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搜索到1607篇“ 牛乳腺上皮细胞“的相关文章

一种用于调节牛乳腺上皮细胞的氯化锂的应用方法: 本发明涉及一种氯化锂的应用，提供了一种用于调节牛乳腺上皮细胞的氯化锂的应用方法，包括氯化锂对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白和乳脂合成影响的应用，以及氯化锂对奶牛乳腺上皮细胞共轭亚油酸（CLA）合成影响的应用。本发明中氯化锂可以有...; 金永成宗金鑫沈景林史旭东刘馨璐刘浃怡

靶向敲除牛乳腺上皮细胞TARDBP基因的sgRNA及其构建的细胞株: 本发明提供了一种靶向敲除牛乳腺上皮细胞TARDBP基因的sgRNA及其构建的细胞株。该sgRNA包括sgRNA1、sgRNA2，sgRNA的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示。本发明的sg...; 张亚冉张清兰高亚平王秀革肖遥魏晓超鞠志花杨春红姜强王金鹏刘文浩黄金明

miR-let-7a对脂磷壁酸诱导炎性牛乳腺上皮细胞增殖和凋亡的作用: 2024年; [目的]研究微小RNA let-7a(microRNA let-7a,miR-let-7a)对脂磷壁酸(Lipoteichoic acid,LTA)诱导的炎性奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)的增殖和凋亡作用。[方法]通过实时荧光定量PCR(Quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、实时细胞分析仪和流式细胞术检测过表达和抑制表达miR-let-7a在炎性MAC-T中的影响。[结果]qRT-PCR检测结果显示,转染miR-let-7a模拟物会使炎性MAC-T细胞中miR-let-7a的表达量极显著上调(P<0.001),转染miR-let-7a抑制剂会使细胞中miR-let-7a的表达量极显著下降(P<0.001);RTCA结果显示,转染miR-let-7a模拟物能明显促进MAC-T细胞增殖,转染miR-let-7a抑制物会使MAC-T细胞的增殖受到抑制;流式细胞术结果显示,转染miR-let-7a模拟物的MAC-T细胞的凋亡率显著降低(P<0.01);而转染miR-let-7a抑制剂则与之相反,MAC-T细胞的凋亡率显著升高(P<0.01)。即过表达miR-let-7a可以促进MAC-T细胞增殖,并降低细胞的凋亡率。而抑制表达miR-let-7a的作用与之相反,抑制表达miR-let-7a使MAC-T细胞的增殖下降,细胞的凋亡率增大。[结论]miR-let-7a是一种抑制炎症调节因子,其过表达可以缓解奶牛乳腺炎,为阐明奶牛乳腺炎的分子调控机制奠定基础。; 徐萍炊寒冰王彤申祥张晓建; 关键词：奶牛乳腺上皮细胞脂磷壁酸

脂多糖与钙离子共处理的牛乳腺上皮细胞miRNA表达谱的比较分析: 2024年; 【目的】探索钙离子对牛乳腺上皮细胞炎症反应的调控作用,比较分析脂多糖与钙离子共处理的牛乳腺上皮细胞的miRNA表达谱。【方法】使用脂多糖处理牛乳腺上皮细胞构建炎症反应模型,检测不同浓度(0.5~6.6 mmol/L)钙离子和脂多糖(50μg/mL)共处理的牛乳腺上皮细胞的炎症因子转录水平。提取正常、脂多糖处理、脂多糖与钙离子共处理牛乳腺上皮细胞样本中总RNA,每组各3个样本。对9个RNA样本进行质量评估,并对其开展miRNA测序和生物信息学分析,最后对3组共有差异表达miRNA进行实时荧光定量PCR验证。【结果】在牛乳腺上皮细胞炎症模型中,高浓度钙离子可抑制炎症因子的转录。9个样本的clean reads在raw reads中占比为93.86%~98.18%,序列分布长度均集中在21~24 nt之间。3组样本的组内相似性高,而组间差异度高。3组样本共鉴定出47个差异表达miRNA,共有差异表达miRNA分别为bta-miR-11980、bta-miR-1246和bta-miR-677。GO功能和KEGG通路富集分析显示,差异表达miRNA的靶基因显著富集于细胞通讯调节、信号调节、内膜系统、系统发育、细胞发育过程、细胞分化等GO条目,显著富集于HIF-1信号通路、ErbB信号通路、TNF信号通路、突触囊泡周期、肌醇磷酸代谢途径等通路。实时荧光定量PCR验证结果显示,3组样本共有差异表达miRNA(bta-miR-677和bta-miR-1246)表达趋势与转录组测序结果一致。【结论】钙离子通过调控牛乳腺上皮细胞内bta-miR-11980、bta-miR-1246和bta-miR-677等差异表达miRNA的表达模式,间接影响牛乳腺上皮细胞炎症反应进程。; 许浩天于月通李静马志远杨彬王泽坤陀海欣齐萌; 关键词：脂多糖钙离子牛乳腺上皮细胞

橙皮苷对脂肪酸致牛乳腺上皮细胞脂质代谢紊乱及其凋亡作用的研究: 2024年; 为了探究橙皮苷(HES)对脂肪酸(NEFA)致牛乳腺上皮细胞(BMEC)脂质代谢紊乱及其凋亡的影响,试验首先选用0,0.6,1.2,1.8,2.4 mmol/L NEFA培养BMEC 24 h,通过观察细胞脂滴积累程度、检测三酰甘油(TG)含量及过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)基因相对表达量筛选出NEFA最佳使用浓度。选用不同浓度HES培养细胞24 h,通过检测细胞存活率筛选出HES最佳浓度。将BMEC分为对照组、NEFA组和NEFA+HES组,其中对照组细胞只用完全培养液处理24 h,NEFA组只用最佳浓度的NEFA处理24 h,NEFA+HES组使用最佳浓度NEFA及最佳浓度HES共同处理24 h,采用实时荧光定量PCR和Western-blot技术检测脂质代谢紊乱相关指标腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)、磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶(p-AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、固醇调节元件蛋白-1c(SREBP-1c)、PPAR-γ、酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)和细胞凋亡通路相关指标B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、半胱氨酸蛋白酶9(Caspase 9)基因和蛋白表达情况,并通过TUNEL检测细胞凋亡情况。结果表明:NEFA和HES最佳使用浓度分别为1.2 mmol/L、20μg/m L。与对照组相比,NEFA组细胞ACC、PPAR-γ、ACOX1、SREBP-1c基因和蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),p-AMPK/AMPK蛋白相对表达量显著下降(P<0.05),Bax、Caspase 3、Caspase 9基因和蛋白相对表达量显著上升(P<0.05),Bcl-2基因和蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),细胞凋亡数显著升高(P<0.05)。与NEFA组相比,添加20μg/m L HES后显著逆转了NEFA诱导的上述指标的变化(P<0.05)。说明HES可能通过调控脂质代谢和抑制细胞凋亡改善NEFA诱导的BMEC损伤。; 于权麟王思爽孙子涵岳宇坤董俊丽李婧娴陈永平刘焕奇; 关键词：橙皮苷脂肪酸牛乳腺上皮细胞脂质代谢

丁酸钠通过G蛋白偶联受体41介导蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路刺激牛乳腺上皮细胞增殖被引量：1: 2024年; 本试验旨在研究丁酸钠(SB)刺激牛乳腺上皮细胞(BMECs)增殖的分子机制。采用单因素设计,以含不同浓度(0、15、30、45、60和75μmol/L)SB的DMEM/F12培养基(含10%新生胎牛血清)培养BMECs,通过细胞计数试剂盒(CCK⁃8)检测细胞活性,确定适宜SB浓度。然后以对照(0μmol/L)和适宜SB浓度培养BMECs,并采用蛋白激酶B(Akt)阻断剂(AKT⁃IN⁃1)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)阻断剂雷帕霉素(Rap)或小干扰RNA(siR⁃NA)沉默G蛋白偶联受体41(GPR41)对信号通路及受体进行处理,检测BMECs细胞增殖、凋亡以及GPR41和Akt/mTOR信号通路相关基因和蛋白表达的变化。结果表明:1)与对照组相比,60μmol/L的SB显著提高了BMECs细胞活力(P<0.05),75μmol/L的SB显著抑制了BMECs细胞活力(P<0.05);60μmol/L的SB极显著增加了增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白A2(CCNA2)和细胞周期蛋白D1(CCND1)的mRNA相对表达量(P<0.01),显著增加了PCNA和细胞周期蛋白A1(CCNA1)的蛋白相对表达量(P<0.05)。2)与对照组相比,60μmol/L SB显著或极显著提高了B细胞淋巴瘤2(BCL2)的mRNA和蛋白相对表达量及BCL2/B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(BAX)比值(P<0.05或P<0.01),显著或极显著降低了BAX、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase⁃3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase⁃9)的mRNA和蛋白相对表达量(P<0.05),同时显著或极显著提高了磷酸化蛋白激酶B(p⁃Akt)/Akt和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p⁃mTOR)/mTOR比值(P<0.05或P<0.01)。60μmol/L的SB对Akt和mTOR信号通路的激活被AKT⁃IN⁃1极显著阻断(P<0.01),而Rap抑制mTOR完全逆转了60μmol/L SB对BMECs增殖的促进作用以及增殖基因和蛋白表达的改变(P<0.05或P<0.01),但不影响与凋亡和SB激活的Akt信号通路相关的mRNA或蛋白表达(P>0.05)。3)与对照组相比,60μmol/L的SB极显著提高了GPR41的mRNA相对表达量(P<0.01),显著提高了GPR41蛋白相对表达量(P<0.05)。GPR41 siRNA沉默GPR41后完全逆�; 张静卜丽君郎姣姣刘亚鹏夏呈强霍文婕刘强; 关键词：信号通路牛乳腺上皮细胞增殖丁酸钠

miR-196a调控牛乳腺上皮细胞增殖的分子机制研究: 陈冠何

miR-425-5p通过靶向TOB2调节牛乳腺上皮细胞增殖分子机制研究: 李宇超

利用CRISPR/Cas9技术制备BLG基因敲除牛乳腺上皮细胞系: 2024年; 旨在利用CRISPR/Cas9系统构建BLG基因敲除牛乳腺上皮细胞系(bovine mammary epithelial cells,bMECs),同时检测BLG基因敲除后对细胞的影响。本研究利用体外切割试验筛选获得靶向牛的BLG基因的第一外显子序列的3条sgRNA,与CRISPR/Cas9表达载体电转染入bMECs,利用浓度为1.8μg·mL^(-1)嘌呤霉素和6μg·mL^(-1)稻瘟菌素双药筛和PCR分析鉴定获得BLG基因编辑的单克隆细胞株;利用Western blot(WB)验证细胞BLG表达;绘制生长曲线和CCK-8试验检测BLG基因敲除对bMECs细胞增殖的影响;同时根据sgRNA序列,对基因组上潜在脱靶位点进行PCR测序分析。经筛选和PCR序列分析,共筛选获得了9株BLG基因编辑细胞株,其编辑效率为90%(9/10),其中4株细胞株BLG基因大片段删除。序列分析结果显示,单克隆细胞株编辑位点呈现片段插入缺失和碱基替换等多种编辑类型,WB结果显示敲除细胞株BLG蛋白表达显著降低,且细胞生长曲线和CCK-8检测结果表明BLG基因敲除的细胞生长速度加快。本研究利用CRISPR/Cas9技术成果构建了牛乳腺上皮细胞BLG基因高效敲除方法,BLG基因敲除后可显著影响牛乳腺上皮细胞的增殖,为探究BLG敲除牛在乳腺上皮细胞水平探究其功能机制提供细胞模型。; 丁修虎林志平赵芳陈坤琳仲跻峰张燕高运东李惠侠王慧利张建丽丁强

miR-182对牛乳腺上皮细胞中乳糖合成的影响被引量：2: 2023年; micro RNAs(miRNAs)是一类在生物基因组中存在的经典的非编码蛋白的内源性RNA基因(non-coding RNAs,nc RNA),本实验将以健康的处于泌乳期的中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞(Dairy cow mammary epithelial cells,DCMECs)为细胞模型,探究bta-miR-182对DCMECs中乳糖合成的调节作用。首先通过在线生物学信息网站预测miR-182与编码细胞上葡萄糖转运关键蛋白GLUT1的基因SLC2A1可能存在靶向结合关系,并通过双荧光素酶实验进行验证。其次采用脂质体转染技术体外瞬时转染miR-182 mimics进入DCMECs中,通过实时荧光定量PCR及western blotting技术,检测SLC2A1基因表达及GLUT1蛋白表达水平的变化。再收集细胞培养上清液,通过牛乳糖酶联检测试剂盒检测奶牛乳腺上皮细胞中乳糖含量水平的变化。实验结果显示mi R-182对奶牛乳腺上皮细胞中的乳糖的合成有明显影响作用,即miR-182对SLC2A1的表达具有明显的靶向负调控作用,且对DCMECs中乳糖的合成具有显著抑制作用,说明miR-182通过靶向调节SLC2A1的表达对奶牛乳腺上皮细胞中乳糖的合成进行负调控。; 朱云菲贾聚晨赵天夺王若薇张莉崔英俊王春梅; 关键词：奶牛乳腺上皮细胞乳糖

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