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基因1型人和7型骆驼HEV衣壳蛋白昆虫细胞的表达及其免疫学活性分析
闫振达
梅毒螺旋体Hsp40蛋白的表达、纯化及免疫学活性分析被引量:1
2021年
目的表达梅毒螺旋体(Tp)Hsp40蛋白并分析其免疫学活性。方法利用软件预测TpHsp40蛋白的B细胞表位,构建重组质粒pET28a-TpHsp40,转化大肠埃希菌BL21 star(DE3),培养后利用IPTG诱导重组TpHsp40蛋白的表达。收集菌体,破碎、离心后用Ni2+层析柱进行纯化。收集80、120和200 mmol/L咪唑洗脱蛋白,经脱盐、去内毒素后取纯度良好的一组TpHsp40蛋白免疫小鼠,制备抗血清,采用ELISA检测抗体效价并分型。取小鼠脾脏,制成脾细胞悬液,采用CCK-8法检测淋巴细胞增殖情况,ELISA法测定淋巴细胞分泌的细胞因子水平。结果生物信息分析TpHsp40含有多个B细胞表位。构建的重组质粒转染DE3后经IPTG诱导表达分子质量单位约为42.4 ku的重组TpHsp40蛋白,经亲和层析纯化后免疫小鼠,能够刺激产生高滴度(105log10)的血清抗体。且能够诱导小鼠淋巴细胞增殖(SI值为2.41)和IFN-γ、TNF-α高表达,但不能够诱导Th2型细胞因子表达。结论重组表达的梅毒螺旋体TpHsp40蛋白能够诱导小鼠产生Th1型应答,有望成为Tp疫苗的新靶点。
伍仙何树光
关键词:梅毒螺旋体表达纯化免疫学活性
猪繁殖呼吸综合征病毒的NSP7蛋白密码子优化和表达及其免疫学活性鉴定被引量:1
2019年
目的:提高蓝耳病毒NSP7基因的表达水平和促进其可溶性表达,验证重组蛋白的免疫学活性,为猪繁殖呼吸综合征血清鉴定奠定基础。方法:通过同源性分析软件分析28株NSP7基因的保守性,抗原表位预测网站预测NSP7蛋白的抗原表位,可溶性表达预测网站分析NSP7基因可溶性表达概率,随后挑选保守性高的NSP7基因进行密码子优化并合成,最后利用SDS-PAGE探究重组蛋白表达产物存在的形式和表达的最佳条件,Western blot和ELISA探究重组蛋白的免疫学活性。结果:蓝耳病毒NSP7基因较保守,抗原表位较多,经过密码子优化后以可溶性形式表达; SDS-PAGE分析表明重组蛋白的相对分子质量约为49 k D,最佳表达条件为34℃0. 8 mmol/L IPTG 7 h; Western blot和ELISA结果显示纯化的蛋白具有免疫学活性。结论:重组蛋白以可溶性形式表达且具有免疫学活性,为PRRSV血清鉴定奠定基础。
严俊杰杨绮玲林艺君石路怀王宏唐勇
关键词:原核表达免疫学活性
核定位信号对病毒衣壳蛋白在E.coli中表达的影响及重组衣壳蛋白免疫学活性研究
本文以猪圆环病毒3型的衣壳蛋白(PCV3-CP)及其核定位信号(NLS)为研究对象,通过对PCV3-CP的NLS序列进行分析和改构,成功实现了重组PCV3-CP在大肠杆菌表达系统中的可溶性高表达。我们还利用了小鼠模型和斑...
张献
关键词:核定位信号衣壳蛋白
文献传递
与B7-H3反应性的抗体、其免疫学活性片段及其用途
本发明涉及对哺乳动物,且更特别地对人B7‑H3受体具有免疫反应性的抗体及其片段,且涉及其用途,特别是在治疗癌症和炎症中的用途。因此本发明特别地涉及能够介导,且更优选地能够加强活化针对与多种人类癌症有关的癌细胞的免疫系统的...
德瑞克·T·卢菱·黄保罗·A·摩尔弗朗辛·志芬·陈莱斯利·S·约翰逊
文献传递
抗四环素单链抗体基因表达及免疫学活性检测被引量:3
2018年
为原核表达抗四环素的单链抗体(Sc Fv),并进行免疫学活性的初步测定,将前期克隆的四环素Sc Fv全长基因克隆到p ET-24a载体后转化入大肠杆菌BL21工程菌;IPTG诱导后进行SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,间接ELISA分析纯化的表达产物的免疫活性。通过酶切鉴定法、DNA序列测定,证明目的基因构建正确,SDS-PAGE和间接ELISA分析显示表达蛋白为27.8 ku,纯化后的蛋白免疫学活性良好。表明成功表达了具有免疫学活性的四环素Sc Fv,为四环素的药物残留检测方法建立奠定了基础。
孟婷郑志明王永娟郭长明左伟勇
关键词:四环素单链抗体药物残留免疫学活性
抗氯霉素单链抗体基因表达及免疫学活性检测
2018年
旨在构建和原核表达抗氯霉素的单链抗体(Sc Fv)基因,并进行免疫学活性的初步测定。将前期克隆的氯霉素Sc Fv全长基因克隆到p ET-24a载体后转化入大肠杆菌BL21,IPTG诱导后进行SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,间接ELISA分析纯化的表达产物的免疫活性。结果:经酶切鉴定及DNA序列测定证明原核表达载体构建正确,SDS-PAGE分析显示表达蛋白为27.5 ku,间接ELISA表明纯化后的蛋白免疫学活性良好。本试验成功表达了具有免疫学活性的氯霉素Sc Fv,为氯霉素的药物残留检测方法建立奠定了基础。
郑义陈晓兰丁宁陆辉
关键词:氯霉素单链抗体免疫学活性
白耙齿菌发酵液及其不同组分免疫学活性的研究被引量:1
2018年
目的研究白耙齿菌发酵液及其不同组分的免疫学活性。方法用白耙齿菌发酵液及其不同组分灌胃小鼠,通过脾脏和胸腺指数评估对免疫器官的影响;通过白细胞计数、巨噬细胞吞噬能力、淋巴细胞增殖,评估其对免疫细胞的影响;对血清中免疫球蛋白G(Ig G)的检测评估对免疫分子的影响。结果白耙齿菌发酵液及其不同组分均可以增强小鼠的非特异性免疫、体液免疫及细胞免疫,增加血液中淋巴细胞、中性粒细胞及单核吞噬细胞的含量,增强吞噬细胞吞噬异物的能力,促使小鼠体内产生大量的抗体及免疫球蛋白,并且使T淋巴细胞的增殖能力加强,各组间没有显著区别。结论白耙齿菌发酵液及其不同组分可以提高小鼠免疫功能。
李昂袁文彬张执刚白忠秀杜大军王淑敏
关键词:发酵物免疫学活性
H3N2亚型犬流感病毒单链抗体的制备及免疫学活性分析
犬流感是一种能在犬群中水平传播的接触性传染病,患犬主要表现为发烧、打喷嚏、咳嗽、呼吸困难等症状,其病原是犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)。H3N2亚型CIV最早由韩国者分离,且证据表明...
邱冬
关键词:单链抗体免疫活性
与B7‑H3反应性的抗体、其免疫学活性片段及其用途
本发明涉及对哺乳动物,且更特别地对人B7‑H3受体具有免疫反应性的抗体及其片段,且涉及其用途,特别是在治疗癌症和炎症中的用途。因此本发明特别地涉及能够介导,且更优选地能够加强活化针对与多种人类癌症有关的癌细胞的免疫系统的...
德瑞克·T·卢菱·黄保罗·A·摩尔弗朗辛·志芬·陈莱斯利·S·约翰逊
文献传递

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张建中
作品数:410被引量:1,364H指数:17
供职机构:中国疾病预防控制中心
研究主题:幽门螺杆菌 空肠弯曲菌 肺炎支原体 耐药 引物
刘思国
作品数:377被引量:1,099H指数:17
供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题:牛分枝杆菌 结核分枝杆菌 胸膜肺炎放线杆菌 鸡传染性支气管炎病毒 牛结核病
俞东征
作品数:154被引量:651H指数:16
供职机构:中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
研究主题:鼠疫菌 鼠疫 鼠疫耶尔森菌 质粒 炭疽芽孢杆菌
王海滨
作品数:51被引量:235H指数:8
供职机构:北京市朝阳区疾病预防控制中心
研究主题:手足口病 幽门螺杆菌 流感 肠道病毒 流行性感冒
钱爱东
作品数:477被引量:1,516H指数:14
供职机构:吉林农业大学
研究主题:维氏气单胞菌 狂犬病病毒 克隆 原核表达 禽流感病毒