌细胞荧光图像,运用ImagePro Plus软件对图像自动批量处理并提取线粒体形态特征的量化参数,选取代表性参数用于评价线粒体形态功能改变进而筛选人参、三七有效组分;进一步整合UPLC-Triple-TOF-MS技术,筛选人参、三七有效成分。结果显示组分RS-2、RS-4、SQ-1、SQ-4可以同时显著提高线粒体3个形态参数值,增加线粒体长度、分支程度和面积,有效改善缺氧复氧损伤引起的心肌细胞线粒体形态改变。对有效组分的主要成分筛选发现20(R)-人参皂苷Rg_(3)、人参皂苷Re、七叶胆苷ⅩⅦ对心肌细胞线粒体保护作用最佳,进一步研究表明20(R)-人参皂苷Rg_(3)可能通过上调视神经萎缩蛋白1(optic atrophy 1,OPA1)和线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,MFN2)表达,人参皂苷Re和七叶胆苷ⅩⅦ通过上调OPA1蛋白表达,促进线粒体膜融合,减轻线粒体损伤,从而发挥心肌细胞的保护作用。该研究为从人参、三七中发现创新药物提供了实验依据,也为中药心肌保护有效组分与有效成分的规模化筛选提供了新方法。
史雪敬陈彦羽蔡思怡邵青赵筱萍
关键词:人参线粒体形态缺氧复氧心肌保护
超分辨率成像研究尿石素不同亚型对线粒体形态亚群差异分布的影响
2023年
目的使用结构光照明显微镜(SIM)揭示3种尿石素亚型对细胞线粒体毒性的差异。方法通过SIM对尿石素孵育后的细胞线粒体超分辨成像,使用图像处理软件Image J进行数据分析。结果SIM在药物浓度10.0μmol/L时即可检测到3种药物亚型的细胞毒性。CCK-8(cell counting kit-8)与SIM在药物浓度40.0μmol/L时均检测到尿石素C的毒性最强。结论尿石素A、B、C 3种亚型中UC的毒性最强。使用超分辨成像技术显微镜在亚细胞水平进行毒性检测,可准确评估和量化低浓度的药物的毒性,促进药物分析和新药研发。
孟鹏吴忠玉
关键词:线粒体形态毒性分析
膝骨关节炎软骨基质刚度对线粒体形态异质性的影响
2023年
目的研究膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)胫骨平台不同区域基质刚度的差异,及其对软骨和线粒体形态的影响。方法获取OA胫骨平台软骨标本用于纳米压痕测试、透射电镜拍摄以及组织学分析。利用纳米压痕检测OA胫骨平台不同区域软骨基质刚度,通过透射电镜观察不同区域软骨线粒体形态,定量分析线粒体平面面积、形状、嵴体积密度的变化。通过组织学染色观察OA胫骨平台不同区域软骨损伤情况。结果OA胫骨平台软骨损伤具有区域异质性,内侧胫骨平台软骨和线粒体损伤更重,同时基质刚度更高。OA评分与基质刚度呈正相关。OA评分与线粒体形态之间也有显著的相关性:OA评分越高,线粒体平面面积越大、越圆以及嵴体积密度越低。结论胫骨平台不同区域的差异揭示了软骨基质刚度、OA评分和线粒体形态学参数之间的相关性,软骨基质刚度增加可能是造成软骨细胞线粒体损伤的主要原因,进而加重了OA进展。
阚天佑侯伶俐李汉骏崔俊琪王耀孙林王燎于志锋严孟宁
关键词:骨关节炎软骨细胞线粒体
基于线粒体形态与功能的白腰雪雀高原适应性研究
2023年
为了探究白腰雪雀(Onychostruthus taczanowskii)胸肌和心肌组织对高原环境的适应机制,以2个不同海拔地区的白腰雪雀为样本,以低海拔地区麻雀(Passer montanus)为对照,应用显微体视学技术,分析胸肌和心肌组织线粒体的面数密度(NA)、体密度(VV)、面密度(SV)、平均截面面积(MS)和比表面(δ);采用分光光度法测定线粒体呼吸链上复合体Ⅰ~Ⅳ的酶活性。结果显示:高海拔白腰雪雀胸肌和心肌组织线粒体的NA、VV、SV和δ均大于低海拔的,除心肌线粒体的NA外,其余参数均达显著水平(p<0.05),胸肌和心肌组织线粒体的4个复合体酶活性均大于低海拔,除胸肌组织的复合体Ⅲ和Ⅳ外,其余均达显著水平(p<0.01)。与麻雀相比,白腰雪雀胸肌和心肌组织线粒体的NA和δ均显著高于麻雀(p<0.05),而MS显著低于麻雀(p<0.001);白腰雪雀组织线粒体上4个复合体的酶活性均大于麻雀,除胸肌组织复合体Ⅰ外,其余均达显著水平(p<0.01)。研究表明白腰雪雀在高原低温、低氧环境下,胸肌和心肌组织可通过减小单位线粒体的体积、增加胞内线粒体数量、加强线粒体对自身膜的利用率和提高线粒体呼吸链上4个复合体酶活性的方式,更好地适应高原生活。
吕博文马永贵李国刚郝玉馨赵建芝马玉梅贺玉姣
关键词:线粒体低氧适应胸肌心肌青藏高原
活体小动物检测下颌下腺线粒体形态的固定装置
本申请公开了一种活体小动物检测下颌下腺线粒体形态的固定装置,包括:底盘,用于固定活动小动物;支架组件,设于底盘上;吸盘组件,设于支架组件的端部并位于底盘的上方,吸盘组件包括吸盘和玻片,吸盘上开设有吸附孔和与吸附孔连通的第...
闵赛南丛馨何其华吴立玲俞光岩
西洋参-石菖蒲对糖尿病大鼠海马线粒体形态结构及GLUT-4蛋白表达的影响被引量:4
2022年
目的探究西洋参-石菖蒲对糖尿病大鼠海马线粒体形态结构及GLUT-4蛋白表达的影响。方法以链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型,分为糖尿病组(DM Group)、二甲双胍组(Metformin Group)、西洋参-石菖蒲组(X-S Group);STZ注射9 d后给予西洋参-石菖蒲药液每日1次,连续75 d;血糖仪检测FBG;Morris水迷宫评价各组大鼠的学习记忆能力,筛选糖尿病认知障碍大鼠和非认知障碍大鼠;透射电镜观察海马线粒体形态结构;免疫组化法观察海马GLUT-4蛋白表达。结果与糖尿病组比较,西洋参-石菖蒲组大鼠空腹血糖及学习记忆能力均无显著变化(P>0.05),认知障碍发生率降低;与DACD组比较,西洋参-石菖蒲组大鼠海马神经元及神经毡线粒体肿胀或固缩现象减轻,但海马神经元胞膜GLUT-4蛋白表达无显著变化。结论西洋参-石菖蒲可能通过海马线粒体的保护作用,降低糖尿病大鼠认知障碍发生率,而与促进海马GLUT-4蛋白膜转位无关。
李佳男周游刘琳宋立强
关键词:糖尿病学习记忆海马线粒体葡萄糖转运蛋白-4
丹栀逍遥散对焦虑模型大鼠行为学及线粒体形态和功能的作用研究被引量:9
2022年
丹栀逍遥散是治疗焦虑症的经典方剂,该研究旨在研究焦虑大鼠线粒体形态功能的变化,说明丹栀逍遥散对焦虑动物模型的治疗效果及作用机制。采用不确定性空瓶饮水应激21 d建立焦虑动物模型,各组大鼠分别于应激第7、14、21天进行十字高架实验和旷场实验,检测焦虑相关蛋白指标脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)水平,评价动物的焦虑水平并初步分析丹栀逍遥散对焦虑模型大鼠的干预作用;在第21天行为学测试结束后处死动物,分离脑组织进行线粒体形态学观察,并测定线粒体功能相关指标及单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)表达,说明丹栀逍遥散可能的作用机制。研究结果表明,丹栀逍遥散可改善动物的焦虑样行为,显著增加大鼠高架十字迷宫开臂活动比例及旷场中心区域活动时间比例,且丹栀逍遥散呈剂量依赖地提高呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性水平和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量,提高BDNF和磷酸化单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(p-AMPK)蛋白表达。电镜结果显示丹栀逍遥散治疗组杏仁核和内侧前额叶皮质细胞内线粒体线粒体嵴结构清晰,形态结构完整。该研究证明丹栀逍遥散有较好的抗焦虑作用,其机制可能与p-AMPK保护线粒体形态结构完整,维持线粒体功能水平相关。
赵安然王思琪赵振武郭建友
关键词:杏仁核线粒体丹栀逍遥散AMPK
基于线粒体形态的高分辨药物筛选与评价策略的建立及应用
线粒体疾病是由线粒体功能障碍导致ATP合成不足等诱导的异质性病变(如神经性疾病,癌症,骨关节炎等),其发病机理尚不清晰。长期以来,受技术水平因素限制,现行的基于细胞水平的药物评价研究手段均基于大量细胞累计水平,忽略了药物...
邵新田
关键词:药理学线粒体形态线粒体肿胀药效学评价
文献传递

相关作者

杨传红
作品数:157被引量:586H指数:10
供职机构:广州军区广州总医院
研究主题:超微结构 海马神经元 伽玛刀照射 骨巨细胞瘤 凋亡
赖晃文
作品数:164被引量:523H指数:10
供职机构:广州军区广州总医院
研究主题:超微结构 SARS 电镜 海马神经元 细胞凋亡
詹纯列
作品数:136被引量:581H指数:13
供职机构:广州军区广州总医院
研究主题:小型猪 WISTAR大鼠 小鼠 SPF级 普通级
苗鸿才
作品数:65被引量:305H指数:10
供职机构:北京大学第一医院
研究主题:缺氧缺血性脑病 缺氧 形态计量学 线粒体 脑细胞
李建军
作品数:57被引量:282H指数:9
供职机构:中国人民解放军
研究主题:WISTAR大鼠 小鼠 海马神经元 SPF 慢性疲劳