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一种三角褐指藻中表达外源丙酮酸磷酸双激酶的突变株用于生产岩藻黄质的方法: 本发明提供了一种三角褐指藻中表达外源丙酮酸磷酸双激酶的突变株用于生产岩藻黄质的方法，具体涉及对原CyPPDK基因进行藻类偏好性密码子优化，获得新的CyPPDK基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；构建的穿梭表达载...; 范勇李福利姜尔颖丁晓婷师晓艺; 文献传递

一种三角褐指藻中表达外源丙酮酸磷酸双激酶的突变株用于生产岩藻黄质的方法: 本发明提供了一种三角褐指藻中表达外源丙酮酸磷酸双激酶的突变株用于生产岩藻黄质的方法，具体涉及对原CyPPDK基因进行藻类偏好性密码子优化，获得新的CyPPDK基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；构建的穿梭表达载...; 范勇李福利姜尔颖丁晓婷师晓艺; 文献传递

谷子丙酮酸磷酸双激酶基因(SiPPDK1)对非生物逆境的响应被引量：1: 2021年; 通过序列比对在谷子基因组中鉴定出一个PPDK基因,命名为Si PPDK1。为揭示该基因对逆境胁迫的响应,本研究通过对Si PPDK1的基因结构、蛋白特征、功能、启动子区域顺势元件、亚细胞定位、进化特征等进行了系统的分析和预测。荧光实时定量PCR检测了该基因在苗期不同逆境、关键生育期干旱以及不同光照条件下的表达。结果表明该基因位于谷子9号染色体,含有17个内含子,有2个可变剪切。功能域分析和多序列比对发现Si PPDK1蛋白具有非常保守的序列结构,并且与其它植物PPDK蛋白非常相似。q RT-PCR表达谱分析表明Si PPDK1基因在苗期被PEG、ABA、Na Cl和低温胁迫强烈诱导。进一步研究表明Si PPDK1基因在拔节、抽穗和灌浆期干旱和不同光照强度条件下均参与了对干旱和光照的胁迫响应,推测该基因参与了谷子对非生物逆境的应答,尤其在抽穗期干旱和光照胁迫应答中起重要作用。; 杜艳伟王高鸿李颜方赵根有阎晓光王振华王玉文余爱丽赵晋锋; 关键词：谷子丙酮酸磷酸双激酶非生物逆境基因表达

利用CRISPR∕Cas9技术编辑水稻丙酮酸磷酸双激酶基因PPDK被引量：2: 2021年; 采用CRISPR∕Cas9技术,以水稻丙酮酸磷酸双激酶基因PPDK为靶基因,构建载体,用农杆菌介导的方法转化粳稻品种‘嘉花1号’,获得1个碱基A缺失的编辑突变植株ppdk3。该突变体米粒的胚乳为白色粉质,其淀粉颗粒变小,结构松散,I-KI染色溶液颜色明显比野生型浅,直链淀粉含量下降约5%,抗性淀粉含量略有增加。与野生型相比,该突变体的千粒重和单株穗数下降明显,水稻淀粉合成相关基因的转录表达水平也有大幅下降。试验表明:利用CRISPR∕Cas9技术可以有效地对水稻淀粉合成相关基因进行编辑,为稻米品质改良提供材料。; 孙佳吴清清周文昊林冬枝宋忠明董彦君; 关键词：水稻淀粉合成相关基因

籽粒苋丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)基因的克隆及其特征分析: 2019年; 丙酮酸磷酸双激酶(pyruvate orthophosphate dikinase, PPDK)是C4植物在光合过程中的关键限速酶之一。本研究采用RT-PCR 技术,从籽粒苋叶片中克隆到籽粒苋丙酮酸磷酸双激酶基因cDNA全长。核苷酸序列分析表明,该基因cDNA序列开放阅读框全长为2 871 bp (GenBank 登录号: JF907701.1),可编码956 个氨基酸,分子量为104 kD。籽粒苋丙酮酸磷酸双激酶PPDK 与长寿花(Kalanchoe fedtschenko)、冰叶日中花(M.crystallinum)和板栗(Castanea mollissima)等双子叶植物PPDK 的同源性较高,分别为82.5%、82.0%和81.4%;与稗草(Echinochloa crusgalli)、高粱(Sorghum bicolor)和玉米(Zea mays)等单子叶植物PPDK 的序列一致性分别为74.5%、74.5%和73.9%。进化树分析表明,其与禾本科植物长寿花最为接近。半定量RT-PCR 研究表明,该基因受光诱导而上调表达,且在绿色叶片中的表达水平最高。克隆籽粒苋PPDK 基因将为今后作物高光效分子育种提供备选基因。; 冯瑞云王原媛闫建俊雷梦林郝雅萍白云凤; 关键词：籽粒苋丙酮酸磷酸双激酶克隆

籽粒苋C4关键酶丙酮酸磷酸双激酶基因的原核表达及酶活性测定被引量：4: 2017年; 为了进一步探究籽粒苋丙酮酸磷酸双激酶(AhPPDK)蛋白的作用机制,构建了AhPPDK基因的原核表达载体,通过碱裂解提取质粒,经限制性内切酶酶切,采用1.0%琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物,选择正确表达的阳性重组子,将测序正确的重组质粒p EASY-E1-AhPPDK转化菌株Transetta(DE3);利用IPTG诱导蛋白表达。SDS-PAGE凝胶电泳分析表明,重组AhPPDK能在大肠杆菌Transset(DE3)中高效表达,表达的重组蛋白质分子量约为108 k Da,与预期分子量相符,且为可溶性蛋白。利用紫外分光光度法测量结果表明,原核表达的AhPPDK具有酶活性,且上清粗酶液活性高于沉淀粗酶液。研究结果可为进一步探明AhPPDK蛋白的作用机制和转基因利用奠定基础。; 贺飞燕闫建俊白云凤冯瑞云张维锋; 关键词：籽粒苋原核表达酶活测定

板栗丙酮酸磷酸双激酶基因的克隆与序列分析被引量：4: 2016年; 为探索板栗PPDK基因功能以及花粉直感效应分子机理,以板栗果实为材料,根据已登录的拟南芥、桃树、巨桉等多种其他植物物种的PPDK基因序列的保守区,设计特异性引物。利用RT-PCR技术克隆出板栗PPDK基因的编码区,并进行序列分析。结果表明,该基因长为3 293bp,包含一个完整的ORF,长2 676bp,编码892个氨基酸,分子量为97.89KDa。所编码的氨基酸序列与已知植物来源的若干PPDK基因相比,同源性大多在85%以上,证明所克隆的目的片段为PPDK基因,并将该序列登录到GenBank,登录号为KU234550。在PPDK基因所编码的氨基酸序列中发现了一个磷酸烯醇式丙酮酸利用酶磷酸化位点标记,一个拉链结构和多个磷酸化位点。同时推测出多肽链中有规则重复的构象,并同源建模PPDK蛋白整条肽链的三维空间结构。试验认为PPDK基因可能通过影响板栗光合作用进而使板栗在果实大小、淀粉含量等方面表现出明显的花粉直感效应。; 梁雪王猛石卓功; 关键词：板栗 PPDK

玉米丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白PDRP的结构与功能研究: 在自然界中,根据光合作用类型的不同,可以将高等植物分为三类:C3,C4,景天酸代谢(crassulacean acid metabolism,CAM)植物。在C4植物中,光合作用最重要的限速酶是丙酮酸磷酸双激酶(pyru...; 江伦; 关键词：PPDK; 文献传递

植物丙酮酸磷酸双激酶研究进展被引量：2: 2015年; 丙酮酸磷酸双激酶(pyruvate orthophosphate dikinase,PPDK)作为C4光合途径中一个非常重要的限速酶,其功能已经清楚,但在C3植物中以及逆境条件下的作用尚不明确。在阐述PPDK基本生物学特征的基础上,重点介绍了PPDK在C4植物和C3植物中的功能、活性调控、基因工程以及PPDK对逆境胁迫应答的研究进展,以期为植物抗逆基因挖掘及抗逆种质创制提供参考。; 姜奇彦牛风娟胡正张辉; 关键词：丙酮酸磷酸双激酶 C3植物 C4植物逆境胁迫活性调控

毛竹丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白基因克隆、原核表达及纯化: 2015年; 丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白(pyruvate,orthophosphate dikinase regulatory proteins,RP)是通过调控丙酮酸磷酸双激酶(pyruvate,orthophosphate dikinase,PPDK)参与C4途径光合碳循环途径。毛竹Phyllostachys edulis作为一种重要的经济竹种,分析克隆RP基因对于竹类植物光合作用的研究具有重大理论和应用价值。通过逆转录实时聚合酶链式反应(RT-PCR)成功克隆得到毛竹Pe RP1,该基因c DNA全长1 275 bp,编码425个氨基酸;经生物信息学预测,该蛋白属于kinase-PPPase超家族,主要含有UDF 299保守结构域;经多序列比对发现毛竹Pe RP1蛋白与C3植物中RP1亲缘关系较近,而与C4植物亲缘关系较远。为了研究Pe RP1的蛋白质结构,我们将Pe RP1蛋白进行原核表达,利用Ni-NTA树脂亲和层析结合分子筛(SEC)层析的方法纯化得到了Pe RP1重组蛋白。SEC纯化的结果表明:Pe RP1蛋白在溶液中主要以多聚体形式存在,二聚体及单体含量较少,推测Pe RP1蛋白可能以多聚体形式参与调控PPDK蛋白。这为今后研究该蛋白的结构与功能打下了良好基础。; 王超莉张智俊屈亚平王蕾; 关键词：毛竹基因克隆原核表达蛋白纯化

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