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αA晶体蛋白在缺氧状态下对视网膜的血管内皮细胞血管生成作用被引量:1
2018年
目的拟在体外用氯化钴处理猴视网膜血管内皮细胞系RF/6A,以模拟细胞缺氧微环境,检测αA-晶体蛋白(CRYAA)的表达是否导致缺氧环境下RF/6A细胞的行为学改变,验证CRYAA对细胞血管生成的影响。方法采用实时荧光定量PCR从3种序列不同的小干扰RNA(siRNA)中筛选能有效抑制CRYAA表达的siRNA,并通过蛋白印迹实验检测CRYAA蛋白水平的表达情况;分别采用细胞计数试剂盒-8、Transwell实验和Matrigel实验检测降低CRYAA表达对缺氧诱导的RF/6A细胞的增殖、迁移及管腔形成的作用。结果缺氧环境下,RF/6A细胞中CRYAA的基因表达较正常对照组显著上调,而仅有siRNA945可抑制CRYAA的表达上调,差异有统计学意义(P<0.01)。蛋白印迹法验证了各组CRYAA在蛋白水平的表达趋势与核酸水平一致。单纯缺氧环境能诱导RF/6A细胞增殖、迁移及管腔成形的能力增加,而siRNA945可大幅度降低缺氧所诱导的内皮细胞血管生成能力的增强,差异有统计学意义(均P<0.001)。结论在氯化钴模拟的缺氧微环境下,敲减CRYAA可显著抑制缺氧所诱导的视网膜血管内皮细胞的血管生成能力。
郑嘉琳吴绵绵张琰张红孙靖石怡
关键词:缺氧
αB晶体蛋白对大鼠视网膜缺血再灌注损伤保护作用的研究
目的:αB晶体蛋白属于小分子热休克蛋白,目前已有文献报道其在缺血再灌注中的损伤中具有保护组织器官的作用。本文探讨了αB晶体蛋白在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中是否具有保护形态学与功能学的作用以及是否通过抗氧化应激实现其保护作...
严欢
关键词:视网膜缺血再灌注损伤抗氧化应激NF-ΚB通路
慢型克山病患者血清中αB晶体蛋白表达及意义的研究
2016年
目的了解慢型克山病患者血清中αB晶体蛋白的表达情况,探索其是否可以做为克山病生物标志物的一种。方法选择慢型克山病患者和对照各40人。对其血清采用酶联免疫吸附法检测αB晶体蛋白(heat shock protein B5,HSPB5)、N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达量,丙二醛(malondialdehyde,MDA)采用比色法测定。结果αB晶体蛋白在病例组中的表达水平(368.51±231.61)低于对照组(486.06±289.08);NT-pro BNP在病例组的表达水平(11 570.61±3 969.37)高于对照组(9 403.79±5 012.81);MDA表达量病例组(5.11±3.49)高于对照组(3.43±2.80);OPN表达量在病例组(37.53±23.10)和对照组(36.59±34.99)间无差异。结论病例组αB晶体蛋白的表达量低于对照组;αB晶体蛋白有可能是克山病心肌损伤的一种心脏标志物。
陈向丽王铜冯红旗侯杰甄荣霞徐春艳王哲
关键词:慢型克山病心肌损伤标志物血清
αA晶体蛋白对视神经损伤后星形胶质细胞和RGCs轴突的作用及机制研究
由外伤、缺血、青光眼等导致的急性视神经损伤(optic nerve injury)是眼科常见的损伤类型,约占颅脑外伤的2%~5%,也是神经性致盲重要原因之一,迄今仍缺乏有效的治疗手段。视神经损伤修复与再生途径及其机制研究...
邵维阳
关键词:轴突再生星形胶质细胞反应性增生
αA晶体蛋白基因启动子与HSP70融合基因对大鼠半乳糖性白内障的抑制作用被引量:2
2014年
目的通过观察αA晶体蛋白基因启动子(αACP)与HSP70基因的融合基因表达载体(即pαACP-HSP70)对大鼠半乳糖性白内障的抑制作用,了解外源性HSP70在白内障发生发展中的作用。方法颈背部皮下注射D-半乳糖建立半乳糖性白内障大鼠模型;利用多价阳离子脂质体法包裹表达质粒,球后注射质粒到半乳糖性白内障大鼠眼部。裂隙灯观察大鼠晶状体混浊度的变化。通过荧光显微镜直接观察绿色荧光蛋白基因(EGFP)的表达。结果半乳糖+α-70组、半乳糖+HSP70组和半乳糖+EGFP组均可直接观察到大鼠晶状体上皮细胞中有绿色荧光,且半乳糖+α-70组荧光强度最强,与半乳糖+HSP70组、半乳糖+EGFP组有统计学意义(P<0.05),NS组与半乳糖+NS组未见绿色荧光蛋白表达;半乳糖+α-70组白内障出现的程度与同期的半乳糖+NS组、半乳糖+EGFP组及半乳糖+HSP70组相比明显减轻(P<0.05),并且其所出现白内障的时间亦延迟(P<0.05)。结论 pαACP-HSP70融合基因能在大鼠晶体上皮细胞内表达;外源HSP70可能起到延缓白内障发生和发展的作用。
张子萍葛正龙
关键词:HSP70融合基因白内障
αB晶体蛋白与心肌疾病
2014年
αB晶体蛋白是一种可溶性晶状体蛋白,属于小分子热休克蛋白家族.αB晶体蛋白的分子伴侣功能主要是通过与蛋白结合防止蛋白变性和聚集,从而在应激状态下保护细胞免受应激损伤.编码αB晶体蛋白的基因发生突变可引起多种心肌疾病,包括结蛋白相关性心肌病和扩张型心肌病等[1].了解αB晶体蛋白突变导致心肌疾病的各种机制有助于探究临床中此类疾病的可能治疗策略.
刘可美颜红兵
关键词:晶体蛋白心肌疾病小分子热休克蛋白晶状体蛋白蛋白变性分子伴侣
αA晶体蛋白基因启动子与HSP70融合基因表达载体的构建及鉴定被引量:4
2013年
目的构建αA晶体蛋白基因启动子与HSP70融合基因表达载体pαACP-HSP70。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术,从质粒pIRES2-EGFP-HSP70中扩增HSP70基因,将已构建的含αA晶状体蛋白基因特异性启动子活性片段(αACP)的质粒pαACP-IRES2-EGFP双酶切,回收载体片段,利用基因重组技术,将HSP70基因片段定向插入载体启动子αACP之后,构建特异性表达载体,命名为pαACP-HSP70,并通过PCR、酶切和DNA测序进行鉴定。结果构建的pαACP-HSP70质粒通过酶切图谱鉴定、PCR检测有1924 bp条带出现,通过测序显示所克隆的HSP70基因与基因库中的同种序列比较,核苷酸序列有100%的同源性。结论成功构建了晶状体上皮细胞特异性表达载体pαACP-HSP70。
姜婧怡葛正龙
关键词:基因表达HSP70基因治疗
αA晶体蛋白基因启动子与HSP70基因融合表达载体构建及其在半乳糖诱导大鼠晶状体组织的表达
目的:构建αA晶体蛋白基因启动子(αACP)与HSP70基因融合表达载体pαACP-HSP70,并检测其在半乳糖诱导的大鼠晶状体组织的表达及其对半乳糖诱导大鼠晶状体组织抗氧化系统的作用。   方法:利用PCR技术从pI...
姜婧怡
关键词:HSP70基因
文献传递
静脉注射α-晶体蛋白对视网膜神经节细胞的保护作用及对重要脏器的影响
2011年
目的观察静脉注射α-晶体蛋白对Long Evans大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞(RGC)存活的保护作用及对重要脏器的影响。方法23只Long Evans大鼠用于本实验。荧光金经双侧上丘及外侧膝状体逆行标记RGC,7d后制作视神经钳夹伤模型。3只作为正常对照组,其余20只随机分为生理盐水对照组以及1×10^-2g/L、1×10^-1g/L、1g/L α-晶体蛋白组,每组5只大鼠。视神经钳夹伤后经尾静脉分别注射1.25ml的等渗生理盐水及3个浓度的α-晶体蛋白,每2天重复注射1次,共7次。2周后对实验大鼠行RGC计数,并对肝、肾、脑、脾、肺等脏器进行病理观察。结果正常对照组RGC计数(2074±150)个/mm^2,视神经钳夹伤后2周时RGC计数,生理盐水对照组(85±15)个/mm^2,1×10^-2g/Lα-晶体蛋白组(124±26)个/mm^2,1×10^-1g/L α-晶体蛋白组(128±31)个/mm^2,1g/L α-晶体蛋白组(164±20)个/mm^2。正常对照组RGC计数显著高于其他组,3个浓度α-晶体蛋白组存活的RGC数均显著高于生理盐水对照组(F=18.660,P〈0.01)。各组肝、肾、脑、脾、肺病理观察未见充血、肿大、炎症等病理改变。结论静脉注射α-晶体蛋白对视神经损伤后RGC存活具有一定保护作用,所用α-晶体蛋白浓度对重要脏器无病理性影响。
于嘉王一
α-晶体蛋白保护视网膜神经节细胞存活及抑制小胶质细胞活化的在体研究
目的:   观察静脉注射α-晶体蛋白对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞(retinalganglion cells RGCs)存活和小胶质细胞(RetinAlmicroglia cells RMGs)活化以及对重要脏器...
于嘉
关键词:Α-晶状体蛋白小胶质细胞荧光金视神经损伤
文献传递