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人源化六基因编辑红细胞治疗恒河猴急性失血性休克的疗效观察
2024年
背景临床上血液制品短缺是一项世界难题,红细胞与人类红细胞有诸多相似之处,有望解决这一难题。目的将人源化基因编辑(GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD55/hCD46/hTBM)的红细胞输注至非人灵长类动物恒河猴体内,探讨异种输血的可能性。方法采用盐水介质交叉配血法,检测六基因编辑红细胞(6GE-pRBC)与恒河猴的血液凝集情况。通过IgG、IgM结合实验和补体介导的细胞毒性实验验证异种输血安全性,从恒河猴体内抽取25%血容量血液后输注等量的异硫氰酸荧光素标记6GE-pRBC,通过流式细胞分析术监测在其体内的存活状态,并定期采集受体血液样本验证异种输血的有效性,观察6GE-pRBC输注治疗失血性休克恒河猴的可能性。结果6GE-pRBC与恒河猴主次侧交叉配血试验均为阴性;其基因表型鉴定符合预期结果;恒河猴血清与6GE-pRBC的IgG、IgM结合实验结果显示IgG(3.35%)、IgM(4.13%)表达量较低;6GE-pRBC的补体介导细胞毒作用(CDC)显著低于野生红细胞(P<0.0001)。输血后60 h 6GEpRBC在恒河猴体内仍存活;血细胞比容失血后为28.6%,60 h升高至35%;血蛋白含量失血后为92 g/L,60 h升高至116 g/L并维持于失血前正常水平。结论6-GE-pRBC输注给恒河猴在一定时间内能有效地纠正恒河猴休克症状,且未发现免疫排斥反应。随着基因编辑技术不断创新,基因编辑红细胞有望替代人红细胞治疗人类急性失血性休克。
贾志博崔梦一王恺杜嘉祥董阳辉宋翔宇陈蕾佳杨博尧陈胜峰彭熙为许文静潘登科彭江
关键词:猪红细胞恒河猴免疫排斥反应
人源化基因修饰红细胞与人血清免疫相容性的体外研究
2024年
目的 探讨野生型(WT)、四基因修饰(TKO/hCD55)和六基因修饰(TKO/hCD55/hCD46/hTBM)红细胞与人血清的免疫相容性和免疫差异。方法 收集20名不同血型志愿者的血液,将WT、TKO/hCD55和TKO/hCD55/hCD46/hTBM红细胞、ABO-相容(ABO-C)及ABO-不相容(ABO-I)人红细胞分别暴露于不同血型人血清中,检测血凝集、抗原抗体结合(IgG、IgM)水平和补体依赖细胞毒性,评估2种基因修饰红细胞与人血清的免疫相容性。结果 ABO-C组未出现明显凝集;WT组和ABO-I组凝集水平高于TKO/hCD55组和TKO/hCD55/hCD46/hTBM组(均为P<0.001)。WT组红细胞裂解水平高于ABO-C组、TKO/hCD55组和TKO/hCD55/hCD46/hTBM组;ABO-I组红细胞裂解水平高于TKO/hCD55组、TKO/hCD55/hCD46/hTBM组(均为P<0.01)。TKO/hCD55组红细胞IgM和IgG结合水平均低于WT组和ABO-I组;TKO/hCD55/hCD46/hTBM组红细胞IgG和IgM结合水平低于WT组,IgG低于ABO-I组(均为P<0.05)。结论基因修饰红细胞的免疫相容性优于野生型,并接近于ABO-C,人源化红细胞在血资源奇缺时可考虑作为血液来源。
陈蕾佳崔梦一宋翔宇王恺贾志博杨鎏璞董阳辉左浩辰杜嘉祥潘登科许文静任洪波赵亚群彭江
关键词:异种移植异种抗原凝集
一种检测红细胞免疫粘附功能的循环检测系统及方法
本发明公开了一种检测红细胞免疫粘附功能的循环检测系统及方法,该系统包括:流动小室、垫圈、流动相储液瓶、蠕动泵、硅胶软管以及设置有载玻片的细胞培养皿,所述垫圈垫于所述载玻片边缘上,所述流动小室盖于垫圈上;再以硅胶软管将流...
尹伟侯震范阔海孙娜孙盼盼孙耀贵李宏全
一种影响红细胞数目的SNP分子标记
本发明属于分子标记筛选领域,涉及一种影响红细胞数目的SNP分子标记。该分子标记尤其与80日龄红细胞数性状SNP分子标记相关,克隆自登陆号为MARC0065518基因,通过基因芯片技术对该基因进行分型筛选得到一种与聚...
刘向东李信颉赵书红李新云南九红尹立林唐振双杜小勇朱猛进张杰
文献传递
一种与红细胞数目性状相关的SNP分子标记
本发明属于分子标记筛选技术领域,具体涉及一种与红细胞数目性状相关的SNP分子标记。该分子标记克隆自登陆号为ASGA0068286的基因,通过基因芯片技术对该基因进行分型筛选得到一种与红细胞数目性状相关的分子标记,该...
刘向东蒋贝加赵书红杜小勇李新云南九红尹立林赵志超朱猛进张杰
文献传递
PAMs移除红细胞表面GFP-Escherichia coli的体外观察被引量:2
2021年
为了观察红细胞肺泡巨噬细胞(PAMs)相互作用以清除免疫复合物的生物学过程,采用显微镜技术和流式细胞技术,借助平行板流动小室灌流系统构建红细胞免疫黏附致敏GFP-Escherichia coli与PAMs的细胞动态互作模型,并对GFP-Escherichia coli从红细胞表面向PAMs转移的过程进行了研究。结果表明,黏附有GFP-Escherichia coli的红细胞流动至PAMs处停留,绿色荧光点位于红细胞与PAMs交接处。随后,红细胞脱离连接,GFP-Escherichia coli完全转移至PAMs并被PAMs吞噬清除。试验成功拍摄到PAMs移除红细胞表面GFP-Escherichia coli的过程,可为红细胞免疫黏附介导免疫复合物清除的研究提供可视化的证据。
凌小雅朱乐乐孙加乐王缘张睿玉薛晓姝尹伟
关键词:猪红细胞
聚肌胞感染后红细胞数目性状相关的SNP分子标记
本发明属于分子标记制备技术领域,具体涉及聚肌胞感染后红细胞数目性状相关的SNP分子标记。该分子标记克隆自登陆号为DIAS0002844的CTTNBP2基因,通过PorcineSNP60<Image file="RE-...
刘向东南九红赵书红李新云赵志超张杰朱猛进许月园胡明阳王昇
文献传递
9号染色体基因间区单核苷酸多态作为红细胞数目性状的分子标记
本发明属于分子标记筛选技术领域,具体涉及9号染色体基因间区单核苷酸多态作为红细胞数目性状的分子标记。通过基因芯片技术对登陆号为ASGA0082606基因进行分型,筛选得到一种与33日龄红细胞数目性状相关的分子标记...
刘向东王梦芬杜小勇赵书红李新云尹立林唐振双赵志超朱猛进张杰
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红细胞ECR1-like膜结合肽段、多克隆抗体、制备方法及应用
本发明属于红细胞ECR1‑like膜结合肽段抗体技术领域,具体涉及一种红细胞ECR1‑like膜结合肽段、多克隆抗体、制备方法及应用。红细胞ECR1‑like膜结合肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,为I...
尹伟李宏全范阔海孙娜孙耀贵
文献传递
一种检测红细胞免疫粘附功能的循环检测系统及方法
本发明公开了一种检测红细胞免疫粘附功能的循环检测系统及方法,该系统包括:流动小室、垫圈、流动相储液瓶、蠕动泵、硅胶软管以及设置有载玻片的细胞培养皿,所述垫圈垫于所述载玻片边缘上,所述流动小室盖于垫圈上;再以硅胶软管将流...
尹伟侯震范阔海孙娜孙盼盼孙耀贵李宏全
文献传递

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尹伟
作品数:71被引量:86H指数:5
供职机构:山西农业大学
研究主题:猪红细胞 CR1 苦参碱 LIKE 补体受体
赵书红
作品数:533被引量:615H指数:13
供职机构:华中农业大学
研究主题:分子标记 标记辅助选择 性状相关 碱基 猪免疫
刘向东
作品数:122被引量:41H指数:4
供职机构:华中农业大学动物科学技术学院
研究主题:分子标记 标记辅助选择 母猪 猪免疫 分子标记筛选
李宏全
作品数:297被引量:1,295H指数:17
供职机构:山西农业大学
研究主题:黄芪多糖 苦参碱 肉鸡 CR1 猪红细胞
李新云
作品数:299被引量:138H指数:7
供职机构:华中农业大学
研究主题:分子标记 标记辅助选择 性状相关 猪免疫 性状