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白细胞介素18、单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因联合修饰骨髓间充质干细胞治疗脑胶质瘤被引量:4
2010年
目的了解骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)联合转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因(HSV-tk)和白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)后在荷瘤大鼠体内的治疗作用。方法提取1周龄大鼠骨髓培养大鼠骨髓间充质干细胞。骨髓间充质干细胞转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因(BMSCs/tk)或白细胞介素18(BMSCs/IL-18)或联合转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因、白细胞介素18(BMSCs/tk/IL-18),而后进行体内外试验检测其抗肿瘤作用。检测荷瘤鼠脾脏淋巴细胞免疫活性,采用TUNEL方法检测胶质瘤内的凋亡细胞,抗-CD34染色检测微血管密度(MVD),检测淋巴细胞的浸润,记录试验大鼠的生存期。结果骨髓间充质干细胞可稳定转染IL-18及tk基因,BMSCs/tk和BMSCs/IL-18/tk均显示了明显的旁观者效应,荷瘤鼠移植BMSCs/IL-18或BMSCs/IL-18/tk后,血清白细胞介素2和干扰素-γ浓度明显增高,并且接受移植的荷瘤鼠再次受到C6细胞冲击后可诱导快速的抗肿瘤免疫反应。微血管密度检测显示,BMSCs/IL-18(4.50±2.19)、BMSCs/tk/IL-18(3.65±2.13)与对照组(7.15±2.11)、PBS组(7.55±1.64)、BMSCs组(7.80±2.28)、BMSCs/tk组(7.65±1.84)比较有明显低的微血管密度(P<0.05),通过TUNEL检测、浸润淋巴细胞计数、细胞因子浓度及荷瘤鼠生存期比较,BMSCs/IL-18/tk比BMSCs/IL-18或BMSCs/tk显示了更加明显的抗肿瘤作用,BMSCs/IL-18/tk组生存期明显延长。结论联合转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因和白细胞介素18的骨髓间充质干细胞显示了明显的抗恶性胶质瘤作用,骨髓间充质干细胞可能成为一种理想的治疗颅内胶质瘤的基因治疗载体。
李春晖焦保华康春生史彦芳郭毅崔凯
关键词:骨髓间充质干细胞白细胞介素18胶质瘤
人端粒酶逆转录酶启动子调控的溶瘤腺病毒联合单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因治疗肝癌的实验研究
目的:观察人端粒酶逆转录酶启动子调控的溶瘤腺病毒联合单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因(AdETK)对人肝癌细胞(HepG2)的杀伤作用。方法:利用不同的MOI Ad-ETK感染体外培养的HepG2细胞,以加入羟基无环鸟(GC...
郑斐群杨仁杰许尹吴彬
关键词:溶瘤病毒胸苷激酶基因HEPG2细胞
文献传递
单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因转染骨髓基质干细胞治疗大鼠脑胶质瘤被引量:3
2007年
目的 研究转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶(HSV-tk)基因的骨髓基质干细胞(BMSCs)对大鼠脑胶质瘤的治疗作用。方法 原代培养BMSCs,AdCMV-tk转染BMSCs。逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测BMSCs/tk对tk基因的转录。以BrdU标记BMSCs/tk,观察其趋瘤性。四甲基偶氮唑盐(MTr)法检测其对C6细胞的旁观者效应。将BMSCs/tk注入脑胶质瘤大鼠肿瘤对侧脑组织,原位末端标记(TUNEL)法检测脑内肿瘤细胞凋亡,动态MRI监测肿瘤体积的变化,观察荷瘤鼠生存期。结果全骨髓细胞培养法可获得纯化的BMSCs。感染AdCMV-tk 21d后,BMSCs仍有明显的tk基因表达。转染tk基因后的BMSCs仍具有明显的趋瘤性。BMSCs/tk不仅在体外可产生明显的旁观者效应,在荷瘤鼠脑内也显示了明显的诱导肿瘤细胞凋亡的旁观者效应,凋亡阳性率为20.38%±2.57%,与BMSCs组(2.56%±0.52%)和对照组(2.74%±0.38%)相比,差异均有统计学意义(P值分别为0.023和0.025)。BMSCs/tk移植3周时,BMSCs/tk组、BMSCs组和对照组肿瘤体积分别为(8.28±2.64)、(134.51±16.37)和(147.22±31.05)mm^3,BMSCs/tk组远小于BMSCs组(P=0.001)和对照组(P〈0.01),并且部分大鼠脑内肿瘤消失。BMSCs/tk组大鼠生存期为(52.60±13.11)d,与对照组相比明显延长(P=0.01)。结论 HSV-tk转染的BMSCs可能成为脑胶质瘤治疗的有效手段。
李春晖焦保华
关键词:干细胞单纯疱疹病毒-胸苷激酶胶质瘤基因治疗
病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因杀伤人膀胱癌细胞的实验研究被引量:1
2007年
目的探讨HSV-tk/GCV系统基因治疗膀胱癌细胞的方法及结果。方法与结果采用了带有CMV启动子驱动HSV-tk基因的重组腺病毒载体,体外转染HTB9细胞后对GCV敏感性增强。当MOI=100时,HTB9细胞的IC50为2.5mg/L,病毒浓度降低,GCV对细胞的杀伤效率亦降低。将不同比例的tk+细胞和tk-细胞混合后加入10mg/L GCV,发现HSV-tk/GCV系统有很强的“旁观者效应”。结论HSV-tk/GCV系统是一种有效、安全地治疗膀胱癌的新方法。
潘浩温端改郭震华严春寅浦金贤侯建全
关键词:膀胱癌腺病毒旁观者效应
人端粒酶逆转录酶启动子调控的单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因重组腺病毒的构建及治疗膀胱癌的实验研究
我们应用hTERT启动子,构建了hTERT启动子调控的携带HSV-tk基因的重组腺病毒载体,将其导入人膀胱癌细胞,观察它在体内和体外对膀胱癌细胞的杀伤效应.结论1本研究成功构建了分别由hTERT启动子和CMV启动子调控的...
王亚轩
关键词:单纯疱疹病毒胸苷激酶基因腺病毒膀胱癌
单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因治疗对前列腺癌治疗的联合应用
2003年
张东青许纯孝
关键词:前列腺肿瘤基因疗法
经肝动脉或瘤体注射单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因治疗兔肝癌被引量:2
2003年
目的 观察瘤体内直接注射或经肝动脉注射载有单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV TK)基因的EB病毒表达质粒 pDR2 /TK、丙氧鸟 (GCV )对原位兔肝癌的治疗效果。 方法 制作兔原位肝癌模型 (VX2 ) ,瘤体注射或经肝动脉注射质粒 pDR2 /TK ,腹腔注射GCV连续 10d。RT PCR检测肝癌HSV TK表达 ;螺旋CT监测肝癌大小 ,并观察兔存活时间。结果TK基因导入 10d后 ,直接注射组TK在肝癌组织强表达 ,癌旁组织弱表达 ,正常肝组织不表达 ;肝动脉注射组TK基因在肝癌表达稍强于癌旁及正常肝组织。直接注射组肿瘤大小 ( 3 .5 5± 0 .3 9)cm ,与经肝动脉注射+肝动脉结扎组肿瘤大小 ( 3 .70± 0 .3 7)cm无明显差别 (P >0 .0 5 ) ,但均明显小于对照组。瘤体直接注射TK基因 +GCV治疗组动物平均存活时间 ( 5 9.8± 3 .3 )d、肝动脉注射组 +肝动脉结扎组( 5 4.8± 4.5 )d明显长于各对照组 (P均 <0 .0 1)。结论 对实验性兔肝癌 ,瘤体内直接注射或经肝动脉注射导入治疗基因后 ,HSV TK/GCV系统具有较好的治疗效果。
丁庆吴在德陈孝平陈立波阿卜杜詹永强杨炼张帆胡俊波
关键词:瘤体注射基因治疗肝癌单纯疱疹病毒-胸苷激酶
逆转录病毒介导单纯疱疹病毒胸苷激酶基因对胰腺癌细胞的杀伤作用
2002年
赵亚刚张宏斌
关键词:逆转录病毒介导单纯疱疹病毒胸苷激酶基因胰腺癌细胞杀伤作用
逆转录病毒介导单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因对胰腺癌细胞的杀伤作用被引量:1
2002年
目的 观察单纯疱疹病毒 胸苷激酶 (HSV tk) /丙氧鸟 (GCV)基因治疗系统在体内外对人胰腺癌细胞的杀伤效应。方法 构建含HSV tk基因的重组逆转录病毒载体pDOR tk neo ,经病毒包装细胞PA31 7产生重组逆转录病毒 ,后者将HSV tk基因转入人胰腺癌细胞系PC 2细胞内 ,筛选出稳定表达HSV tk的细胞克隆PC 2 /tk。测定PC 2 /tk细胞在体外对GCV的敏感性及其旁观杀伤效应 ;PC 2 /tk细胞在裸鼠皮下成瘤 ,观察GCV的治疗作用。结果 GCV对PC 2 /tk细胞有明显的杀伤作用 ,且其作用呈现剂量和时间依赖性特点以及旁观杀伤效应 ,对母本细胞则无明显毒性。裸鼠腹腔注射GCV后对移植瘤有明显治疗作用。结论 表达HSV tk的人胰腺癌细胞在体内外均可被GCV有效杀伤。
赵亚刚周兰周梅花张宏斌杜标炎
关键词:基因疗法逆转录病毒胸苷激酶
重组单纯疱疹病毒-胸苷激酶和人白介素-2基因痘苗病毒真核表达载体的构建
2001年
目的 构建含单纯疱疹病毒 胸苷激酶 (HSV tk)和人白介素 2 (hIL 2 )基因的痘苗病毒真核表达载体 pMJ6 0 1,为进一步实施胃癌的基因治疗作必要的准备。 方法 利用目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切、DNA序列分析等多种基因工程技术 ,将纯化回收的HSV tk和hIL 2分别与 pMJ6 0 1进行连接、转化并鉴定。 结果 分别用BamHⅠ HindⅢ和SalⅠ BamHⅠ酶切位点 ,将HSV tk与hIL 2DNA成功地克隆到pMJ6 0 1真核表达载体上。结论 重组HSV tk +hIL 2基因 pMJ6 0 1的构建 ,为进一步研究胃癌的基因治疗打下坚实的基础。
郜恒骏朱红音顾伟齐楼屹任卫平萧树东
关键词:单纯疱疹病毒-胸苷激酶白介素-2痘苗病毒基因治疗真核表达载体

相关作者

焦保华
作品数:245被引量:876H指数:12
供职机构:河北医科大学第二医院
研究主题:脑胶质瘤 胶质瘤 神经胶质瘤 人脑胶质瘤 显微手术治疗
李春晖
作品数:79被引量:191H指数:8
供职机构:河北大学附属医院
研究主题:胶质瘤 脑胶质瘤 骨髓基质干细胞 树突状细胞 垂体腺瘤
郜恒骏
作品数:227被引量:727H指数:13
供职机构:国家工程研究中心
研究主题:组织芯片 幽门螺杆菌 消化道肿瘤 生物样本库 肿瘤研究
萧树东
作品数:613被引量:8,555H指数:41
供职机构:上海交通大学医学院附属仁济医院
研究主题:幽门螺杆菌 胃癌 幽门螺杆菌感染 胃肿瘤 根除幽门螺杆菌
刘刚
作品数:23被引量:58H指数:4
供职机构:中南大学湘雅医院
研究主题:腹腔镜 肝肿瘤 神经传导速度 胰十二指肠切除术 3D打印